杜兰落花生球蛋白基因家族的生物信息学分析

为了解球蛋白基因家族在杜兰落花生(Arachis duranensis)种子中的特征,利用生物信息学方法对杜兰落花生球蛋白基因进行全基因组鉴定及表达模式分析。结果表明,杜兰落花生含有9个球蛋白基因,家族成员间理化特性总体差异不大,亲缘关系相近的蛋白具有相似的保守基序组成。根据物种间的球蛋白系统进化树,球蛋白进化关系符合物种之间的亲缘关系。杜兰落花生球蛋白在进化过程中较为保守,受纯化选择主导,但在部分进化枝上存在正选择位点。栽培种花生转录组数据分析表明,15个花生球蛋白基因在花生种子中检测到表达,其中4个表达量远超其它成员,在花生荚果成熟后期表达量仍较高。

补体免疫抑制剂-免疫球蛋白超家族补体受体的原核表达与纯化

目的构建免疫球蛋白超家族补体受体(CRIg)的原核表达质粒pSmartⅠ-SUMO-CRIg,并通过大肠杆菌表达体系对其进行表达和纯化,并检测表达产物活性.方法从人肝脏细胞HHMa中提取总RNA,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和DNA无缝克隆技术,将编码人CRIg胞外段基因序列克隆至pSmart-Ⅰ载体上,选择阳性菌落进行质粒提取和测序,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(Westernblot)对其表达产物进行检测,预测SDS-PAGE检测结果位于40 000处.最后通过补体旁路途径溶血实验检测其活性.重复3次实验取算术平均值绘制溶血曲线.结果扩增出的人CRIg片段长度为819 bp,测序结果比对为人CRIg胞外段序列,提取质粒转化至Rosetta菌株后通过IPTG诱导发现CRIg可以稳定在上清中表达.溶血实验证明25 μm蛋白浓度可以几乎完全抑制溶血.结论 CRIg可以在原核表达体系中实现可溶性表达.

P0蛋白在周围神经损伤修复中的意义及其研究进展

P0蛋白(myelin protein zero)是一种分子量为30ku的糖蛋白,在成熟的髓鞘组织中占组织蛋白总量的50%以上,属于免疫球蛋白基因超家族(immunoglobulin gene superfamily,IgSF)成员,具有黏附和识别、促进神经细胞的生长、信号传导等功能[1-3];主要分布于周围神经髓鞘组织中,是神经膜细胞膜上的一种跨膜蛋白。