班氏促卵助孕汤含药血清对体外培养人卵巢颗粒细胞凋亡的影响

目的:运用血清药理学方法观察班氏促卵助孕汤对人卵巢颗粒细胞凋亡的影响。方法:向预培养24 h的人卵巢颗粒细胞中分别加入10%空白血清(对照组)、班氏促卵助孕汤含药血清(高、中、低剂量组),48 h后应用流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果:空白对照组的人卵巢颗粒细胞的凋亡率高于低、中、高3组班氏促卵助孕汤含药血清,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:班氏促卵助孕汤含药血清能明显抑制卵巢颗粒细胞的凋亡,可能是班氏促卵助孕汤调节卵巢功能的机制之一。

班氏促卵助孕汤对雷公藤多苷致大鼠卵巢功能低下模型影响的实验研究

目的建立稳定可靠的雷公藤多苷致大鼠卵巢功能低下模型,探讨国医大师班秀文补肾方剂——班氏促卵助孕汤对雷公藤多苷致卵巢功能低下大鼠的治疗作用,为今后用中药治疗卵巢功能低下提供实验基础。方法选择有正常动情周期的7～8周的育龄期SD大鼠,连续雷公藤多苷片以40mg/kg·d灌胃10周造模成功后,将45只大鼠按随机数字表法随机分为模型对照组、西药对照组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组5组,加上正常对照组,共6组。中药治疗组:分别给予给班氏促卵助孕汤中药原液1.02g/100g·d、0.507g/100g·d、0.254g/100g·d,每次0.5m L/100g,连续2周进行治疗。西药对照组:先给予戌酸雌二醇0.028mg/m L浓度,每次以0.5m L/100g灌胃,连续4天;然后给予醋酸甲羟孕酮片0.172mg/m L浓度,每次以0.5m L/100g灌胃,在第4天灌胃一次,停1天后,继续按以上序贯方法用药,连续两周。阴性对照组和模型组:造模后按每天0.5m L/100g纯净水灌胃,共2周。观察大鼠的一般情况、体重、计算卵巢指数、石蜡切片,观察卵巢的形态学变化,运用放射免疫法检测血清性激素六项水平。结果连续中药给药和西药序贯治疗2周后,模型组和正常对照组相比,造模停止后一般情况有所改善,但恢复速度比中药治疗组和西药治疗组慢。模型组的动情周期、卵巢指数、E2和P分泌仍低于正常对照组(P<0.01)。给药治疗后,与模型组相比,中药高剂量治疗组和西药组的动情周期恢复至正常水平(P<0.05),卵巢指数提高(P<0.05),E2和P分泌增加(P<0.05),生长卵泡数和黄体数数量增加(P<0.05)。但中药中剂量组和中药低剂量组在动情周期和卵巢指数、E_2和P的分泌以及生长卵泡、黄体数上差异均不明显(P均>0.05)。结论连续雷公藤多苷40mg/kg·d灌胃10周后,对雌性大鼠有一定的生殖毒性,可降低卵巢功能;班氏促卵助孕汤能明显改善卵巢功能低下状况,调节卵巢功能。

班氏促卵助孕汤对雷公藤多苷致大鼠卵巢功能低下模型卵巢指数和动情周期的影响

目的:通过动物实验观察广西中医药大学国医大师班秀文经典补肾方剂班氏促卵助孕汤对雷公藤多苷致卵巢功能低下大鼠的干预作用,探讨其治疗卵巢功能低下的机制。方法:选择有正常动情周期的7~8周的育龄期SD大鼠,连续雷公藤多苷片以40mg/kg.d灌胃10周后,应用随机数字法将45只大鼠按随机数字表法随机分为模型对照组、西药对照组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组5组,加上正常对照组,共6组。中药治疗组分别给予给班氏促卵助孕汤中药原液1.02g/100g.d、0.507g/100g.d、0.254g/100g.d,每次0.5m L/100g,连续2周进行治疗,西药对照组先给予戌酸雌二醇0.028mg/m L浓度,每次以0.5m L/100g灌胃,连续4天,然后给予醋酸甲羟孕酮片0.172mg/m L浓度,每次以0.5m L/100g灌胃,在第4天灌胃一次,停1天后,继续按以上序贯方法用药,连续2周。阴性对照组和模型组造模后按每天0.5m L/100g纯净水灌胃,共2周,观察大鼠一般情况、体重、动情周期、卵巢指数的变化。结果:模型组和正常对照组相比,造模停止后一般情况有所改善,但恢复速度比中药治疗组和西药治疗组慢。模型组的动情周期和卵巢指数均低于正常对照组(P<0.01)。给药治疗后,与模型组相比,中药高剂量治疗组和西药组的动情周期恢复至正常水平,卵巢指数提高(P<0.05),但中药中剂量组和中药低剂量组在动情周期和卵巢指数上差异不明显(P>0.05)。结论:雷公藤多苷可致雌性大鼠卵巢功能低下,表现为动情周期紊乱以及卵巢指数下降,班氏促卵助孕汤用药可恢复卵巢功能低下的动情周期紊乱和卵巢重量。

基于网络药理学和分子对接探讨班氏促卵助孕汤治疗卵巢储备功能低下的研究

目的:基于网络药理学和分子对接探讨班氏促卵助孕汤对卵巢储备功能低下的影响。方法:通过中药系统药理学(traditional Chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform,TCMSP)、中药分子机制分析中药综合数据库(traditional Chinese medicine integrative database for herb molecular mechanism analysis,TCMID)、借助中药分子机理的生物信息学分析工具(bioinformatics analysis tool for molecular mechanism of traditional chinese medicine,BATMAN-TCM)检索班氏促卵助孕汤的活性成分以及作用靶点;通过GeneCards、OMIM数据库获取卵巢储备功能低下的相关靶标。由Cytoscape软件和STRING数据库建立药物-化合物-靶标网络、靶标蛋白互作PPI网络。R语言的cluster Profiler工具包对于核心靶点展开基因本体(gene ontology,GO)功能富集以及基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析。最后,对药物活性成分与疾病靶点进行分子对接验证。结果:根据筛选条件得到245个化合物和250个药物相应靶点。PPI核心网络包含80个蛋白,关键蛋白涉及INS、IL6、APP、VEGFA、EGFR、MAPK8等。GO功能富集分析取得1296个条目(P<0.05),其中生物过程(biological process,BP)1094个,细胞组成(cell composition,CC)88个,分子功能(molecular function,MF)114个;KEGG通路富集有63条通路与卵巢储备功能低下相关(P<0.05),涉及cAMP信号通路、HIF-1信号通路、雌激素信号通路、催乳激素信号通路等。分子对接结果表明,班氏排卵促孕汤的主要活性成分槲皮素、山柰酚、β-谷甾醇与核心靶点INS、IL6、APP具有较好的结合活性。结论:班氏促卵助孕汤中的活性化合物可通过多靶点、多通路治疗卵巢储备功能低下。