壳聚糖、壳寡糖及壳聚糖酶的研究初探

壳聚糖(Chitosan)是部分或完全脱乙酸基的几丁质(Chitin)的衍生物,而壳寡糖则是壳聚糖经化学试剂或壳聚糖酶(Chitosanase)不同程度水解后的产物.壳寡糖主要应用于保健事业.壳寡糖可通过促进双歧杆菌等有益菌群的增殖.从而抑制和杀灭人体肠道病原菌,保持肠道微生态平衡,是微生态制剂的重要成分之一.壳聚糖酶被认为是植物的一种抗病相关蛋白.故有人试图通过基因工程技术,将编码壳聚糖酶的基同克隆到优良作物中,从而改良作物品质.利用壳聚糖酶的底物特异性.可进行一些特殊真菌、藻类的细胞壁组成及其特殊生理过程的研究.本室验室就球孢白僵菌产生的壳聚糖酶进行了研究.主要包括:①球孢白僵菌1316的诱变、高产壳聚糖酶突变株的筛选,以及最适产酶条件的研究;②壳聚糖酶的分离、纯化和酶学性质研究;③酶液水解胶体壳聚糖产物分析.我们以球孢白僵菌Beauveria bassiana1316为初发菌株,通过紫外线和高能电子束诱变,采用平板透明圈法初筛和摇瓶培养复筛的方法,筛选到5株高产突变株,其中1株最高产的.定名为Beauveria bassia1316-V1,其分泌壳聚糖酶能力是原始菌株的16倍.而且经传代培养,能稳定遗传.B.bassiana1316-V1的培养液上清经60％～90％硫铵分级沉淀.SephadexG-75两次层析,Chitosan-bead亲和层析。