球体形成实验联合药物筛选建立耐顺铂胰腺癌干细胞株

目的探索建立顺铂耐药人胰腺癌干细胞株,并进行初步鉴定。方法通过球体形成实验联合顺铂药物筛选建立耐顺铂胰腺癌干细胞株;MTT法计算耐药指数;免疫荧光半定量检测OCT-4、SOX-2表达水平,检测干细胞标记物;免疫荧光半定量检测MUC-1表达水平,检测细胞分化能力;通过流式细胞仪测量侧群细胞和表面特异抗原标记(CD44+/CD24+)检测肿瘤干细胞含量。结果耐顺铂干细胞株的耐药指数是亲代株PANC-1的71.5倍;干细胞标记物的免疫荧光检测发现,耐药株中OCT-4、SOX-2、MUC-1均有不同程度的表达;耐药干细胞株及亲代株SP细胞比例分别为(25.1±1.1)%和(7.8±0.9)%,差异有统计学意义(t=6.89,P<0.01);耐药株及亲代株中CD44+/CD24+表型的细胞亚群分别占(20.8±1.3)%和(2.4±0.8)%,差异有统计学意义(t=16.13,P<0.01)。结论球体形成实验联合顺铂药物筛选能建立耐顺铂胰腺癌细胞株,该细胞株能高效富集胰腺癌肿瘤干细胞。