儿童琥珀酸脱氢酶缺陷型胃肠间质瘤伴肝转移1例

患儿,男,6岁,主因间断呕吐伴黑便、乏力2个月入院。体格检查:中度贫血貌,腹平软,未触及明显肿块,肝脏右肋下2 cm, 脾脏肋下未触及。血常规HGB 42 g/L;凝血功能:纤维蛋白原0.998 g/L。腹部MR示邻近肝左叶胃小弯侧实性包块伴较明显强化,考虑来源于胃壁(图1)。CT示胃壁小弯侧软组织密度肿块,向胃腔内生长,病变密度较均匀,最大面31.1 mm×18.8 mm;肝实质内可见低密度结节影。

琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂对禾谷丝核菌的抑制活性及结合模式

主要由禾谷丝核菌Rhizoctonia cerealis引起的小麦纹枯病是一种土传真菌病害,自20世纪90年代中期以来,黄淮麦区小麦纹枯病逐渐由次要病害上升为主要病害,对常见的杀菌剂类型已经出现了抗性菌株。新商品化的琥珀酸脱氢酶抑制剂类(SDHIs)杀菌剂对禾谷丝核菌的抑制活性尚未见报道。本研究选取3株禾谷丝核菌ZMDBY-9、JZWZ-8和ZMDBY-6,采用菌丝生长速率法测定了10种SDHIs类杀菌剂萎锈灵、氟酰胺、噻呋酰胺、啶酰菌胺、吡唑萘菌胺、氟唑菌酰胺、苯并烯氟菌唑、氟吡菌酰胺、氟吡菌酰羟胺和联苯吡嗪菌胺对禾谷丝核菌的抑制活性;采用同源模建及分子对接,研究了RcSDH bcd构成的蛋白模型与10种SDHIs类杀菌剂的结合模式,进一步分析了结合能与抑菌效果的关联性。菌丝生长速率法测定结果显示:苯并烯氟菌唑和氟唑菌酰胺对禾谷丝核菌的抑制活性较高,平均有效抑制中浓度(EC50)值小于0.1 mg/L;氟吡菌酰胺与氟唑菌酰羟胺的抑制活性较弱,平均EC50值大于1 mg/L;其他6种杀菌剂的平均EC50值为0.1~0.6 mg/L。分子对接结果显示:在10种SDHIs类杀菌剂中,含吡唑-4-酰胺结构的药剂对禾谷丝核菌的抑制活性最好,结合能更低。其中7种杀菌剂分子的抑制活性与结合能之间存在一定的关联性,表现为抑制活性强结合能往往较低。本文研究结果为SDHIs类杀菌剂在小麦纹枯病化学防治中的应用及基于琥珀酸脱氢酶的药剂设计提供了参考。

琥珀酸脱氢酶A对胃癌增殖、迁移和侵袭的影响及意义

目的检测琥珀酸脱氢酶A(SDHA)在胃癌组织及细胞中的表达水平,探讨其对胃癌增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法通过免疫组织化学法检测SDHA在胃癌组织及癌旁组织中的表达情况。结合Western blotting检测SDHA在正常胃上皮细胞与胃癌细胞中的表达。通过Transwell实验、划痕实验、CCK-8实验、克隆形成实验进一步研究异常表达SDHA对胃癌细胞迁移、侵袭和增殖能力的影响。结果免疫组织化学及Western blotting结果提示,SDHA在胃癌组织及胃癌细胞中高表达。敲低及过表达SDHA可影响胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭。此外,SDHA表达与肿瘤免疫浸润显著相关。结论SDHA能够促进胃癌细胞增殖、迁移和侵袭,有望成为胃癌治疗的潜在靶点。

琥珀酸脱氢酶缺陷型肾癌:1例病例报告和文献复习

琥珀酸脱氢酶(SDH)缺陷型肾细胞癌是一种罕见肿瘤,与SDH基因突变密切相关,具有高度遗传性。其中,SDHB突变最常见,其次是SDHA、SDHC和SDHD。2016年被纳入WHO肾细胞癌的一个独特亚型,占所有肾癌的0.05%~0.2%[1]。通常发生于38~40岁青壮年,男性略多于女性。多数患者通过体检或仅有腰部疼痛发现[2]。郑州大学第五附属医院泌尿外科收治1例SDH缺陷型肾细胞癌患者,现报告如下。

新型吡唑乙酰胺类琥珀酸脱氢酶抑制剂的设计、合成及抑菌活性

为开发出新型杀菌剂候选分子,通过柔性改造吡唑甲酰胺杀菌剂结构中的二元酰胺键得到了一系列潜在靶向真菌琥珀酸脱氢酶(SDH)的新型吡唑乙酰胺分子.借助菌丝生长速率法发现了其中具有广谱抑菌特性的二苯醚联吡唑乙酰胺分子(6l),其在药剂质量浓度为50μg/mL时对水稻纹枯病菌、小麦赤霉病菌和草莓灰霉病菌的抑制效果均优于对照药剂噁霉灵.化合物6l对水稻纹枯病菌的半最大效应浓度(EC_(50)值)为19.92μg/mL,抑菌活性明显优于对照药剂噁霉灵和氟吡菌酰胺(EC_(50)分别为76.74和40.36μg/mL).SDH酶活力测试结果表明,真菌体内的SDH是化合物6l抑制水稻纹枯病菌生长的潜在作用靶标.分子对接研究结果显示,化合物6l分子结构中的二苯醚单元能以多种方式与靶标口袋的关键残基结合,对分子发挥抑菌活性起到了关键作用.研究结果表明,二苯醚联吡唑乙酰胺分子对植物病原真菌具有较显著的抑制作用,在其结构基础上进行深度的优化和改造有望得到可有效防控植物病原真菌的新型杀菌剂候选分子.

气相色谱-串联质谱法测定土壤中5种琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂的残留量

提出了加速溶剂萃取(ASE)联合Qu ECh ERS自动样品制备系统净化,以气相色谱-串联质谱法(GC-MS/MS)同时测定土壤中甲呋酰胺、吡噻菌胺、麦锈灵、灭锈胺、呋吡菌胺等5种琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂残留量的方法。取风干并过筛后的土壤样品10.00 g,加入5 g硅藻土,研磨均匀后转移到萃取池中,以体积比1∶2的正己烷-乙酸乙酯混合溶液进行萃取,萃取液在旋转蒸发仪上浓缩至10 m L,全部转移至Qu ECh ERS自动样品制备系统的净化管中,振荡5 min,以转速8 000 r·min^(-1)离心5 min,将2 m L上清液于50℃水浴中氮气吹至近干,用正己烷定容至1 m L。在Rxi-5Sil MS色谱柱上按照柱升温程序分离,质谱分析采用多反应监测(MRM)模式,外标法定量。结果表明,5种琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂的质量浓度在0.005~0.1 mg·L^(-1)内与对应的峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)为0.000 7~0.001 1 mg·kg^(-1);按照标准加入法进行回收试验,回收率为89.6%~110%,测定值的相对标准偏差(n=6)均小于5.0%。方法用于分析5份不同作物的种植土壤样品,5种琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂均未检出。

丙二酸二钠通过抑制琥珀酸脱氢酶活性损伤人精子运动功能

目的 揭示琥珀酸脱氢酶(SDH)在人精子功能调控中的作用。方法 将分离纯化后的人精子样本与不同浓度(10、20、40 mmol/L)SDH抑制剂丙二酸二钠共孵育不同时间(1、2 h)后,试剂盒检测对照组及丙二酸二钠处理组SDH酶活性,Western blot检测SDH催化亚基(SDHA)蛋白水平。精子功能研究实验:1)通过计算机辅助精液分析系统检测丙二酸二钠对未获能精子重要运动参数[前向运动率(PR)、总活力(TM)、平均路径速度(VAP)]以及获能精子穿透粘性介质能力的影响;2)伊红-苯胺黑法评估丙二酸二钠对精子存活率的作用;3)PSA-FITC染色法检测丙二酸二钠处理对获能精子顶体反应发生率的影响。结果 丙二酸二钠不改变人精子中琥珀酸脱氢酶A(SDHA)蛋白表达水平,但其能够抑制SDH酶催化活性、精子前向运动率、总活力以及获能精子穿透粘性介质的能力,且上述抑制效应同丙二酸二钠浓度正相关。此外,丙二酸二钠不影响获能精子自发顶体反应发生率。结论 丙二酸二钠通过抑制SDH活性损伤人精子运动功能。

QuEChERS-高效液相色谱-串联质谱法同时测定动物源性食品中21种琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂的残留量

通过优化QuEChERS盐析提取条件和分散固相萃取(dSPE)净化剂组合条件,基于高效液相色谱-三重四极杆串联质谱仪,建立了适用于动物源性食品(畜禽肉、水产品、内脏、脂肪、奶和禽蛋)中21种琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂残留量的检测方法。针对不同类别的动物源食品基质特点,以回收率和净化效率为判定指标分别对提取溶剂、除水剂和净化剂进行了优化,实现了靶标物质高效提取和基体杂质有效去除,同时选取更佳的色谱柱和流动相提高了目标分析物的灵敏度和分离效率。样品经水分散均匀后,以正己烷饱和的乙腈提取,借助乙二胺-N-丙基硅烷(PSA)和十八烷基键合硅胶(C_(18))吸附剂净化,采用Thermo Accucore aQ(150×2.1mm,2.6μm)色谱柱分离,以含5mmol/L甲酸铵+0.1%甲酸水溶液和甲醇为流动相进行梯度洗脱,多反应监测(MRM)正离子模式测定,基质匹配外标法定量。结果表明,21种农药在1~50μg/L范围内线性关系良好,相关系数(r)均不少于0.999,检出限为0.005~0.28μg/kg,定量限为0.02~0.93μg/kg。向猪肉、猪脂肪、牛奶、鸡蛋4种不同类别的动物源空白样品基质添加标准溶液,21种农药在低、中、高3个浓度水平(5、10、50μg/kg)下的平均回收率为83.0%~107%,相对标准偏差为0.20%~7.40%。该方法操作简便快速、准确高效,目前已广泛应用于进出口动物源食品中多种琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂的筛查检测与确证分析任务中,具有一定的应用价值。

琥珀酸脱氢酶缺陷型胃肠道间质瘤1例并文献复习

琥珀酸脱氢酶(SDH)缺陷型胃肠道间质瘤(GIST)是一组独特的GIST,患者以中青年女性居多,临床表现无特异性。组织病理学特征以上皮细胞型为主,生长方式多呈丛状或多结节方式生长。诊断依赖于病理免疫组织化学SDHB阴性或弱阳性。手术切除仍然是可切除的SDH缺陷型GIST的首选治疗,传统靶向治疗疗效有限。本文介绍1例31岁的女性SDH缺陷型GIST病例,该患者因体检发现腹腔巨大占位,而后顺利进行手术切除,病理提示SDH缺陷型GIST,术后7个月复发,未治疗,规律随访,目前病灶仍稳定。此外,本文还进行了文献复习,以了解SDH缺陷型GIST的临床表现和病理特征,以便及时诊断和管理SDH缺陷型GIST。

琥珀酸脱氢酶缺陷型肾细胞癌CT、MRI表现1例

病例男,28岁,无明显诱因出现右腰腹部剧烈疼痛,伴肉眼血尿,无发热及排尿困难。查体:右肾区膨隆,可触及一包块,长约18 cm,下极至脐水平,边缘至腹中线,右肋脊点和肋腰点有压痛,右肾区叩击痛(+)。CT平扫示右肾上极巨大占位,大小约17.5 cm×13 cm,边界清楚,与正常肾实质相比呈等密度,其内见不规则的大片状低密度(图1),初步诊断为肾脏占位,考虑肾透明细胞癌。MRI影像所见:右肾上极病灶呈囊实性,T1WI表现为稍低信号,T2WI以稍低信号为主。DWI表现为明显受限高信号,ADC值降低,动态增强扫描与正常肾实质相比,病灶动脉期明显强化,实质期及排泄期强化程度略减低。

QuEChERS-液相色谱-串联质谱法测定生咖啡中19种琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂残留

本研究旨在建立QuEChERS前处理技术结合液相色谱串联质谱仪(LC-MS/MS)同时测定生咖啡中19种琥珀酸脱氢酶抑制剂(Succinate dehydrogenase inhibitor)杀菌剂残留量的分析方法。生咖啡粉末样品经乙腈均值提取,采用无水硫酸镁、PSA、C18净化剂净化,经液相色谱–串联质谱仪在正离子模式下扫描分析19种琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂残留,通过空白基质匹配标准溶液外标法定量。19种琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂在1~100 ng/mL范围内呈良好线性关系(r>0.995),在0.01、0.05和0.1 mg/kg的加标水平下,平均回收率为79.6%~109.4%,相对标准偏差(relative standard deviations,RSD,n=6)为1.4%~9.7%,方法检出限为0.51~4.60μg/kg。该方法具有良好的线性关系,准确度和精密度均满足定量分析的要求,适用于生咖啡中19种琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂农药残留的定量分析。

气相色谱-串联质谱法测定牛肉中4种琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂的残留量

提出了气相色谱-串联质谱法(GC-MS/MS)测定牛肉中4种琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂(吡噻菌胺、氟唑菌苯胺、氟唑菌酰羟胺和苯并烯氟菌唑)残留量的方法。取5 g绞碎的牛肉样品,以10 mL体积比1∶1的环己烷-乙酸乙酯混合溶液提取两次,2.0 mL乙腈净化。分取1.0 mL乙腈层,于40℃水浴氮吹至近干,用1.0 mL正己烷溶解残渣,过0.22μm有机滤膜,滤液按照仪器工作条件进行测定。4种琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂在柱升温程序下分离,在多反应监测模式下检测,基质匹配法绘制工作曲线,外标法定量。结果显示:4种琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂工作曲线的线性范围均为0.2~20.0μg·L^(-1),检出限(3S/N)均为0.08μg·kg^(-1);对空白样品进行3个浓度水平的加标回收试验,回收率为89.8%~105%,测定值的相对标准偏差(n=6)为0.74%~4.5%;方法用于12份实际样品分析,均未检出目标物。

LC-MS/MS测定水产品中3种琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂

通过高效液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)建立1种同时测定水产品中吡唑萘菌胺、苯并烯氟菌唑、氟唑菌酰胺3种琥珀酸脱氢酶抑制剂类(SDHIs)杀菌剂的方法。结果表明:以乙腈-水作为流动相、乙腈为提取液、C18+PSA+MgSO_(4)为净化剂时,3种SDHIs杀菌剂在质量浓度2~50μg/L范围内线性关系良好,r>0.999;方法的检出限(LOD)为1μg/kg,定量限(LOQ)为2μg/kg,回收率为74.9%~91.7%,相对标准偏差(RSD)为1.6%~4.5%(n=6)。方法操作简单、灵敏度高、净化效果好,能够满足水产品中SDHIs杀菌剂的检测要求。

QuEChERS-UPLC-MS/MS测定肉类中8种琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂

目的:建立超高效液相色谱串联质谱快速测定肉类(猪肉、鸡肉、鸭肉、牛肉)中8种新型琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂残留的方法。方法:样品经乙腈提取,QuEChERS法预处理,以0.1%的甲酸溶液与乙腈进行梯度洗脱,正离子模式扫描,多重反应监测,UPLC-MS/MS检测。结果:8种SDHIs杀菌剂在1~200 ng·mL^(-1)呈良好的线性关系,相关系数均大于0.99,检出限在0.3~1.5μg·kg^(-1),回收率为80.5%~103.5%,相对标准偏差为1.3%~6.5%。结论:该方法简单、快速、灵敏,适用于肉类食品中8种琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂残留的检测。

超高效液相色谱-串联质谱法测定谷物中4种新型琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂

改进QuEChERS提取净化条件,结合超高效液相色谱串联质谱法建立测定谷物中4种新型琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂残留的方法。样品经乙腈-醋酸(99∶1)提取,QuEChERS法预处理,用Agilent Poroshell 120 EC-C_(18)(2.1 mm×100 mm,2.7μm)色谱柱分离,以0.1%的甲酸溶液与乙腈进行梯度洗脱,正离子模式扫描,多重反应监测,超高效液相色谱串联质谱检测。结果显示,4种琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌在1~200 ng·mL^(-1)呈良好的线性关系,相关系数R均大于0.99,检出限均为1.5μg·kg^(-1)。在4种基质3个水平(5μg·kg^(-1)、10μg·kg^(-1)、50μg·kg^(-1))下进行加标回收试验,回收率为78.0%~108.6%,相对标准偏差为2.4%~8.9%。该方法简单、快速、灵敏,适用于检测谷物中4种新型琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂的残留。

改良QuEChERS方法快速测定果蔬中8种新型琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂

建立了一种同时测定果蔬中啶酰菌胺、吡噻菌胺、吡唑萘菌胺、氟唑菌酰胺、联苯吡菌胺、氟唑环菌胺、氟唑菌 苯胺和氟吡菌酰胺8种新型琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂残留量的液相色谱-串联质谱方法.通过比较乙二胺-N- 丙基硅烷（PSA）和十八烷基键合硅胶吸附剂（ C18 ） 两种分散固相萃取剂不同添加剂量下的吸附作用和净化效果, 优化QuEChERS方法净化过程,以乙腈-0. 1% （ 体积分数）甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,使 8 种目标化合物 在 Poroshell 120 EC-C18色谱柱上分离,经电喷雾正/负双离子扫描、多反应监测模式质谱检测,外标法定量.8 种 目标化合物在0. 5～500. 0 μg/L范围内线性关系良好,相关系数均大于0. 998,方法检出限为0. 2～1. 7 μg/kg,定量限为0.5～5.0 μg/kg.各种目标化合物在8 种基质中3 个添加水平（ 5 .0、 25 .0和 125.0 μg / k g ）下的回收率为 71.4%～121.3%,相对标准偏差（RSD,n=6）为 0.8%～17.2%.该方法操作简单、净化效果好,适用于果蔬中新型琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂的快速检测.

精子线粒体琥珀酸脱氢酶的检测及意义

目的 :采用一种简便、快速的检测精子线粒体琥珀酸脱氢酶 (SDH)的改良方法检测精子SDH ,并评价其与精子活动率及存活率的关系。 方法 :4 6例年龄为 2 5～ 36岁 (平均 31岁 )生育与不育男性精液标本 ,采用计算机辅助精液分析系统检测精子活动率 ,应用改良SDH检测法检测精子SDH ,通过死、活精子荧光分子探针染色检测精子存活率 ,分析精子活动率、存活率及精子SDH阳性率之间的关系。 结果 :4 6例生育与不育男性精子活动率为( 6 7.33± 7.37) % ,存活率为 ( 79.78± 7.6 5 ) % ,精子SDH阳性率为 ( 74 .74± 8.2 9) % ;精子活动率、存活率及精子SDH阳性率 3者之间均存在显著相关性 (P均 <0 .0 1)。 结论 :精子线粒体SDH检测对评价精子线粒体功能具有重要意义 。

按摩增强琥珀酸脱氢酶和钾-钠ATP酶活性促进兔股四头肌的损伤修复

目的研究按摩对骨骼肌损伤修复关键酶琥珀酸脱氢酶(SDH)、钾-钠ATP酶(K+-Na+-ATPase)活性的影响。方法将30只雄性新西兰大白兔分为健康对照组(3只)、自然恢复组(15只)和按摩组(12只)。根据损伤造模后观察时间的不同,自然恢复组分为3个时相点,即自然恢复7 d组(3只)、按摩7 d对照组(自然恢复14 d,6只)和按摩14 d对照组(自然恢复21 d,6只),按摩组分为按摩7、14 d组(各6只)。重物打击法制作兔股四头肌急性损伤模型。HE、超声影像技术检测组织病理变化,酶组化法检测SDH酶、K+-Na+-ATPase活性。结果组织病理检测显示按摩对照组受损肌组织肿胀、萎缩退变,按摩治疗后修复或新生肌纤维明显增多。超声影像研究显示按摩对照组受损肌纤维纹理消失、回波呈弥漫性非均匀增强,按摩组回波呈弥漫均一性增强、边缘清晰。SDH和K+-Na+-ATPase活性研究结果进一步显示:按摩7 d组(0.003 3±0.000 2)vs(0.002 2±0.000 2)和14 d组(0.003 9±0.000 2)vs(0.003 2±0.000 1)较对应的按摩对照组SDH活性明显增加(P<0.01),SDH深染的Ⅰ型肌纤维数量百分比高于对应的按摩对照组[7 d组:(38.6±2.6)%vs(25.1±1.7)%,P<0.01;14 d组:(56.2±4.5)%vs(30.3±2.1)%,P<0.01];ATPase活性分别在按摩7 d组和14 d组比对应的按摩对照组升高约47%和72%(P<0.01)。结论按摩可能通过提高受损肌组织有氧代谢相关酶类活性,促进受损肌组织的修复。

用β-CD构筑琥珀酸脱氢酶的研究

用β-CD,马来酸酐,氯乙酸和三氯化铁反应,合成了双6-氧β-羧甲基-丁二酸-1.4-单酯-4β-CD·Fe^(3+)配合物(简称模拟酶)。以此模拟酶模拟琥珀酸脱氢酶,将琥珀酸氧化脱氢生成延胡索酸,同时,又将甲苯氧化成苯甲醛和苯甲酸。

补心方对慢性心衰大鼠心肌Na^+-K^+ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)ATP酶及琥珀酸脱氢酶的作用研究

目的研究补心方对心梗后早期大鼠Na+-K+ATP酶、Ca2+-Mg2+ATP酶和琥珀酸脱氢酶(Succinate Dehydrogen-ase,SDH)的影响。方法清洁级大鼠60只,采取结扎冠状动脉左前降支中上1/3部,造成AMI模型,手术成功存活动物随机分为心阳高、中、低剂量组及曲美他嗪组、模型组、假手术组共6组,均予灌胃给药或蒸馏水8周。8周后采用分光光度计检测心梗后早期大鼠心肌Na+-K+ATP酶、Ca2+-Mg2+ATP酶以及SDH水平。结果对心肌细胞ATP酶的影响:模型组大鼠ATP酶含量及SDH活性较假手术组降低(P<0.01)。补心方干预后,心阳高剂量、中剂量、低剂量组Na+-K+ATP酶、Ca2+-Mg2+ATP酶和SDH活性较模型组均升高(P<0.01),但低于假手术组及曲美他嗪组,且随剂量增加,Na+-K+ATP酶、Ca2+-Mg2+ATP酶含量和SDH活性逐渐增强。结论补心方可增强与Na+-K+ATP酶、Ca2+-Mg2+ATP酶含量,提高SDH活力,改善线粒体功能,从而保护心肌,改善慢性心衰大鼠症状,延缓慢性心衰的发生发展。