基于PINK1/Parkin通路探讨和胃理气方调控线粒体自噬对功能性消化不良胃肠动力障碍的作用机制

目的 观察和胃理气方对功能性消化不良(FD)肝胃不和模型大鼠胃肠动力及PINK1/Parkin信号通路的影响,探讨其对线粒体自噬的调节机制。方法 健康Wistar大鼠40只,随机分为空白对照组、模型对照组、莫沙必利组、和胃理气方组,每组10只。除空白对照组外,其余各组用夹尾激怒法制作FD肝胃不和大鼠模型。造模成功后,对和胃理气方组和莫沙必利组进行药物治疗。观察各组大鼠一般状态、饮水量、进食量、胃黏膜表面有无器质性改变,检测胃排空率及小肠推进率以评价胃肠运动功能。通过HE染色观察胃窦组织有无糜烂、溃疡、化生、萎缩、不典型增生等病理改变。通过免疫荧光染色检测胃组织线粒体自噬的变化,JC-1流式细胞技术检测线粒体膜电位的变化,酶联免疫吸附测定法分析线粒体腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)的含量、活性氧(ROS)的水平,Western blotting检测线粒体自噬蛋白PINK1、LC3、Parkin、P62的表达情况。结果 与空白对照组比较,模型对照组大鼠饮水量、进食量明显降低(均P<0.05),胃排空及小肠推进功能减缓(均P<0.05),胃组织中CYT-C迅速表达、LC3B表达明显积累,线粒体膜电位下调(P<0.05),线粒体膜电位变化比例明显上调(P<0.05),线粒体产生ATP的能力显著下调(P<0.05),线粒体ROS水平显著上调(P<0.05),线粒体自噬蛋白PINK1、Parkin、P62和LC3表达显著增加(均P<0.05)。与模型对照组比较,莫沙必利组与和胃理气方组大鼠饮水量、进食量明显升高(均P<0.05),胃排空及小肠推进功能显著升高(均P<0.05),CYT-C的表达被抑制、LC3B积累明显减少,线粒体膜电位显著上调(P<0.05),线粒体膜电位变化比例明显下调(P<0.05),线粒体产生ATP的能力显著上调(P<0.05),线粒体ROS水平显著下调(P<0.05),和胃理气方组ROS水平下调更显著(P<0.01),线粒体自噬蛋白PINK1、Parkin、P62和LC3的表达显著下调(均P<0.05)。结论 FD存在胃肠动力障碍,和胃理气方通过调控PINK1/Parkin信号通路介导的线粒体自噬,增加胃肠动力,改善FD肝胃不和大鼠症状。

化痰健脾理气方联合埃索美拉唑治疗Barrett食管观察

本文探讨化痰健脾理气方联合埃索美拉唑治疗Barrett食管的疗效及对细胞因子的影响,旨在为Barrett食管用药提供参考。1资料与方法1.1一般资料:选择2019年6月~2021年6月我院94例Barrett食管患者,依据随机数字表法分为观察组47例与对照组47例。观察组病程8个月~9年,平均(5.03±1.38)年;年龄39~73岁,平均(58.92±6.47)岁;女性21例,男性26例。

健脾理气方对HBV转基因小鼠肝脏AFB_1—DNA加成物水平的影响

对HBV转基因小鼠灌服健脾理气方,再予AFB_1,用RIA法测定经治疗和未经治疗的转基因小鼠及正常小鼠7个时相肝脏AFB_1-DNA加成物浓度。发现HBV转基因小鼠较正常小鼠易于对AFB_1终致癌物聚积,高峰相加成物水平显著升高(P<0.01),24h时相仍维持较高水平(P<0.01)。健脾理气方则能显著降低该加成物水平,在24h时相使其降至近正常水平(P>0.05)。结果示,HBV与AFB_1协同致肝癌是由于HBV致肝损伤,对终致癌物清除障碍所致,健脾理气方可能通过加速终致癌物清除而抑制肿瘤发生。

健脾理气方对人胃癌移植瘤小鼠TP、DPD和CYP3A4基因表达的影响

目的研究中药健脾理气方对人胃癌移植瘤小鼠5-氟尿嘧啶(5-FU)相关代谢酶及多种化疗药的共同代谢酶细胞色素P450酶(CYP3A4)基因调控的影响。方法将80只小鼠随机分为模型组、化疗组、中药组及化疗加中药组,每组20只。小鼠左腋窝皮下接种MKN-8肿瘤细胞悬液,复制人胃癌移植瘤小鼠模型。模型组和中药组于接种瘤株2天后分别给予生理盐水或健脾理气方0.25mL灌胃,均每天2次,连续10天。化疗组和化疗加中药组于接种2天后分别给予生理盐水或健脾理气方0.25mL灌胃,每天2次,连续5天;接种7天后给予5-FU20mg/(kg·d)腹腔注射,每天1次,连续5天。采用RT-PCR法检测各组移植瘤组织胸腺嘧啶磷酸化酶(thymidinephos-phorylase,TP)、双氢嘧啶脱氢酶(dihydropyrimidinedehydrogenase,DPD)和CYP3A4的mRNA表达。结果与模型组及化疗组比较,中药组及化疗加中药组小鼠移植瘤组织中TP、CYP3A4mRNA表达水平明显升高,DPDmRNA表达水平明显降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。化疗加中药组与中药组TP、DPD、CYP3A4mRNA表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论健脾理气方能够通过上调小鼠移植瘤组织中TP、CYP3A4的mRNA表达水平,同时抑制DPD的mRNA表达水平,从而促进5-FU在肿瘤组织中的活化以及抑制5-FU的分解失活,提高化疗疗效。

健脾理气方治疗脾虚气滞型功能性消化不良餐后不适综合征45例及对胃肠激素的影响

目的观察健脾理气方治疗脾虚气滞型功能性消化不良餐后不适综合征的临床疗效及对人体成分和血清胃促生长素(Ghrelin)、降钙素基因相关肽(CGRP)的影响。方法将收治的餐后不适综合征患者90例随机分为两组,各45例,后因脱落3例,最终治疗组44例,对照组43例。治疗组给予健脾理气方,对照组给予常规西药口服,疗程均为4周。结果与对照组相比,治疗组的总有效率更高(81.82%比55.81%),中医症状积分改善更明显(P<0.05);治疗组患者血清Ghrelin水平明显提高,血清CGRP水平下降(P<0.05)。两组人体成分去脂组织指数均较本组治疗前上升(P<0.05)。结论健脾理气方治疗脾虚气滞型功能性消化不良餐后不适综合征,疗效显著,安全有效。

健脾理气方对人胃癌移植瘤小鼠5-Fu代谢过程的影响

目的:研究健脾理气方对人胃癌移植瘤小鼠的5-Fu代谢过程的影响。方法:将80只小鼠按照随机分为人胃癌移植瘤模型组、5-Fu化疗组、健脾理气中药组、5-Fu化疗+中药组,每组20只。将MKN-8荷瘤小鼠新鲜癌块磨碎在小鼠腋窝下接种,制造人胃癌移植瘤小鼠模型。通过高效液相色谱法(HPLC法)检测各组小鼠移植瘤组织及血浆中5-Fu的浓度。结果:中药+化疗组小鼠移植瘤组织中的5-Fu浓度高于单纯化疗组(P<0.05);中药+化疗组与单纯化疗组血浆中的5-Fu浓度则无显著差异(P>0.05)。结论:中药健脾理气方能够提高化疗药物5-Fu在荷瘤小鼠肿瘤组织中的浓度,起到增效的作用。

健脾理气方联合rIL-2对荷瘤小鼠化疗免疫抑制的影响

目的研究联合应用中药健脾理气方和重组白细胞介素－２（ｒＩＬ－２）对肿瘤化学治疗免疫抑制的影响。方法用环磷酰胺（ＣＴＸ）给Ｈ２２荷瘤小鼠化疗，造成免疫抑制，应用中药健脾理气方和ＩＬ－２联合治疗后，用３Ｈ－ＴｄＲ释放法检测荷瘤小鼠的ＮＫ、ＬＡＫ细胞活性，３Ｈ－ＴｄＲ掺入法检测脾细胞增殖活性，ＦＡＣＳ法检测ＩＬ－２受体，Ｌ３Ｔ４，ＬＹ２阳性细胞数。结果采用大剂量ＣＴＸ后，荷瘤鼠脾重、脾细胞数、脾细胞增殖及杀伤能力均明显降低。Ｔ细胞亚群中ＴＨ比例下降明显，ＩＬ－２受体表达能力也受损，而加用健脾理气方或ｒＩＬ－２后，上述各项指标均有一定改善，其中中药组ＴＨ比例升高较明显；两者合用，则各项免疫指标的恢复更加显著。结论中药及生物反应调节剂联合应用有可能会更有效地减轻化疗的免疫抑制作用。

健脾理气方对人乙型肝炎病毒转基因小鼠不同时相血清黄曲霉毒素B_1—白蛋白加成物水平的影响

为了探讨HBV与AFD_1协同致肝癌及健脾理气方防治肝癌的机理,预先予HBV转基因小鼠灌服健脾理气方2.5g/kg.wt,qd×15d,再予AFB1 1mg/kg.wt,I.P.,用RIA法测经治疗和未经治疗转基因小鼠及正常小鼠7个时相血清AFB_1—白蛋白加成物浓度。HBV转基因小鼠较正常小鼠易于聚积AFB_1毒性。高峰相加成物水平显著升高,24h相仍维持较高水平。健脾理气方能显著降低该加成物水平,在24h时相使其降至正常水平,该结果提示,HBV与AFB_1协同致肝癌是由于HBV致肝损伤,对毒性致癌物清除障碍所致,健脾理气方能通过加速毒性致癌物清除而抑制肿瘤发生。

健脾理气方干预脾虚气滞型功能性消化不良的疗效观察

目的观察健脾理气方干预脾虚气滞型功能性消化不良的疗效和安全性。方法采用随机、阳性药物平行对照的方法,将60例符合纳入标准的功能性消化不良患者按随机数字表分为治疗组和对照组(各30例);治疗组予健脾理气方,对照组予吗丁啉,两组疗程均为4周。采用PAGI-SYM症状量表、中医证候量表及饮水负荷试验观察患者临床症状和胃感觉功能的变化情况,并观察不良事件。结果治疗组、对照组总有效率分别为86.7%和80.0%;组间临床疗效比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组的胃感知阈值、胃不适阈值均较治疗前升高(P<0.05);组间治疗后比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组各项中医证候积分治疗前后组内差异均有统计学意义(P<0.05),对照组胃脘胀满、嗳气吞酸、喜太息积分治疗前后组内差异有统计学意义(P<0.05);组间治疗后比较,胃脘胀满、胃脘疼痛、嗳气泛酸和饮食减少积分差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗期间均未发生不良事件。结论健脾理气方能显著缓解脾虚气滞型功能性消化不良患者的临床症状和胃感觉功能,且安全性较好。

和胃理气方对肝胃不和型功能性消化不良大鼠VIP与CGRP水平及相关受体影响研究

目的探讨和胃理气方对肝胃不和型功能性消化不良大鼠肠黏膜组织中血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)与降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)的表达水平及相关受体的影响,阐明该方治疗肝胃不和型功能性消化不良的作用机理。方法对40只健康Wistar SPF级大鼠采取SPSS22.0软件平均分成4组,每组10只,分别为空白对照组、模型对照组、和胃理气方中药干预组和多潘立酮阳性药对照组。观察试验后大鼠胃肠动力变化,采用胃排空试验和小肠推进试验来测定胃排空率和小肠推进率;采用western-blot法及RT-PCR检测大鼠肠黏膜组织VIP及相关受体的表达。结果与多潘立酮阳性对照组大鼠及模型组大鼠相比较,中药组、西药组大鼠小肠推进率明显高于模型组,胃内残留率明显低于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05);模型组大鼠肠黏膜组织中VIP及其受体血管活性肠肽1受体(vasoactive intestinal peptide receptor1,VPAC1)蛋白、CGRP及其受体活性修饰蛋白质1(receptor activity modifying protein1,RAMP1)蛋白的表达水平明显高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05);中药组、西药组大鼠肠黏膜组织中VIP及其受体VPAC1蛋白、CGRP及其受体RAMP1蛋白表达水平明显低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);模型组大鼠肠黏膜组织中VIP mRNA、CGRP及其受体RAMP1 mRNA的表达水平与空白组比较,明显高于空白组,差异有统计学意义(P<0.05);中药组、西药组大鼠肠黏膜组织中VIP mRNA、CGRP及其受体RAMP1 mRNA的表达水平与模型组比较,明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论和胃理气方可能通过降低模型大鼠的VIP、CGRP以及相应受体的表达来治疗功能性消化不良。

和胃理气方治疗功能性消化不良作用机制的实验研究

目的:观察功能性消化不良(FD)胃肠运动的变化及胃窦部P物质(SP)、血管活性肠肽(VIP)含量的表达。观察和胃理气方对肝胃不和型FD大鼠胃排空及肠道传输的影响,从脑肠肽浓度方面探讨其作用机制。方法:将大鼠随机分为正常组、模型组、中药组和西药组。用"夹尾激怒法"制作肝胃不和型FD大鼠模型。处理7天后,以葡聚糖兰-2000为胃肠内标记物检查其胃排空功能,用免疫组化法观察胃窦部SP、VIP的变化。结果:与正常组比较,模型组大鼠胃排空率明显下降,胃窦部SP阳性产物含量显著减少,VIP阳性产物含量显著增多。与模型组相比,中西药组胃内色素相对残留率均显著降低,小肠推进度均显著提高,胃窦部SP阳性产物均明显增多、VIP阳性产物均明显减少,其余各组两两间比较无显著性差异。结论:和胃理气方能促进大鼠胃排空及小肠推进,其机制可能与调节胃窦部SP、VIP的水平有关。

健脾理气方对功能性消化不良大鼠十二指肠MLCK和PGE2-cAMP通路的影响

目的观察健脾理气方对功能性消化不良(functional dyspepsia,FD)模型大鼠十二指肠肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase,MLCK)和前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)-环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)通路的影响。方法18只SD雄性大鼠采用数字表法随机分为正常组、模型组及中药治疗组(每组6只),以夹尾应激法建立功能性消化不良动物模型,正常组及模型组大鼠均给予0.9%(质量分数)氯化钠注射液灌胃,中药治疗组给予健脾理气方水煎剂灌胃。取大鼠十二指肠组织进行HE染色,观察组织形态,同时应用定量聚合酶链式反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测MLCK和PGE2受体EP1、EP4 mRNA含量,酶联免疫吸附(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法测定PGE2和cAMP的表达。结果模型组大鼠十二指肠MLCK表达升高,PGE2、EP4、cAMP表达下降,EP1未见明显异常,健脾理气方治疗后可明显抑制MLCK表达,升高PGE2、EP4和cAMP表达。结论健脾理气方可以抑制MLCK mRNA表达,同时上调PGE2-EP4-cAMP信号通路表达,这可能是健脾理气方治疗FD的机制之一。

润肠理气方治疗气阴两虚型结肠慢传输型便秘42例

目的观察润肠理气方治疗气阴两虚型结肠慢传输型便秘的临床疗效。方法将78例病例随机分为治疗组(42例)和对照组(36例),治疗组予润肠理气方口服,对照组予麻仁丸口服;两组均治疗30天,随访15天,观察临床疗效及主要症状体征积分变化情况。结果治疗组总有效率为85.7%,随访总有效率为73.8%,对照组分别为67.7%和38.9%;组间治疗后和随访临床疗效比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗组治疗前后便次、便质、排便费力不适感、排便时间、腹胀、便意感积分差异均有统计学意义(P<0.05),对照组治疗前后便次、便质积分差异有统计学意义(P<0.05);组间治疗后比较,排便费力感、排便时间、腹胀、便意感积分差异有统计学意义(P<0.05)。结论润肠理气方可有效用于治疗气阴两虚型结肠慢传输型便秘。

健脾理气方对功能性消化不良模型大鼠十二指肠TLR9/NF-κB/iNOS通路的影响

目的观察健脾理气方对功能性消化不良模型大鼠十二指肠toll样受体9(TLR9)、核转录因子(NF-κB)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的影响。方法 36只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组及中药治疗组各12只,以夹尾应激法建立功能性消化不良(FD)动物模型,给予正常组及模型组生理盐水灌胃,中药治疗组健脾理气方水煎剂灌胃。取大鼠十二指肠组织进行HE染色观察组织形态,同时应用定量PCR(q PCR)和Western blot检测TLR9、NF-κB mRNA及iNOS蛋白表达情况。结果 HE染色显示3组大鼠十二指肠形态学未见异常,模型组大鼠十二指肠NF-κB及TLR9 mRNA及iNOS蛋白表达明显高于正常组(P<0.05),中药治疗组十二指肠以上指标的水平较模型组明显降低(P<0.01)。结论健脾理气方通过抑制TLR9/NF-κB/iNOS信号通路进而改善十二指肠的微炎症表达,可能是健脾理气方治疗FD的机制之一。

健脾理气方预防肝硬化及癌变的实验研究

目的:观察健脾理气方对肝硬化及癌变的预防作用。方法:以DEN诱发大鼠肝硬化伴癌前期病变为模型,生理盐水为对照。观察项目包括病理形态与生化学指标。结果:用中药后肝纤维化程度减轻;肝细胞增生灶与假小叶减少,肝组织GGT阳性灶和AFP阳性细胞、肝组织Hyp和肝细胞DNA含量均减少;肝组织GGT比活性降低。结论:健脾理气方能同时延缓肝硬化的形成与阻制癌前期的病变,其防癌机制可能在于药物抑制了肝细胞DNA的复制。

健脾理气方配合肝动脉化疗灌注栓塞治疗原发性肝癌的临床疗效及安全性分析

目的 分析健脾理气方配合肝动脉化疗灌注栓塞治疗原发性肝癌的临床疗效及安全性。方法 选取2015年2月~2019年2月在我院接受治疗的原发性肝癌患者86例,采用随机数字表法分为两组,各43例。两组均行肝动脉化疗栓塞治疗,对照组在肝动脉化疗栓塞治疗后给予常规西医治疗,观察组则加用健脾理气方治疗。对比两组临床疗效、治疗前后肝功能水平变化及不良反应。结果 观察组治疗有效率为60.47%,高于对照组37.21%,差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗后ALT水平为(66.42±18.25)U/L、AST水平为(73.66±10.28)U/L、TBIL水平为(30.63±11.29)mmol/L,均低于对照组的(90.17±16.34)U/L、(120.41±20.69)U/L、(36.28±13.71)mmol/L,差异有统计学意义(P<0.05);观察组骨髓抑制、感染、恶心呕吐、肝功能损伤发生率分别为25.58%、6.98%、16.28%、27.91%,均低于对照组的46.51%、23.26%、34.88%及48.84%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 健脾理气方配合肝动脉灌注化疗栓塞介入治疗原发性肝癌可获得较好的临床疗效,有利于改善肝功能指标,缓解化疗产生的不良反应,值得推广应用。

健脾理气方对人肝癌细胞SMMC7721化疗耐药性的影响

目的:观察健脾理气方对人肝癌细胞 SMMC 7721化疗耐药性的影响。方法:采用血清药理学方法研究健脾理气方的效应。MTT 法检测健脾理气方、阿霉素(ADR)结合的抑癌效应,观察健脾理气方对ADR 耐药性的影响。流式细胞仪(FCM)检测健脾理气方对细胞内 ADR 累积的影响。RT-PCR、免疫组化法分析健脾理气方对细胞 MDR_1基因的 mRNA 及 P170糖蛋白(P-gp)表达水平的影响。结果:健脾理气方作用2天对肝癌细胞的抑制率为(4.4±1.9)%,ADR(0.2μg/ml)组的抑制率为(23.3±2.3)%;健脾理气方结合ADR 组的抑制率为(17.0±2.7)%,明显低于 ADR 组(P<0.05),健脾理气方使 ADR 的耐药性增高,敏感性下降。健脾理气方处理使细胞 MDR_1 mRNA 及 P-gp 表达水平上调,胞内 ADR 浓度下降。结论:健脾理气方使 SMMC7721细胞对 ADR 的耐药性增高。

健脾理气方治疗脾虚气滞型功能性消化不良的临床研究

目的:观察健脾理气方治疗脾虚气滞型功能性消化不良的临床疗效。方法:将符合纳入标准的患者96例,按2∶1的比例随机分为治疗组64例和对照组32例。治疗组给予健脾理气方口服,对照组给予安慰剂口服,疗程4周。疗程结束时对两组患者治疗前后的中医证候学指标(症状积分)、总疗效进行评价。结果:总有效率治疗组为88.2%,对照组为46.7%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01);治疗组治疗后各主要症状积分均明显低于对照组(P<0.05),且安全性较好。结论:健脾理气方可以有效治疗脾虚气滞型功能性消化不良。

清热化痰理气方联合左氧氟沙星治疗慢性阻塞性肺疾病患者疗效及对免疫功能的影响

目的:探讨清热化痰理气方联合左氧氟沙星治疗慢性阻塞性肺疾病患者的临床疗效及免疫功能的影响。方法:选取住院治疗的88例COPD患者,随机分为治疗组和对照组,各44例。对照组采用左氧氟沙星治疗,治疗组采用清热化痰理气方联合左氧氟沙星治疗,观察2组患者的临床症状及体征变化,及治疗前后痰量、痰液黏稠度、痰中黏蛋白MUC5AC的含量变化。结果:两组患者治疗后比较,除发热外其余症状均较治疗前有所改善,治疗组的症状改善更为明显。两组患者的祛痰效果均优于治疗前且黏蛋白含量有所降低,治疗组的祛痰效果均优于对照组(P<0.05)。治疗组总有效率为86.4%,高于对照组总有效率68.2%。结论:清热化痰理气方联用左氧氟沙星两种药物对COPD有良好的临床疗效,可有效改善患者气道黏液高分泌状态。