我国部分地区土壤中的苏芸金芽孢杆菌和球形芽孢杆菌

从云南、贵州、四川和陕西4省的土壤中分离到大量苏芸金芽孢杆菌(Bacillus thuringie-msis)和球形芽孢杆菌(Bacillus sphaeticus)菌株。血清型分析表明,苏芸金芽孢杆菌分离株分属于23个血清型中的13个血清型,另有近20%的自凝型菌株及部分与所有标准菌抗血清无反应的菌株。对该两种昆虫病原细菌的生态分布规律进行了分析。研究了全部苏芸金芽孢杆菌分离株对鳞翅目、鞘翅目及双翅目的6种昆虫的毒力特性、伴孢晶体与芽孢的形态,以及晶体蛋白质成分。观察和测定了球形芽孢杆菌分离株的形态和毒力,并分析了部分菌株的晶体蛋白质成分。得到22株高效苏芸金芽孢杆菌和2株高效球形芽孢杆菌。证明苏芸金芽孢杆菌是典型的土壤微生物类群,我国西南地区土壤中的苏芸金芽孢杆菌资源十分丰富。

球形芽孢杆菌C_(3-41)杀蚊幼制剂对两种按蚊幼虫的毒杀活性

本文报道了BacillussphaericusC_(3－41)杀蚊幼制剂对大劣按蚊和中华按蚊幼虫的毒杀活性。该制剂对Ⅲ～Ⅳ龄大劣按蚊和中华按蚊幼虫的LC_(50)分别为1.212和1.846mg／L。在27±2℃以下，用1.25、2.5、5.0和10.0mg／L浓度，对Ⅲ～Ⅳ龄大劣按蚊幼虫的LT_(50)分别为33.80、16.54、13.76和12.57h。在室内外模拟试验中，15和30mg／L剂量均能在14天内杀死大劣按蚊100％；用15、30、60和120mg／L浓度的野外模拟试验中，药后20天大劣按蚊幼虫分别下降70％、73.3％、90％和95.6％。

球形芽孢杆菌对酒曲害虫黑菌虫的毒杀效果

球形芽孢杆菌(Bacillus sphaericus)是一种能产生对害虫具有专一杀虫活性蛋白的细菌,试验首次采用该菌种防治酒曲害虫黑菌虫。试验结果表明,球形芽孢杆菌液体制剂0.008mL/g,在30℃条件下24d黑菌虫校正死亡率达到100%,对大曲质量的影响较小。

固氮球形芽孢杆菌与巨大芽孢杆菌的混合增效作用

球形芽孢杆菌Bs7与巨大芽孢杆菌Bm1 0 1混合培养时具有固氮增效作用。稀释 40 0倍的巨大芽孢杆菌的无菌上清液与球形芽孢杆菌共培养 ,同样能增强后者的固氮活性。Bs7(pAB5 76 )在纯培养时的nifA表达活性为 6 849 5Miller单位 ,与巨大芽孢杆菌上清培养液进行混合培养时的表达活性为 75 0 0 4Miller单位。上述结果表明 :某些微量非碳源的活性分泌物和某些固氮调节基因可能在固氮增效作用中起重要作用。在与水稻联合培养条件下 。

球形芽孢杆菌Mtx1蛋白和苏云金杆菌Cyt1Aa晶体蛋白的协同作用

采用常规的生物测定方法确定了纯化的球形芽孢杆菌(Bacillus sphaericus)的缺失信号肽的97kDa营养期杀蚊毒素(Mosquitocidal toxin 1,Mtx1)蛋白和苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)27.3kDa的Cyt1Aa晶体蛋白对致倦库蚊(Culex quinquefasciatus)幼虫的杀虫活性。结果表明Mtx1和Cyt1Aa不同比例的混合物对致倦库蚊的毒力比单独毒素蛋白高,经统计分析表明两毒素蛋白对目标蚊幼虫具有明显的协同作用。在LC98处理浓度下,Mtx1和Cyt1Aa按3∶1混合的混合物LT50值比单独Mtx1的提前了6.36h。表明Cyt1Aa和Mtx1对致倦库蚊具有协同毒杀作用,提高对目标蚊虫的毒力、缩短半致死时间。该结果为深入研究Mtx1和Cyt1Aa的杀蚊作用方式奠定了基础,同时为其在蚊虫防治中的应用提供了新的思路和方法。

球形芽孢杆菌(Bacillus sphaericus)对抗生素的抗性

考查了27株球形芽孢杆菌有毒株对青霉素、链霉素、四环素、氯霉素、红霉素、卡那霉素、庆大霉素、麦迪霉素、核糖霉素、利福平、吖啶黄、磺胺和迭氮钠的自然抗性。结果表明,所有菌株对高浓度的链霉素和迭氮钠及低浓度的氯霉素有抗性,大部分菌株对四环素有抗性。所有菌株对所考查的其它几种抗生素敏感。

球形芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌以色列亚种杀蚊毒素间的协同作用

本研究测定了分别表达苏云金芽孢杆菌Cry4Aa、Cry4Ba、Cry11Aa、Cyt1Aa和球形芽孢杆菌二元毒素Bin的转化菌株Bt B60 1、Bt B611、Bt B640、Bt U 30和Bt CW 3全发酵培养物两两或两两以上不同组合对抗性库蚊的毒力 ,分析了杀蚊毒素间的协同作用。结果表明 ,Bin和Cry4Aa、Bin和Cry 4Ba间有明显的协同作用 ,此外 ,Cry4Aa和Cry4Ba、Cry4Aa和Cry11Aa。

球形芽孢杆菌Bs-8093发酵上清液对青枯雷尔氏菌的抑菌作用

研究发现球形芽孢杆菌Bs-8093菌株的发酵上清液对青枯雷尔氏菌强致病力菌株有抑制作用,不同配方发酵上清液对青枯雷尔氏菌强致病力菌株F．1．2-010618-07V的校正抑制率不同,最高达82．94％,最低44．93％。采用正交试验对球形芽孢杆菌Bs-8093菌株发酵培养基进行筛选,结果表明:棉籽粉、牛肉浸膏和初始pH对 Bs-8093菌株活菌数及其发酵上清液对青枯雷尔氏菌的校正抑制率都有显著影响。试验获得的最佳摇瓶配方为: 棉籽粉5．0％、牛肉浸膏0．3％(质量分数),初始pH 7．4。

球形芽孢杆菌LP1-G的发酵特性及杀蚊活性

球形芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐｈａｅｒｉｃｕｓ）ＬＰ１－Ｇ菌株在ＭＢＳ培养基上能正常生长、发育，产生位于芽孢孢外膜外的伴孢晶体。其产生的４１．９和５１．２ｋＤ二元毒素蛋白合成于芽孢形成期，另一分子量约为４９ｋＤ蛋白和二元毒素同期合成，并随着芽孢的释放而被降解。生物测定结果表明该菌株在营养体生长阶段对致倦库蚊幼虫无毒，孢子囊初期毒力较高，并在整个芽孢形成期都维持较高的毒力水平。其全发酵液对敏感和抗性库蚊幼虫都具有中等的毒杀作用，对３～４龄幼虫４８ｈ的ＬＣ_５０。值分别为０．１１３和０．１３７ｍｇ／ｍＬ。该菌株对敏感和抗性致倦库蚊幼虫的毒杀作用可能同其产生４９ｋＤ蛋白相关。

球形芽孢杆菌对酒曲害虫大谷盗的毒杀效果研究

球形芽孢杆菌(Bacillus sphaericus)LPl-G菌株能产生对害虫有毒杀作用的毒蛋白。采用该菌种防治酒曲害虫大谷盗,结果表明,在30℃下,湿度73%～75%条件下,球形芽孢杆菌的有效杀虫剂量为4mL/100g,可使大谷盗的校正死亡率达91.4%,且杀虫后大曲的糖化力、发酵力、微生物的数量变化极小。

我国海南省杀蚊球形芽孢杆菌的分离和分布

在我国海南省共采集158个各种类型的泥土样品，采用选择性培养基（PBMYS）进行样品分离，并结合形态学观察、血清学鉴定和生物测定，获得对致倦库蚊（Culexquinquefasciatus）幼虫有毒性的球形芽孢杆菌（Bacillussphaericus）73株，有毒株的分离率占样品总数的342％。血清学试验表明，新分离菌株有71株属H5a5b型，两株属在我国首次分离出比型菌株。许多球形芽bqn杆菌新菌株对致倦库蚊幼虫具有很强的毒杀作用。其中228－2和117－1菌株的丙酮粉剂效价分别为2721ITU／mg和2331ITU／mg，高于相同条件下制备的参考菌株2362丙团粉剂的效价（2218ITU／mg）。

球形芽孢杆菌C_（3－41）菌株杀蚊毒蛋白的生物合成

本文报道球形芽孢杆菌Ｃ３－４１菌株毒蛋白的生物合成的检测结果。对Ｃ３－４１菌株不同发育阶段发酵液的毒蛋白量进行了酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ），并用生物测定方法检测了发酵液杀蚊毒性，证明其毒蛋白合成量与该菌芽孢的发育和形成密切相关，同时揭示了ＥＬＩＳＡ测出的毒蛋白量与生物测定所示的杀蚊毒力具有很高的符合率。

球形芽孢杆菌Ts-1原生质体电诱导质粒转化研究

本文探讨了球形芽孢杆菌Bacillus sphaericus Ts-1原生质体电诱导质粒pHV 33转化的最佳条件:3个连续的间隔为1秒,时程为10μs,强度为21KV/cm的脉冲,使其转化频率为2.44×102转化子/μg DNA,转化效率为3.16×10-6,质粒转化吸附的饱和浓度为5μg/106CFU。利用此条件,将重组杀蚊毒蛋白克隆pJB417转入Bacillus subtilis 168M和Bacillus sphaericus Ts-1中,使得B.subtilis有了杀蚊活性,但未能提高Ts-1的毒性。

球形芽孢杆菌TS-1发酵条件的研究

本文用正交试验设计方法选出的球形芽孢杆菌发酵培养基配方,菌体数量可达到100亿/ml,芽孢形成率达到70—80%,杀蚊幼的半致死剂量在0.125ppm以下。上述的三个指标明显优于以前的报道。通过摇瓶发酵验证和50L^3小罐的放大试验,证明所有的实验结果都很稳定。使用现在的发酵配方,使每吨发酵液的成本降低了33%。

我国西南地区和陕西省土壤中苏芸金杆菌和球形芽孢杆菌资源调查简报

为考察我国土壤中苏芸金杆菌和球形芽孢杆菌的种类和分布状况,并从中获得高效和特异菌株,丰富我国杀虫微生物种质库,1988年6—8月,我们从云南、贵州、四川及陕西省采取土样3160份,从中分离出苏芸金杆菌88株,球形芽孢杆菌87株,还有部分菌株尚待确认。两种细菌的分出率(分离菌株数占土样数的百分率)皆为2.8％左右。由于在进行分离时,同一平板挑取的目标菌落一般不超过2个,因此这一分出率要低于土壤中的实际含有率。按常规免疫血清学方法进行初步血清型分析,结果表明。

球形芽孢杆菌C3-41菌株杀蚊毒素的提取及其同源性研究

从球形芽孢杆菌 C_3-41菌株芽孢-晶体复合物中分别提取孢壁蛋白(S 蛋白)和孢晶毒素。采用 SDS-PAGE 证明孢晶毒素具有43和40kD 两种多肽,但 S 蛋白只有一条104kD 的蛋白带。后者经 NaOH 处理迅速降解成43和40kD 的多肽。S 蛋白和用 Sephadex G-75提纯的孢晶毒素对三龄致倦库蚊幼虫的 LC_(50)值(48h)分别为267和10ng/ml。免疫双扩散试验证明2362、1593、Bs-10(H_(5a5b))和2297(H_(25))菌株的孢晶毒素能与 C_3-41菌株的孢晶毒素抗血清发生交叉反应,但K(H_1)、SSII-1、1404(H_2)和2315(H_(26))菌株的孢晶毒素与此抗血清不发生交叉反应。同时还证明 C_3-41菌株的 S 蛋白和孢晶毒素具有抗原同源性。

球形芽孢杆菌C_（3－41）块剂和颗粒剂防制城市致乏库蚊动虫效果评价

本文报道球形芽孢杆菌Ｃ３－４１（下称Ｂ。ｓＣ３－４１）乳剂、颗粒剂和块剂控制致乏库蚊幼虫的效果及其评价。结果表明：乳剂和颗粒剂的即杀效果比块剂好，２００ＩＴＵ／μｌ的Ｂ．ｓＣ３－４１乳剂１、２、３ｍｌ／ｍ２和１４０ＩＴＵ／μｌ的颗粒剂４．８ｇ／ｍ２，４８ｈ平均幼虫下降率．分别为８２～９６％和８８￣１００％；而１６０ＩＴＵ／μｌ的块剂４．８ｇ／ｍ２，４８ｈ平均幼虫下降率只有３３～５６％。３种剂型的持效以块剂为佳，可达３个月以上。

球形芽孢杆菌C3─41地方制剂大面积防制城市致倦库蚊的现场效果评价

本文报告１９９３年６～１０月，在武汉市水果湖地区应用球形芽孢杆菌Ｃ３─４１地方制剂大规模防制致倦库蚊的现场研究。用３ｍｇ／ｍ２乳剂处理大面积孳生地（大于２ｍ２），每１０ｄ一次，包括水塘、水沟、水槽等；用８ｇ／ｍ２的块剂处理小型容器和积水坑，一月一次。结果表明，幼虫密度下降了７０％～１００％，并能成功的控制成蚊季节性高峰。

野外致倦库蚊对球形芽孢杆菌C_(3-41)的抗性

目的：探讨野外致倦库蚊对球形芽孢杆菌Ｃ３－４１的抗性。方法：为ＷＨＯ常规生物测定方法。结果：经连续８年的生物防制，野外致倦库蚊幼虫对球形芽孢杆菌Ｃ３－４１的抗性水平高达２４５４５倍，但对球形芽孢杆菌ＬＰ１－Ｇ未表现出抗性，而对苏云金杆菌以色列亚种（Ｂ．ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓｉｓｒａｅｌｅｎｓｉｓ）的敏感性却提高１倍。

灭蚊幼球形芽孢杆菌漂浮颗粒剂研制与应用

根据蚊虫的生活习性和球形芽孢杆菌BS-10灭蚊特点,以玉米棒芯颗粒为载体、以球型芽胞杆菌BS-10为杀虫活性物质,加工制成生物灭蚊漂浮颗粒剂新剂型,经试验与示范应用,该颗粒剂具有高效,毒力效价达106.5IU/mg,每平方米水面使用颗粒剂2g,对蚊幼虫(孑孓)杀灭效果达95%以上;持效期长,药后12d,灭蚊效果达96.8%;性质稳定,室内常温储存1a,药效无变化;生产工艺简单,药剂使用方便,与环境相容性好。