文蛤(Meretrix petechialis)多种游离氨基酸含量的综合评价

为了明确文蛤游离氨基酸的组成、含量及其风味特性,本研究以文蛤的11个全同胞家系为研究对象,利用氨基酸自动分析仪测定文蛤足组织中游离氨基酸的种类和含量,通过主成分分析、TOPSIS分析进行综合评价。结果显示,文蛤家系游离氨基酸总量均在473~816mg/100g,均值为638mg/100g。呈鲜味氨基酸含量为270~570 mg/100g,占总含量的56.0%~70.8%,是最主要的呈味氨基酸。15种游离氨基酸通过主成分分析提取到2个主成分,其累积方差贡献率为89.54%,可代表文蛤中游离氨基酸的综合信息。游离氨基酸T值较高的家系依次是22A8、22A5、22A1和22A6,与TOPSIS分析结果一致。结果表明上述4个文蛤家系可作为游离氨基酸含量综合性状突出的优良种质资源用于文蛤的选育工作。

盐度和饵料密度对文蛤滤水率的影响

为了解文蛤(Meretrix meretrix)在不同条件下的滤食特性,研究了不同盐度(16‰、20‰、24‰、28‰、32‰)和饵料密度(5×10^(4) cell/mL、10×10^(4) cell/mL、15×10^(4) cell/mL、20×10^(4) cell/mL、25×10^(4) cell/mL)对文蛤滤水率的影响。结果显示,在盐度16‰~32‰范围内,文蛤滤水率随盐度的升高呈先升后降的变化趋势。在盐度28‰时,滤水率为(0.5011±0.0694)L/(g·h),达到最大值,显著高于盐度16‰、20‰和32‰时的滤水率(P<0.05);与盐度24‰时滤水率间差异不显著(P>0.05)。盐度(x)与文蛤滤水率(y)影响的关系可拟合为:y=-0.0487x^(2)+0.2989x-0.0058(R^(2)=0.6291)。在饵料密度为10×10^(4) cell/mL时,滤水率达到最大值,为(0.7986±0.0592)L/(g·h)。饵料密度10×10^(4) cell/mL~15×10^(4) cell/mL组显著高于其他组(P<0.05)。盐度和饵料密度对文蛤滤水率有显著影响。

琴文蛤形态性状对体量的影响效果分析

从广西琴文蛤(Meretrix lyrata)养殖群体中随机选取87颗成贝,测量其活体重(y)、壳长(χ1)、壳高(χ2)、壳宽(χ3)及外韧带长(χ4),计算相关系数。采用通径分析方法计算了以体长性状为自变量对体重做依变量的通径系数、决定系数及相关指数,对各性状的影响大小进行剖分,明确影响琴文蛤体重的主要外部形态性状。结果表明,所测各形态性状间的相关性均达到极显著水平(P<0.01);其中外韧带长(P=0.359 3)和壳宽(P=0.348 0)对体重的直接影响较大,是影响体重的主要因素。决定系数分析结果与通径分析结果有一致的变化趋势;所选各形态性状与体重的复相关指数为R2=0.943;表明所选性状是影响体重的主要性状。利用多元回归分析法建立了壳长、壳宽及外韧带长为自变量的估计体重的回归方程:y=32.2882+0.2604χ1+0.2991χ2+0.6737χ3+0.5175χ4,为琴文蛤选种提供了理论和理想的测度标准。

文蛤(Meretrix meretrix)地理种群ISSR分子标记的初步研究

利用ISSR(InterSimpleSequenceRepeate)技术对文蛤(Meretrixmeretrix)江苏和辽宁两个地理种群进行了PCR扩增.从100条ISSR引物中筛选出引物13条,每条引物检测出位点数1到8.平均每条引物可检测到位点数4 6个.实验结果表明:江苏文蛤的位点多态性(80 7%)高于辽宁文蛤的位点多态性(68 4%);种群内平均遗传距离分别为0 3105±0 090和0 2658±0 044,江苏文蛤也高于辽宁文蛤.从筛选得到的引物可以发现,文蛤简单重复序列中A、G碱基含量较高.通过对不同实验条件的对比,对ISSR PCR反应体系进行了优化.

不同盐度对文蛤(Meretrix meretrix)呼吸代谢及体内酶活性的影响

为研究不同盐度对文蛤呼吸代谢的影响,本实验设置5个盐度(‰)梯度(11、18、25、32、39),检测不同盐度对文蛤(Meretrixmeretrix)耗氧和排氨的影响,以及文蛤的外套膜、鳃、肝胰腺三种组织中乳酸脱氢酶和Na+/K+-ATP酶活性的变化。结果表明:随着盐度的不断升高,文蛤耗氧率先升后降再升,在盐度18时达到最大值;排氨率先升后降,在盐度32时达到最大值。随着盐度不断升高和胁迫时间延长,文蛤的肝胰腺中乳酸脱氢酶活力总体呈先升高后下降再升高的趋势(P<0.05),酶活力在盐度39时为最高;随着盐度不断升高和胁迫时间延长,文蛤的外套膜中Na+/K+-ATP酶活力总体呈先下降再升高后下降的趋势(P<0.05),在盐度32时为最高;文蛤的外套膜和鳃中乳酸脱氢酶活力以及鳃和肝胰腺中Na+/K+-ATP酶活力受盐度影响不显著(P>0.05),酶活力变化也多呈现"W"形的变化趋势。研究结果为文蛤的人工养殖提供参考。

海水酸化和甲基汞胁迫条件下文蛤免疫应答和生物矿化响应

海洋酸化背景下重金属对海洋生物的毒性效应是一个重要的生态毒理学研究问题。海洋酸化不仅直接影响海洋贝类的生理过程,也通过改变重金属的存在形式和生物可利用性进而影响其生物毒性。为研究海洋酸化背景下甲基汞(MeHg)对海洋贝类免疫和生物矿化的毒理效应,本研究将采集于野外的文蛤(Meretrix petechialis)置于不同pH水平(二氧化碳分压;pH 8.10/背景水平、7.70/中度酸化和7.30/高度酸化)和甲基汞质量浓度(对照、溶剂对照、0.1,1和5μg/L)的海水中共同暴露21 d,研究文蛤内脏团和鳃组织内免疫应答和生物矿化相关的生物标志物对海水酸化和MeHg共同胁迫的响应。结果表明,海水酸化和MeHg均显著影响其免疫应答策略,不同胁迫水平对各类生物标志物具有组织差异性。具体而言,MeHg暴露诱导内脏团中碱性磷酸酶(AKP)和溶菌酶(LZM)活性,表明MeHg对免疫解毒机制有刺激作用,在一定程度上提高了其免疫应答。海水酸化抑制了鳃和内脏团中AKP活性,抑制其免疫应答。在生物矿化相关酶中,在海水酸化和MeHg共同胁迫下钙-ATP酶(Ca^(2+)-ATP)活性显著下降,干扰其离子平衡和生物矿化。海水酸化加剧了MeHg胁迫对文蛤免疫应答和生物矿化的毒理作用。相关系数分析和主成分分析表明这些生物标志物可以协同防御环境胁迫对免疫应答和生物矿化策略的毒理作用。这些生物酶对海水酸化和MeHg胁迫响应比较敏感,可以作为评价海洋酸化背景下MeHg对文蛤两种生物组织免疫功能毒性效应的潜在生物标志物。研究结果为理解海洋酸化和重金属胁迫对贝类生理功能的影响提供新见解,为评估海洋酸化背景下贝类种群变动和资源管理提供科学依据。

不同附着基对文蛤稚贝生长成活情况的影响

采用生产试验的方法,研究了不同附着基对文蛤(Meretrix meretrix)稚贝生长成活情况的影响。结果表明,投放的网片上,没有稚贝附着;开始时采用不同附着基对文蛤幼体生长速度影响不大,抽样镜检无死壳;稚贝附着10 d后,无附着基的幼体体表粘脏严重且活力差;附着基是细沙的要比以海泥和无附着基组生长速度略快;附着后10 d再投放细沙附着基的,与一直投放细沙附着基的生长速度与成活率差异不明显。根据结果,细沙适合用做文蛤稚贝的附着基。

饥饿对3种不同规格文蛤耗氧率和排氨率的影响

利用实验生态学的方法研究了饥饿对3种不同规格文蛤（Meretrixmeretrix Linnaeus）耗氧率和排氨率的影响。实验饥饿的时间分别为1，3，5，7，10，13，20，27，35d。实验结果表明，饥饿对3种不同规格的文蛤耗氧率和排氨率都有极其显著的影响（P〈0．01）。3种不同规格的文蛤在饥饿1～7d时，耗氧率随着时间的延长而增大；饥饿7d以后，耗氧率随着时间的延长而下降。3种不同规格的文蛤在饥饿1～10d时，排氨率随着时间的延长而增大；在饥饿10d以后，耗氧率随着时间的延长而下降。在实验周期内，大、中、小3种不同规格的文蛤的0／N值分别为15．05～36．12（平均23．69），15．6～37．56（平均24．73），17．44～47．25（平均27．17）．

氨氮对文蛤存活及能量收支的影响

在实验室条件下,研究了氨氮(NH3-N)对文蛤(Meretrix meretrix)的急性毒性作用以及对其能量收支的影响。实验结果表明:在水温(24.5±0.5)℃,盐度21.5,pH8.00的条件下,文蛤(壳长3.85～4.35cm)死亡率随着氨氮质量浓度、胁迫时间的增加而增加(P<0.05)。96 h文蛤死亡率与添加氨氮(NH3-Nt)质量浓度对数的回归方程为Y=2.3787x+0.3246(R2=0.978 9),文蛤对总氨氮(NH3-Nt)或分子氨(NH3-Nm)的安全浓度(SC96h)为9.237 mg/L或0.418 mg/L;随着环境中添加氨氮(NH3-Nt)质量浓度的不断上升(0,0.5,1,2,4,9,18,36 mg/L),文蛤摄食能不断下降,呼吸能和排泄能则呈现出先升高后降低的趋势;当总氨氮(NH3-Nt)在0～2 mg/L(或NH3-Nm≤0.090 mg/L)时,文蛤的生长余力没有显著变化(P﹥0.05);当总氨氮(NH3-Nt)≥4 mg/L(或NH3-Nm≥0.181mg/L)时,文蛤的生长余力显著降低(P<0.05)。因此,文蛤养殖环境中的NH3-Nt或NH3-Nm应控制在2mg/L或0.090 mg/L以下水平。

4个文蛤群体鲜味物质比较分析

以江苏文蛤(Meretrix meretrix)为研究对象,采集红壳色文蛤原种、黄壳色文蛤原种、红壳色文蛤选育F1、红壳色文蛤选育F2 4个群体,检测其主要非挥发性鲜味物质成分单磷酸腺苷(AMP)、单磷酸鸟苷(GMP)、次黄嘌呤核苷酸(IMP)、琥珀酸、游离氨基酸、无机离子(Na^+、K^+、Cl~–、PO_4^(3–))的含量,并通过味道强度值(TAV)评价其呈味作用。鉴于核苷酸与氨基酸在呈味方面的协同效应,采用味精当量(EUC)评价不同文蛤群体的鲜味品质。结果表明,文蛤软体组织中AMP、琥珀酸、谷氨酸、精氨酸、丙氨酸、Na+、K^+、Cl~–的TAV值大于1,是文蛤鲜味的主要贡献者;红壳色文蛤原种的鲜味强度最大(4.92 g/100g),其子代红壳色文蛤F1(4.08 g/100g)、红壳色文蛤F2(4.09 g/100g)稍有降低,但仍显著高于黄壳色文蛤原种(3.34 g/100g)(P<0.05),表明江苏红壳色文蛤在鲜味品质方面具有相对稳定的较高品质。

文蛤外套膜组织与细胞培养

以文蛤（Meretrix meretrix Linnaeus）外套膜为材料，采用改良的M199培养基，在不同温度和盐平衡条件下进行组织与细胞培养。培养结果显示，24h左右外套膜组织边缘有细胞爬出，48h后开始形成单层新生细胞，并发展为生长晕，7～10d细胞基本长满培养瓶底。细胞培养可持续30-35d。作者还描述了培养过程中出现的3种不同形态特征的细胞，并对37℃培养条件下细胞的生长及分裂特征作了描述与讨论。

文蛤三个野生种群的生化遗传变异

采用聚丙烯酰胺梯度凝胶垂直平板电泳检测和比较了广东电白、南三和广西北海三个文蛤(Meretrix meretrix)野生群体9种同工酶24个基因座位的生化遗传变异。结果表明,三个群体的平均杂合度观察值分别为0.291,0.251和0.290,多态位点比例(P0.95)分别为37.5%,37.5%和41.6%,位点平均有效等位基因数分别为1.476,1.419和1.479,各群体在多个位点上都存在杂合子缺失现象。比较了三个群体之间的遗传相似度(I)和遗传距离(D),其中电白与南三群体间的遗传分歧极微,它们与北海群体间的遗传分歧稍明显,三群体基因分化系数为0.035,预示三地间有着较强的基因流。

镉和苯并芘胁迫对文蛤血细胞功能的影响

应用流式细胞仪技术,通过检测血细胞的吞噬活力、活性氧产物和死亡率,研究了Cd2+和苯并芘(Bap)胁迫7d对文蛤血细胞功能的影响。结果表明,10μg/L和100μg/LCd2+胁迫会显著降低血细胞的吞噬活力,增加血细胞的死亡率,100μg/LCd2+会显著增加血细胞活性氧产物。5μg/L和50μg/LBap胁迫会显著降低文蛤血细胞的吞噬活力,增加血细胞的死亡率,50μg/LBap会显著增加血细胞活性氧产物。可见,Cd2+和苯并芘胁迫会显著降低文蛤血细胞的功能,导致文蛤免疫力下降,增大文蛤被病害感染的机率。

皱肋文蛤胚胎、幼虫及稚贝的发育

在水温28.5-30℃、盐度23.6-25.4条件下，观察了皱肋文蛤（Meretrix lyrata）胚胎、幼虫和稚贝的发育过程。结果表明，皱肋文蛤的胚胎经历桑椹期、囊胚期、原肠胚期等阶段，形成担轮幼虫。根据行为方式和形态特征，其幼虫阶段可分为D形幼虫、壳顶初期幼虫、壳顶中期幼虫、壳顶后期幼虫、变态期幼虫、附着期幼虫。稚贝发育可分为无管期稚贝、单管期稚贝和双管期稚贝。皱肋文蛤幼虫在不同阶段的生活习性逐渐改变，从担轮幼虫至壳顶后期幼虫营浮游生活，变态期和附着期幼虫分别营匍匐生活和附着生活。壳顶初期幼虫出现足原基，壳顶中期和壳顶后期幼虫分别形成平衡囊和鳃丝。稚贝阶段开始从附着生活向埋栖生活过渡。稚贝出现明显的次生壳，无管期稚贝和单管期稚贝的次生壳为红褐色，而双管期稚贝的次生壳为白色。皱肋文蛤从 D 形幼虫发育到附着期幼虫，后者的壳长和壳高分别增至前者的1.77倍和2.10倍；稚贝阶段从无管期发育到双管期，后者的壳长和壳高分别增至前者的3.13倍和3.28倍，显示皱肋文蛤幼虫阶段缓慢生长，稚贝阶段快速生长的特征。

南黄海沿岸滩涂文蛤中痕量硒的周年变化探讨

采用4：1混合酸湿法消解，氢化物发生原子荧光光谱法（HG-AFS）测定了南黄海沿岸滩涂文蛤生物体中微量元素硒的周年变化，并用质控样和加标回收保证结果的可靠性。结果显示：硒的周年含量为0．2～0．5mg／kg，平均值为0．330mg／kg，文蛤体内硒的含量呈一定规律性变化，春、秋季高，夏、冬季低。说明文蛤中硒含量因不同季节而具有明显差异，其含量变化与海水温度、饵料生物及文蛤生长繁殖等因素有关。

不同潮位、密度及季节对皱肋文蛤中间培育效果的影响

于2010年8月至2011年5月期间，在湛江港北月村滩涂的自然生态条件下，研究了不同潮位、不同密度及不同季节对皱肋文蛤（Meretrix lyrata）种苗中培效果的影响。结果表明：（1）北月村滩涂中潮区（养殖区）底质的主要成分是砂砾（粒径0．200mm以上），占64．7％～87．5％；其次是细沙（0．200～0．050mm），占11．0％～32．2％：粉沙（0．050mm以下）仅占1．5％～7．9％。总体呈现由高潮位向低潮位砂砾含量逐渐减少，细沙含量逐渐增加的趋势。该底质适合皱肋文蛤的生长与存活。（21不同潮位对种苗的生长及存活均具有显著的影响（P〈0．05），潮位越低，生长速度越快；中潮中区及下区的存活率高于中潮上区，皱肋丈蛤适宜在中潮中区及下区的潮位进行中培。（3）中培密度对种苗生长速度和存活率存在显著的影响（P〈0．05），密度越低，生长速度越快，存活率越高；中培初始密度以7000～12000粒／m2为宜。（4）皱肋文蛤种苗生长速度与季节密切相关，在水温较高的夏秋季（31．3-24．5℃）生长较快，在水温较低（15.1-18．1℃）的冬季生长停滞，在水温回升的春季（22．5～26．8℃），生长速度回升。在秋冬春三个季节，种苗壳长、壳高及体质量的生长曲线呈“S”型。（5）不同投苗季节，贝苗的存活率存在显著性差异；在夏、秋、冬三季，总体呈现由高温季节向低温季节递减的趋势。但在夏末和秋初，其水温没有较大变化的情况，其贝苗存活率差异不明显。在实际生产中，最佳的投苗季节是水温较高的夏季和秋季。研究结果对新兴的皱肋文蛤养殖产业具有重要的指导意义。

江苏海域文蛤周年性腺发育的初步研究

江苏文蛤（Meretrix meretrix）属于较为独立的地理种群。为提高江苏文蛤苗种生产能力，于2003年12月到2004年11月在江苏沿海海域的东凌、新港、吕四、大丰等采样点，定期取样，计算文蛤各采样时期的丰满度，并及时测量水温，对性腺进行直接和显微切片观察，以研究其性腺发育特点。观察表明，其发育可分为5个期：形成期、生长期、成熟期、排放期及耗尽期。形成期在3-4月，水温10．5～16．5℃；生长期在4～5月．水温18-20.5℃；成熟期在5-6月，水温24-25℃；放散期在6-8月，水温24-32℃；耗尽期在9月以后，直到11月份，水温从24℃左右下降到10℃左右。水温在10℃以下时，文蛤的生长发育处于停滞状态，从11月持续到第二年的3月初。江苏文蛤性腺发育的时间比辽宁文蛤早1个月左右，比广西文蛤迟1个月左右。

文蛤一种球形病毒的分离纯化及细胞病理变化观察

为研究一种球形病毒引起的文蛤（Meretrix meretrix）细胞病理变化及该病毒的分类地位,作者运用透射电镜对异常死亡文蛤的细胞病理变化及感染的病毒粒子进行了超微结构观察,并通过差速离心、酒石酸钾超速离心和氯化铯密度梯度离心结合等方法对首次对该病毒粒子进行了分离纯化。结果表明：患病个体的鳃、消化盲囊、消化道和外套膜均大量存在一种病毒颗粒,该病毒呈球形,无囊膜,直径45-55 nm,核心与核衣壳间无明显界限,未发现病毒包涵体,该病毒存在于细胞间质及被破坏的细胞质中。该病毒粒子的感染引起的细胞病理变化主要表现为：细胞核染色质集聚,溶酶体增多,线粒体肿涨,粗面内质网膨胀,肌原纤维排列混乱,细胞结构变得无规则直至解体。病毒粗提液于4℃150000 g氯化铯密度梯度离心20 h可该病毒粒子提纯,经纯化后负染显示,该病毒粒子呈球形,二十面体对称,无囊膜,直径在60-75 nm,表面结构粗糙,壳粒结构较明显,该病毒粒子在氯化铯中的浮密度为1.554-1.582 g/mL。本文结果为文蛤死亡病原的研究提供了基础资料。

文蛤早期发育阶段生长性状遗传参数的估计

采用部分因子设计构建了23个全同胞家系,应用单性状及两性状动物模型对文蛤（Meretrix meretrix）早期不同生长发育时期的生长性状进行遗传力和相关性估计。结果表明,文蛤附着变态期以及稚贝期生长性状的遗传力并无显著差别,在0.11～0.41范围内变化,属于中等遗传力。非遗传的共同环境效应随着年龄的增长而呈现上升趋势,由附着变态期的0.02逐渐增加到稚贝期的0.38,且稚贝期的共同环境效应显著大于其附着变态期（P〈0.01）。壳长与壳高表型相关和遗传相关的分析结果显示,从附着变态期到稚贝期,壳长与壳高之间的表型相关及遗传相关都存在极显著的正相关性,相关系数的范围分别为0.84～0.95、0.93～0.99。早期发育连续时间段生长性状之间的遗传相关均为正相关,但并不显著,且不同时期的遗传相关也不尽相同（0.34～0.71）。

文蛤吸虫寄生病的组织病理学观察

报道了吸虫在文蛤 (MeretrixmeretrixLinnaeus)体内的寄生情况以及所引起的组织病理学变化。观察表明 ,该吸虫是以胚细胞方式繁殖 ,幼虫经历胞蚴阶段 ,发育成尾蚴。其寄生情况与寄生于其他双壳贝类的一些吸虫相似 ,均是以生殖腺为主要侵占部位 ,少部分则进入附近的消化盲囊、鳃、外套膜、足等 ,消化道中未发现其存在。已被感染的消化盲囊、外套膜等器官组织出现上皮细胞脱落或崩解 ,肌纤维排列紊乱或溶解 ,黏液细胞增生等病理症状。观察发现 ,寄生虫不仅破坏已感染的组织 ,未感染部位的组织也呈现一定的病理学变化 ,最终导致宿主因器官衰竭、功能丧失而死亡。