N-取代-琥珀酸二酰亚胺衍生物的合成

本文报道N-取代-琥珀酸二酰亚胺衍生物的合成.化合物的制备是以琥珀酸二酰亚胺为载体与芳香伯胺和仲胺在38%甲醛和95%乙醇中回流,制得了8种新N-Mannich碱.

N-琥珀酰亚胺4-18F-氟苯甲酸酯的全自动化合成及用于突触结合蛋白C2A-GST的标记

目的 建立和优化全自动化合成N-琥珀酰亚胺-4-18F-氟苯甲酸酯（18F-SFB）的方法,并用其进行突触结合蛋白C2A-谷胱甘肽S转移酶（GST）的标记,评价其用于探测肿瘤模型化疗后凋亡的价值.方法 对美国GE TRACERlab FXFDG和TRACERlab FXr-N合成模块进行硬件改造和程序编写,用2个模块全自动化合成18F-SFB并计算产率,高效液相色谱（HPLC）分析合成产物;18F-SFB与C2A-GST突触结合蛋白反应后,用HPLC分析标记产物并计算标记率;将37 MBq 18F-FB-C2A-GST经耳缘静脉注入2只化疗后原位VX-2肺肿瘤新西兰大白兔体内,于注射后0.5,1和2 h行PET/CT显像,显像结束后处死兔,取肿瘤和对侧肺组织行病理检查.结果 18F-SFB合成时间约87 min,其中4-18F-氟苯甲酸（18F-FBA）用时48 min,放化产率达（76.41±4.00）%（n=10）;18F-SFB的校正放化产率为（45.43±5.90）%,放化纯为95%左右;合成的18F-SFB易与C2A-GST反应,标记率可达80%～90%,纯化后18F-FB-C2A-GST的比活度为（1.33～3.33）×109MBq/mol,放化纯可达99%.荷瘤兔PET/CT显像示18F-FB-C2A-GST主要经肾排泄,血液清除快,心肌、正常肺和肝无明显放射性摄取;化疗后的2只荷瘤兔CT所示肿瘤和增厚胸膜部位PET显像呈放射性浓聚,病理检查见大量凋亡小体形成.结论 应用常规生产18F-FDG的GE合成模块为平台可全自动化合成18F-SFB;18F-SFB易与突触结合蛋白C2A-GST反应;18F-FB-C2A-GST兔PET/CT显像示其生物分布理想,能有效探测化疗后肿瘤凋亡.

ROX参比荧光在实时荧光定量RT—PCR检测Nrf2 mRNA中的应用

目的建立大鼠Nrf2mRNA实时荧光定量RT—PCR检测方法，评价ROX参比荧光在其分析中的归一化校正作用。方法采用TaqMan探针法构建大鼠Nrf2mRNA实时荧光定量RT—PCR检测方法；取大鼠混合cDNA的Nrf2PCR产物，经凝胶电泳和测序鉴定反应特异性；取PCR标准品10个浓度梯度（2．0×10^9～2．0×10^0）各1份进行实时荧光定量RT—PCR检测，分析ROX参比荧光校正与否的标准曲线的线性范围的变化；取高、中、低值重组质粒样本各1份进行批内重复20次和批间连续20次实时荧光定量RT-PCR检测，分析ROX参比荧光校正与否的批内、批间重复性差异。结果成功建立大鼠Nrf2mRNA实时荧光定量RT-PCR检测方法；大鼠混合cDNA的Nrf2PCR扩增片段与预期122bp相符，测序结果扩增片段序列正确，PCR特异性好；标准品PCR扩增结果的标准曲线线性范围未经ROX参比荧光校正为2．0×10^9～2．0×10^2拷贝／μl（R2〉0．99），校正后为2．0×10^9～2．0×10^0拷贝／μl（R2〉0．99），校正后线性范围变宽100倍。高、中、低值样本重复性分析结果显示未经ROX参比荧光校正批内ct变异系数（CV）为4．1％、2．7％、2．1％．批间CV为4．3％、3．0％、2．4％，校正后批内CV为0．7％、0．5％、0．4％，批间CV为1．0％、0．8％、0．7％，ROX参比荧光校正后样本ct离散程度均低于未校正组，批内、批间的高值、中值浓度样本（高值组批内和批间t值分别为4．843、2．566，中值组批内和批间t值分别为4．293、4．423，P均〈0．05），但低浓度组的Ct离散度的差异无统计学意义（低值组批内和批间t值分别为0．753、1．279，P均〉0．05）。结论在构建大鼠Nrf2实时荧光定量RT—PCR检测方法中，加入ROX参比荧光，可加宽PCR标准曲线的线性范围，提高检测重复性，为准确分析大鼠模型Nrf2mRNA表达水平奠定了基础。

丙戊酸钠与其他抗癫痫药物之间的相互作用

丙戊酸钠为一种不含氮的广谱抗癫痫药,可用于多种癫痫病发作的治疗,但最适用于全身性发作,如失神发作、全身性强直阵挛发作、失张力发作,亦可适用于部分性发作以及少年型肌阵挛癫痫、婴儿痉挛、Lennox综合征等.此外,本药对高热惊厥的复发有预防作用,多用于其他抗癫痫药治疗无效的各类型癫痫病人[1][2].该药口服吸收快,作用完全,主要分布在细胞外液,在血中大部分与血浆蛋白结合,有效血药浓度为50～100μg/ml.在抗癫痫的药物治疗中,一般遵循单一用药原则,多数病例单独应用一种药物即可取得满意疗效,但顽固的癫痫有时需合并用药,而抗癫痫药物的合用,往往存在着药物间的相互作用,引起血药浓度的波动,影响治疗效果,现将丙戊酸钠与其他常用抗癫痫药物间的相互作用分述如下:

^99Tc^m-SHNH-AC133的制备及对荷结肠癌裸鼠的显像

目的制备99Tcm-6-肼基烟酸琥珀酰亚胺酯盐酸盐（SHNH）-AC133，通过γ显像研究其靶向CD133阳性结肠癌的能力，探讨其作为肿瘤干细胞（CSCs）靶向分子探针的可行性。方法采用免疫荧光法及流式细胞术检测人结肠癌Lovo细胞及肿瘤组织CD133的表达。以SHNH为双功能螯合剂，对CD133的特异性单克隆抗体AC133进行99Tcm标记，合成99Tcm -SHNH-AC133，检测其标记率及放化纯。建立荷结肠癌裸鼠模型，进行γ显像，利用感兴趣区技术获得肿瘤与对侧肌肉组织的肿瘤/正常组织放射性（T/NT）比值。注射标记物前，经荷瘤鼠尾静脉注射过量未标记的AC133进行阻断实验。采用两样本t检验分析数据。结果免疫荧光检测结果显示，CD133表达于Lovo细胞表面。流式细胞检测结果显示，Lovo结肠癌组织中CD133阳性细胞的占比为（29.5±3.4）%。99Tcm -SHNH-AC133标记率〉85%，放化纯为（97.7±2.4）%。γ显像示，99Tcm -SHNH-AC133对Lovo肿瘤有较好的靶向性，12 h后瘤体逐渐显影，24 h肿瘤部位放射性浓聚较明显，其T/NT比值为8.16±0.45。阻断实验中，肿瘤部位放射性摄取明显减少（3.52±0.13；t＝19.8，P〈0.05）。结论99Tcm -SHNH-AC133具有较高的标记率及放化纯，该标记物对CD133阳性结肠癌具有较强的靶向能力，有望用于CSCs的体内示踪。