球孢白僵菌凝乳弹性蛋白酶(BbPr1)的纯化与特性

以几丁质为底物，加入基本盐培养基中，诱导球孢白僵菌（Beauveriabassiana）产生分解昆虫表皮的蛋白酶。诱导物中，蝉蜕诱导的蛋白酶总活性、比活较高，经超滤、离子交换层析、亲和层析、制备性IEF电洗脱纯化了一种有凝乳弹性蛋白酶（Pr1）活性的蛋白酶BbPr1。经SDS－PAGE电泳银染后是单带，HPLC凝胶过滤显示单峰。BbPr1为单体酶，分子量为33.6kD左右，pI为7.4。底物专一性测定显示，BbPr1能水解Phe或Leu形成的酸胺键和肽键。BbPrl可被PMSF抑制，表明其活性中心有Ser残基；BbPr1还可被胰凝乳蛋白酶抑制剂TPCK和凝乳弹性蛋白酶抑制剂TEI等所抑制;胰蛋白酶抑制剂beupeptin和Epianstatin，及胃蛋白酶抑制剂Pepstain对BbPr1活性无影响。还研究了BbPr1的最适作用pH和pH稳定性。

球孢白僵菌草酸钙结晶体的提取及其与毒力的关系

在人工培养基上提取分离球孢白僵菌结晶体，用傅里叶红外光谱仪定性分析确定为草酸钙结晶体。研究结果还表明：球孢白僵菌草酸钙结晶体的产量与该菌对马尾松毛虫的毒力具一定的相关性。