维生素E聚乙二醇琥珀酸酯乳化α-生育酚琥珀酸酯纳米乳的制备及体外抗肿瘤细胞活性评价

目的探索以维生素E聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)做乳化剂,制备α-生育酚琥珀酸酯纳米乳(T-NE),对纳米乳进行处方优化、制备方法以及制剂学性质考察,并且评价其体外抗肿瘤细胞活性。方法自2022年1―4月,先后通过水滴定法绘制伪三元相图,根据纳米乳区域确定最优处方,再采用乳化蒸发法制备,并对其进行了理化性质评价,包括类型确定、形态学考察、粒径大小和分布、Zeta电位、载药量和稳定性,并通过细胞活力实验(MTT)进行体外抗肿瘤细胞活性评价。结果T-NE的最优处方为α-生育酚琥珀酸酯(α-TOS)、维生素E、TPGS、聚乙二醇400质量比1∶1∶2∶1;所制得T-NE为O/W型,外观呈类球形且无粘连;载药量为(20.15±1.91)g/L,粒径为(258.8±3.48)nm,多分散指数(PDI)为0.136±0.03,Zeta电位值为(-27.0±0.46)mV;4℃和25℃条件下放置稳定性良好,且适宜室温长期贮存;与游离的α-TOS药物溶液相比,T-NE对人乳腺癌细胞系(MCF-7)及人卵巢癌细胞系(A2780)细胞具有更强的抑制作用,IC50值分别为16.68μmol/L和7.50μmol/L,且空白纳米乳基本无毒性作用。结论该实验制备的T-NE外观均一呈类球形,粒径较小且分布均匀,载药量高稳定性好,同时表现出比游离α-TOS更为优异的抗肿瘤细胞活性作用,具有良好的开发前景。

岩大戟内酯B-17-琥珀酸酯对人肝癌HepG2细胞凋亡的影响

探讨岩大戟内酯B-17-琥珀酸酯(HJB-SA)对肝癌HepG2细胞凋亡的影响及作用机制。方法 采用流式细胞仪定量检测细胞的总凋亡率、线粒体膜电位去极化程度及细胞内活性氧含量变化;再采用Western blot法检测基于线粒体凋亡的相关蛋白(Bax、Bcl-2、cleaved-Caspase3、Cyt-c)表达水平。结果 HJB-SA能显著升高HepG2细胞的凋亡率(P<0.01或P<0.001);显著降低HepG2细胞线粒体膜电位(P<0.05或P<0.01或P<0.001);增高HepG2细胞内ROS水平(P<0.05或P<0.01);使HepG2细胞内Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01),Bax、cleaved-Caspase3及Cyt-c蛋白表达显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论 HJB-SA可通过线粒体凋亡途径诱导肝癌HepG2细胞凋亡。

包被siRNA的叶酸改性聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯纳米材料的制备及其表征

目的构建可以稳定负载并有效释放siRNA的叶酸改性聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯(FA-TPGS)纳米材料并观测其对小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞毒性和剪切型X-框结合蛋白1(XBP1s)表达水平的影响。方法将FA-TPGS与罗丹明B(RhB)标记的XBP1 siRNA按照5∶1比例混合均匀得到包被XBP1 siRNA的纳米复合物(FT@XBP1)。通过透射电镜、动态光散射、紫外可见光谱和荧光光谱分析对FT@XBP1表征,同时计算XBP1 siRNA从FT@XBP1纳米载体中释放的药量。应用扫描电镜(SEM)、CCK-8以及流式细胞术检测FT@XBP1的细胞毒性,并应用Western blot法检测FT@XBP1对小鼠巨噬细胞RAW264.7中XBP1s的抑制作用。结果FA-TPGS与siRNA具有良好的结合作用,其中FT@XBP1的平均粒径为(200±20)nm。相对释放结果提示,酸性环境(pH 5.0)有利于siRNA从FT@XBP1中释放。CCK-8和凋亡实验均显示,FT@XBP1对RAW264.7细胞的增殖和凋亡影响较小,且FT@XBP1处理可显著抑制RAW264.7中XBP1s蛋白的表达(P<0.001)。结论叶酸修饰的TPGS纳米载体可有效包载XBP1 siRNA,抑制巨噬细胞XBP1s表达且细胞相容性良好。

不同酯化度烷基糖苷磺基琥珀酸酯盐的合成与性能

运用两步法合成了四种不同酯化度的烷基葡萄糖苷磺基琥珀酸酯盐产品(APGSS)。通过探究时间和反应摩尔比对APGSS收率的影响,确定了不同酯化度APGSS的最佳合成工艺条件。同时探究了不同酯化度APGSS的泡沫性能、乳化性能和润湿性能。结果表明:无论在蒸馏水和硬水中,APGSS的起泡性能均随酯化度的增加而减小,泡沫稳定性能均优于烷基糖苷(APG);APGSS对油脂类大豆油的乳化性能均优于对矿物油类液体石蜡的乳化性能;随着酯化度的增加,润湿性能逐渐减弱。

蛋白激酶R样内质网激酶参与维生素E琥珀酸酯激活人胃癌细胞内质网应激和自噬的调控

目的:研究蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)在维生素E琥珀酸酯(VES)激活人胃癌细胞发生内质网应激(ERS)与自噬中的影响。方法:体外培养人胃癌细胞系MKN28和MKN45,通过CCK-8法绘制细胞生长曲线,根据生长曲线确定用药剂量。不同剂量的VES处理细胞24 h后,qRT-PCR检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和beclin-1的mRNA表达,Western blot检测GRP78、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、beclin-1及PERK的蛋白表达。用2μmol/L GSK2606414(GSK)抑制PERK,设置对照组、GSK组、VES组和VES+GSK组,Western blot检测PERK、GRP78、LC3和beclin-1的蛋白表达。结果:CCK-8实验结果显示,VES对两种人胃癌细胞系的活力均有显著抑制作用(P<0.01)。qRT-PCR结果显示,两种细胞中beclin-1和GRP78的mRNA表达均随着VES剂量的增加而不断升高(均P<0.05)。Western blot结果显示,与对照组相比,VES均可以显著上调两种细胞中GRP78、PERK、LC3和be⁃clin-1的表达(均P<0.05);抑制PERK后,两种细胞中p-PERK/PERK的比值显著下降(P<0.01),相较VES组,VES+GSK组GPR78、LC3和beclin-1的蛋白表达均显著降低(均P<0.05)。结论:VES激活人胃癌细胞发生ERS和自噬的同时上调PERK的表达,而PERK参与了VES对ERS和自噬的调节。

离子液体中聚乙二醇维生素E琥珀酸酯的合成

以离子液体为催化剂,由维生素E经两步酯化反应合成了聚乙二醇1000(PEG1000)维生素E琥珀酸酯。以离子液体1-(N',N'-二甲胺乙基)-3-甲基咪唑四氟硼酸盐为催化剂、1,2-二氯乙烷为助溶剂、维生素E与琥珀酸酐摩尔比为1∶1.2,在80℃条件下反应4 h,维生素E琥珀酸酯(TAS)的产率为90%。以1-丙磺酸基-3-甲基咪唑硫酸氢盐/甲苯为反应体系,TAS与PEG1000摩尔比为1∶2,在100℃下反应5 h,PEG1000维生素E琥珀酸酯(TPGS)收率为91%。

琥珀酸酯磺酸盐物化特性及其与甜菜碱复配体系界面性能

为满足低渗油藏注低矿化水开采原油的需要,研究了系列琥珀酸异酯磺酸盐表面活性剂(C_(12)EO_(6)-CnMS,n=10,12,14和16)的泡沫特性以及溶液的表/界面活性,并研究了C_(12)EO6-CnMS与甜菜碱表面活性剂混合物的界面性能,得到了表面活性剂体系的最小烷烃碳数(Nmin)。实验结果表明,C_(12)EO_(6)-CnMS表面活性剂具有低泡性。C_(12)EO_(6)-CnMS表面活性剂的临界胶束浓度(cmc)随着其脂肪醇碳链长度的增加而减小。同时,无机盐的加入使得C_(12)EO_(6)-CnMS表面活性剂的cmc进一步降低,并且其降低程度随着无机盐浓度的增加而增大。脂肪醇碳链长度为10的C_(12)EO_(6)-C_(10)MS表面活性剂与羧基甜菜碱(C_(16)ZC)所形成的复配体系具有降低cmc的协同作用。C_(12)EO_(6)-CnMS与烷烃间的界面张力(IFT)随着表面活性剂的脂肪醇碳链长度的增加而增加。对表面活性剂与系列正构烷烃的界面张力扫描,得到了琥珀酸异酯磺酸盐表面活性剂最小烷烃碳数,并且Nmin随着无机盐的加入而增加。当加入质量分数为0.5%~1%NaCl时,C_(12)EO_(6)-C_(10)MS和C_(12)EO_(6)-C_(12)MS的Nmin为12~14。同样地,C_(12)EO_(6)-C10MS和C16ZC的复配体系具有降低界面张力的协同作用,当两者的摩尔比为4/1,3/2和2/3时,在0.5%~1%NaCl介质中复配体系的IFT值可与十二烷、十四烷和十六烷达到超低或低界面张力值(10^(-3)~10^(-2)mN/m),该复配体系适用于EACN为12~16的原油的开采。

壳聚糖/聚乙二醇琥珀酸酯/丝裂霉素C释药系统预防椎板切除术后硬脊膜外瘢痕粘连的实验研究

目的研究壳聚糖/聚乙二醇琥珀酸酯(chitosan/polyethylene glycols-succinate,CH/PEG-SA)/丝裂霉素C(mitomycin C,MMC)薄膜局部释药系统对硬脊膜外瘢痕粘连的治疗作用。方法按摩尔比3︰1制得PEG-SA后,将其与CH及MMC(质量比为1︰1.5)在一定条件下制成CH/PEG-SA/MMC薄膜。取成年雄性SD大鼠30只,制作L1椎板切除模型。将大鼠按体重编号,随机分为Ⅰ～Ⅵ组,每组5只。Ⅰ组硬脊膜后方植入20mgCH膜片,Ⅱ组植入20mgCH/PEG膜片,Ⅲ组植入20mgCH/PEG-SA膜片,Ⅳ组用0.05mg/mLMMC溶液浸润硬脊膜5min,Ⅴ组植入20mgCH/PEG-SA/MMC膜片,Ⅵ组不作处理。术后4周取材,通过大体观察(Rydell评分)比较硬脊膜外瘢痕的增生情况;行免疫组织化学观察,计算羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)含量;HE染色行组织学观察。结果所有动物术后情况良好,无步态异常、躁动、感染、死亡,各组间Rydell评分比较差异均有统计学意义(P<0.05)。Ⅰ～Ⅵ组硬膜外瘢痕组织中Hyp含量分别为(0.5708±0.3450)、(0.7286±0.1506)、(0.5534±0.1223)、(0.3133±0.1064)、(0.2619±0.1021)及(1.0201±0.1206)μg/mg;Ⅰ～Ⅴ组Hyp含量均低于Ⅵ组,差异有统计学意义(P<0.05);Ⅳ、Ⅴ组与Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。组织学观察见Ⅴ组胶原纤维少且与硬脊膜平行排列,走向清晰、规则,有少量炎性细胞浸润及毛细血管,无巨噬细胞反应。结论CH/PEG-SA/MMC膜片能有效减少硬脊膜外瘢痕中Hyp含量,抑制椎板切除术后硬脊膜外瘢痕粘连,是一种预防瘢痕粘连的良好辅助治疗手段。

琥珀酸酯磺酸盐Gemini表面活性剂的合成及表面活性

以1-十二醇、1-十四醇、1-十六醇、1-十八醇、马来酸酐和乙二醇为主要原料,合成4种琥珀酸酯磺酸盐Gemini表面活性剂;借助红外光谱和核磁共振氢谱对所合成的化合物结构进行了表征。4种表面活性剂均具有较低的临界胶束浓度,较强的乳化性能以及较好的泡沫性能。进一步讨论了4种表面活性剂结构与性能的关系。

α-生育酚琥珀酸酯对肉鸡抗氧化功能与肌肉品质的影响

旨在研究并比较DL-α-生育酚醋酸酯（DL-α-TOA）及不同水平D-α-生育酚琥珀酸酯（D-α-TOS）日粮对肉鸡的生长、抗氧化功能与肉品质的影响。选用1日龄Arbor Acres（AA）肉鸡320只，随机分为4个处理，分别在基础日粮中添加30mg·kg-1 DL-α-TOA（对照组）及D-α-TOS10mg·kg-1（α-TOS1组）、30mg·kg-1（α-TOS2组）和50mg·kg-1（α-TOS3组），试验期42d。结果表明：对照组及各α-TOS组间肉鸡的生长均无显著差异（P〉0．05）；相关性分析结果表明，肉鸡日粮中D-α-TOS的添加水平与血清（R2=0．9831，P〈0．01）和肝脏（R2=0．9336，P〈0．05）中α-生育酚（α-TOH）的含量呈显著正相关，与血清（R2=-0．9487，P〈0．05）和肝脏（R2=-0．9901，P=0．0518）丙二醛（MDA）呈负相关；与对照组和a—TOSl组相比，日粮中添加30～50mg·kg α-TOS能够使血清总超氧化物歧化酶（T—SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）、总抗氧化能力（T—AOC）和肝脏的T—SOD活性及T-AOC均有不同程度地提高（P〈0．05或P〈0．01），同时肝脏活性氧（ROS）水平也显著降低（P〈0．05）；在肉品方面，日粮中添加30～50mg·kg-1 α-TOS显著降低了肉鸡胸腿肌的滴水损失（48h）和剪切力，及腿肌的烹饪损失，但对pH45min、pH24h、24h滴水损失和肉色无显著影响（P〉0．05）。结果提示，日粮中添加30～50mg·kg-1 D-α-TOS能够在一定程度上提高肉鸡机体的抗氧化功能，提高了肌肉的系水力和嫩度，其原因主要是α-TOS的添加导致rTOH在血清和肝脏中含量的提高，及肝脏MDA和ROS水平的降低。

界面活化的溶胶凝胶包埋Candida rugosa脂肪酶催化合成维生素E琥珀酸酯

采用界面活化的溶胶凝胶包埋Candida rugosa脂肪酶(CRL)催化合成了维生素E琥珀酸酯. 考察了影响溶胶凝胶包埋固定化CRL的因素, 获得的最佳固定化条件为: 丙基三甲氧基硅烷/正硅酸四乙酯摩尔比为1/1, 水与硅烷前体摩尔比为15, 酶的添加量为0.5mg/ml, PEG400的添加量为12μl/ml溶胶. 溶胶凝胶包埋的CRL在50℃, 18h后其活性仍然保持了70.58%, 是游离酶的2.6倍,且稳定性得到了明显的改善. 基于CRL的界面特性, 采用五种表面活性剂对其进行界面活化. 结果表明, 采用橄榄油活化的溶胶凝胶包埋的CRL合成维生素E琥珀酸酯的酯化活力最高, 相比原酶和未界面活化的溶胶凝胶包埋酶分别提高了6.7和1.43倍.

交联甘薯淀粉十二烯基琥珀酸酯制备条件研究

采用环氧氯丙烷为交联剂,十二烯基琥珀酸酐为酯化剂,对甘薯淀粉进行双重化学变性,以峰值粘度和取代度作为评价指标,通过正交试验和响应面分析,得出制备高粘度,适宜取代度的交联甘薯淀粉琥珀酸酯最优制备条件:即交联剂用量为0.28％,交联反应pH值为10.2,交联反应时间为3h,酯化剂用量为7％,酯化反应pH值为9.1,反应温度为24℃。

醋酸羟丙基甲基纤维素琥珀酸酯的性能表征

目的合成新型肠溶包衣材料醋酸羟丙基甲基纤维素琥珀酸酯(HPMCAS),并分析其结构特征和性能。方法采用红外光谱、紫外光谱、热重分析和化学分析等方法进行表征,测试HPMCAS在有机溶剂中的溶解情况、黏度、抗张强度和极限伸长率,并与日本的醋酸羟丙基甲基纤维素琥珀酸酯样品AS-LG进行比较。结果HPMCAS中酸性丁二酰基、乙酰基的含量与加入酸酐的量密切相关;二氯甲烷-乙醇等混合溶剂是HPMCAS的良溶剂;HPMCAS低于200℃时对热稳定,高于此温度后快速失重。结论其物化性质与日本样品AS-LG接近。

维生素E琥珀酸酯抑制人胃癌细胞生长的研究

采用体外细胞培养的方法 ,观察维生素 E琥珀酸酯 (VES)对人胃癌细胞 (SGC- 790 1)生长的影响 ,并利用 MTT法比较 VES和α-生育酚对胃癌细胞生长的作用效果。结果表明 :VES(5、10和 2 0μg/ m l)对胃癌细胞生长有明显抑制作用 ,而 α-生育酚在同样剂量对肿瘤细胞生长无抑制作用。这提示 VES具有不同于维生素 E的抗癌机理。

羊毛脂琥珀酸酯磺酸盐加脂剂的制备及性能

将等物质的量的羊毛脂和马来酸酐在 6 0℃加热 2 0min ,加入催化剂对甲苯磺酸 ,在 10 0℃反应 3h ,可得到羊毛脂琥珀酸酯。调节pH值至 6～ 7,加入NaHSO3 饱和水溶液 ,反应 1h ,85℃时反应 2h ,最后升温并在减压下除去水分。向产物中加适量的过氧化氢 ,将未反应的亚硫酸氢钠氧化成硫酸钠 ,得羊毛脂琥珀酸酯磺酸盐。将其与氯化石蜡、硬脂酸聚氧乙烯酯及非离子表面活性剂复配 ,制得AS结合型加脂剂。透射电镜照片显示加脂剂乳液粒子尺寸为 0 5 μm以下 ,且分布均匀 ,产品具有良好的水分散性、耐酸性。

维生素E琥珀酸酯诱导MDA-MB-435乳腺癌细胞的凋亡

目的:检测维生素E琥珀酸酯(vitaminEsuccinate,VES)对MDAMB435乳腺癌细胞增殖抑制和凋亡诱导作用并分析凋亡诱导分子Fas表达的变化。方法:以VES刺激人乳腺癌细胞MDAMB435(雌激素受体阴性)12、24和48h,VES浓度为5、10和20μg/mL,以MTT法测定对细胞增殖的抑制作用,以流式细胞仪分析细胞周期和细胞表面Fas表达,TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡指数变化,Westernblot法检测VES作用后Fas蛋白水平变化。结果:VES对MDAMB435乳腺癌细胞增殖具有显著的抑制作用并表现为时间和剂量依赖关系。流式细胞仪分析细胞凋亡,MDAMB435细胞的自然凋亡率为1.5%,5、10和20μg/mLVES分别作用48h后凋亡率升高至13.1%、20.2%和46.5%。TUNEL法检测VES作用后乳腺癌细胞凋亡指数由1.1±0.4升高至10.8±1.0、30.4±2.7和51.4±4.7,细胞Fas蛋白水平分别升高1.3、1.9和4.3倍,细胞表面Fas平均荧光强度由46.29升高至59.66、84.54和103.41。结论:VES对MDAMB435乳腺癌细胞具有显著的增殖抑制作用,并诱导细胞的凋亡,其机制与细胞表面Fas表达上调有关。

氧化油脂日粮中添加RRR-α-生育酚琥珀酸酯对鸡肉品质的影响

探讨RRR-α-生育酚琥珀酸酯(TOS)对饲喂氧化油脂日粮鸡肉品质的影响,选用600只1 d AA肉鸡,随机分为10个处理,每处理6个重复,采用2×5因子设计,即2种油脂类型(新鲜和氧化油脂)和5种α-生育酚的处理,30 mg/kg all-rac-α-生育酚醋酸酯(TOA1)、30 mg/kgRRR-α-生育酚醋酸酯(TOA2)及15、30、60 mg/kgRRR-α-生育酚琥珀酸酯(TOS1、TOS2和TOS3),试验期42 d。结果表明:(1)氧化油脂日粮增加了机体脂质过氧化反应,胸腿肌肉色变差,滴水损失增加,MDA含量升高,SOD活性下降(P>0.05);(2)不同的油脂日粮处理中,TOS3组均能降低胸肌48 h滴水损失和烹饪损失(P<0.05),腿肌亮度、红色度及滴水损失在TOS2或TOS3组得到改善(P<0.05);TOS2和TOS3组胸腿肌MDA含量降低(P<0.05或P<0.01),胸肌TOS3组SOD活性提高(P<0.05);与TOS1相比,TOS2和TOS3组血清及肝脏中α-生育酚含量提高(P<0.05)。日粮中油脂氧化导致鸡肉品质降低,添加TOS可通过增加机体α-生育酚含量,提高机体抗氧化能力,改善肌肉品质。

维生素E琥珀酸酯的合成及抗癌活性研究

利用维生素E及琥珀酸酐在催化剂的作用下合成了维生素E琥珀酸酯。在此基础上 ,以人胃癌细胞SGC - 790 1为实验模型 ,利用MTT法观测了维生素E琥珀酸酯对其细胞生长的影响 ,并对其进行了细胞凋亡形态学观察。利用WesternBlot法检测了与调亡有关的c -Jun蛋白表达情况。研究发现 ,维生素E琥珀酸酯合成品对SGC - 790 1细胞生长具有明显的抑制作用 ,并可通过促进c -Jun蛋白表达诱导SGC - 790

ERK1/2在维生素E琥珀酸酯诱导人胃癌细胞凋亡中的作用

为探讨ERK1 2丝裂素活化蛋白激酶 (MAPK)信号转导途径在维生素E琥珀酸酯 (VES)所诱导的人胃癌SGC 790 1细胞凋亡过程中的作用 ,采用DAPI染色法观察VES诱导细胞凋亡的情况 ,采用WesternBlot法分析VES不同剂量和不同作用时间对ERK1 2磷酸化状态的影响。结果表明 ,VES明显诱导SGC 790 1细胞凋亡 ,2 0 μg mlVES作用 2 4h和 48h后凋亡率分别为 14 .2 %和 89.6%。 5、10、2 0 μg mlVES作用 2 4h时明显降低p ERK蛋白的表达 ;而 2 0 μg mlVES作用于细胞时 ,ERK1 2可瞬时被激活 ,2h时表达下降 ,而后又升高 ,12h达峰值。提示ERK1 2途径可能参与了VES诱导的SGC 790 1细胞凋亡 。

α-生育酚琥珀酸酯对肉鸡脂质过氧化及脂代谢的影响

[目的]研究不同油脂水平日粮中添加α-生育酚琥珀酸酯(α-tocopherol succinate,TOS)对肉鸡过氧化及脂代谢的影响。[方法]选用1日龄AA肉鸡480只,随机分为8组各6个重复,每个重复10只,采用2×4因子设计,即基础日粮(N)和高脂日粮(H),4个生育酚处理:50 mg·kg-1α-生育酚醋酸酯(α-tocopherol acetate,TOA),50 mg·kg-1(TOS1)、100 mg·kg-1(TOS2)和150 mg·kg-1(TOS3)TOS,试验分前后两期共42 d。[结果]与基础日粮对照组比,高脂日粮组油脂极显著降低料肉比(P<0.01),生育酚的添加极显著改善平均日采食量和日增体质量(P<0.01),同浓度TOS效果优于TOA;油脂极显著增加丙二醛(MDA)浓度(P<0.01),生育酚处理可显著降低MDA浓度、显著提高谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性(P<0.05);油脂能够显著增加后期血清中总甘油三酯(TG)浓度(P<0.05),血清总胆固醇(TC)、TG随着TOS的增加有降低的趋势(P>0.05)。[结论]肉鸡日粮中添加TOS和高油脂能够改善生产性能,添加TOS能够缓解因油脂添加所带来的脂质过度沉积及过氧化问题。