紫外诱变球毛壳霉选育木聚糖酶高产菌株

木聚糖酶具有重要的潜在应用价值,为获得一株遗传性状稳定的木聚糖酶高产菌株,以木聚糖酶的酶活为评价指标,采用紫外线诱变的方法,利用单因素试验确定紫外线照射时间,通过含木聚糖的初筛培养基对紫外诱变后的菌株进行初筛,然后采用DNS法测定木聚糖酶活性对诱变菌株进行复筛。将筛选出的木聚糖酶活力最高的诱变菌株进行传代培养,测定其酶活,探讨其遗传稳定性。试验结果表明:紫外灯功率20W,照射距离30cm,照射时间120s,球毛壳霉致死率为92.35%。在此条件下进行菌株的紫外诱变获得高产木聚糖酶的正突变株15株,其中1株高产菌株Z30-56的酶活为9850IU/mL,比出发菌株提高53.7%,并且遗传性能稳定。

Eudragit L-100固定球毛壳霉菌木聚糖酶酶学性质的研究

采用可逆溶解性聚合物EudragitL-100对球毛壳菌木聚糖酶进行了吸附固定化。在1.0%EudragitL-100浓度时获得10.6IU/mg载体的固定化酶活和88.47%的酶活回收。酶固定化后最适温度不变,最适pH向碱性方向移动了一个pH单位。固定化酶热稳定性和操作稳定性显著提高,循环利用6次仍保留65%初始酶活。木聚糖水解产物测定表明,在同酶用量的条件下固定化后总还原糖产量明显高于游离酶,二者水解产物均以低聚糖为主,酶固定化后水解产物木二糖含量显著高于游离酶,成为主要的产物。木聚糖酶固定化后各方面特性明显优于游离酶,在低聚糖生产中有实际应用价值。

紫外诱变球毛壳霉原生质体选育木聚糖酶高产菌株

【目的】对球毛壳霉原生质体进行紫外诱变处理筛选出一株高产木聚糖酶菌株。【方法】实验在不同条件下制备球毛壳霉(Chaetomium globosum AS3.3601)原生质体,分析不同酶浓度、酶解温度和时间对原生质体生成率和再生率的影响,利用单因素实验确定了紫外线诱变剂量,经初筛和复筛后,DNS法测定木聚糖酶活性。【结果】结果表明:结合原生质体的生成率和再生率确定其最佳制备条件为酶浓度1.5%,酶解温度30℃,酶解时间4h,在紫外照射时间60s下处理过的原生质体,木聚糖酶活性可达到9980IU/mL。【结论】获得的诱变菌株YZ-8比原始菌株提高了92.6%,此菌株经多次传代,遗传性能稳定。

球毛壳霉生产木聚糖酶发酵条件的研究

对球毛壳霉高产木聚糖酶的发酵条件进行研究,通过对发酵温度、发酵时间、初始pH值和接种量4个影响因素的单因素试验,利用DNS酶活测定法测定其酶活,从而确定球毛壳霉产木聚糖酶的最适发酵条件。结果表明,生产木聚糖酶的最佳条件是温度为35℃,初始pH值为6.0,接种量为2%,发酵时间为48 h,在该条件下木聚糖酶活性最高,为1 869.13 U/mL。

一株球毛壳霉次级代谢产物及其体外抗肿瘤活性研究

目的研究球毛壳霉次级代谢产物及其体外抗肿瘤活性。方法2021年3—12月,采用硅胶柱色谱法、凝胶柱色谱法、半制备高效液相色谱法等分离方法和技术对球毛壳霉次级代谢产物进行分离纯化,使用NMR核磁数据及质谱数据分析鉴定化合物的结构;采用MTT法评价化合物的体外抗肿瘤活性。结果从球毛壳霉次级代谢产物中分离得到7个化合物,分别鉴定为(1)cyclo-(L-Leu-L-Trp),(2)N-acetyl-L-tryptophan,(3)N-acetyltryptamine,(4)armochaetoglobin G,(5)armochaetoglobin J,(6)armochaetoglobinK,(7)chaetoglobosinU;化合物1和3为首次从球毛壳霉中分离得到;化合物4和5对选定的人肿瘤细胞具有一定的体外抗增殖活性,IC_(50):12.58~35.28µmol/L。结论球毛壳霉能够产生结构丰富的代谢产物,其中一些代谢产物有良好的抗肿瘤活性,具有潜在药用价值,其活性化合物有待进一步挖掘。

微波诱变法筛选木聚糖酶高产球毛壳霉菌株

目的微波诱变法筛选遗传稳定的木聚糖酶高产球毛壳霉菌株。方法活化球毛壳霉菌种,制备孢子悬液,在不同功率条件下对其进行辐照处理60 s,选择致死率在80%左右的辐照功率,在此功率条件下对其进行不同时间的微波诱变,经初筛和复筛后,采用DNS法测定木聚糖酶活性,筛选木聚糖酶高产菌株,并分析其传代稳定性。结果在微波辐射时间80 s,功率240 W条件下处理的球毛壳霉孢子,致死率为89.5%;经诱变及菌种筛选,获得1株木聚糖酶高产菌株W80-8,其酶活力为7 520 U/ml,比出发菌株提高了124%;经6次传代培养,W80-8株木聚糖酶活力未见明显降低,未发生原位回复突变。结论成功筛选获得1株遗传稳定的木聚糖酶高产球毛壳霉菌株。

球毛壳霉中一个新的生物碱类化合物（英文）

从球毛壳霉固体发酵产物(Chaetomium globosum)中分离得到一个新的生物碱类化合物和5个已知的化合物,通过多种波谱学方法鉴定了所分离化合物的结构,分别为6-异戊烯基-吲哚甲酸酯(1),N-乙酰基-L-色氨酸(2),xylariol(3),(methoxymethyl)-1H-pyrrole-2-carbaldehyde (4), ergosterol (5), ergosta-4,6,8(14),22-tetraen-3-one (6)。其中,化合物1为新化合物,化合物2和3为首次从该真菌中分离得到。

元宝草共生菌球毛壳霉发酵产物的次级代谢产物研究

目的研究元宝草共生菌球毛壳霉Chaetomium globosum发酵产物的化学成分。方法采用正、反相硅胶柱色谱,凝胶sephadex LH-20柱色谱,高效液相色谱等方法进行系统分离纯化,根据化合物的理化性质,借助核磁共振等方法鉴定化合物的结构。结果从球毛壳霉发酵产物的乙醇提取液中共分离鉴定了8个化合物,分别鉴定为glolactone A(1)、4′-epialtenuene(2)、交链孢霉烯(3)、chaetomugilin Q(4)、chaetomugilin D(5)、chaetomugilide B(6)、chaetoglobosin Vb(7)、chaetoglobosin C(8)。结论化合物1为新化合物,命名为球毛壳内酯A,化合物2和3为首次从该菌中分离得到。

昆虫内生真菌Chaetomium globosum ZWC5的分离鉴定及其抗癌活性代谢产物的研究

为了研究中华稻蝗内生真菌ZWC5菌株及其活性代谢产物,通过菌株形态和其r DNA的ITS序列分析,鉴定其为球毛壳霉(Chaetomium globosum);采用MTT法和流式细胞技术测定其代谢产物的抗癌活性,结果表明其石油醚提取物对肝癌细胞HepG2和SMMC-7721的IC50分别为22.1 mg/L,33.8 mg/L,可诱导HepG2细胞凋亡,而对正常肝细胞LO-2未显示明显的细胞毒性;GC-MS检测分析显示其醚提物主要含12种化学成分.