琼枝麒麟菜多糖的分离纯化、结构表征及降血糖活性

为研究琼枝麒麟菜(Eucheuma gelatinae)多糖的结构及其粗多糖和纯化组分的降血糖活性,以超声波辅助酶法提取的琼枝麒麟菜粗多糖为原料,采用DEAE-52离子柱纯化、PMP衍生,用HPLC法测定各组分单糖组成。结果表明:琼枝麒麟菜粗多糖(EGP)和纯化组分(EGP-1、EGP-2、EGP-3)均为吡喃型硫酸多糖,主要由甘露糖(Man)、葡萄糖(Glc)、半乳糖(Gal)、木糖(Xly)和阿拉伯糖(Ara)5种单糖组成;与EGP相比,纯化多糖的蛋白质含量显著降低(P<0.05),EGP-2和EGP-3的糖醛酸和硫酸根含量显著提高(P<0.05);EGP和EGP-1有三螺旋结构,EGP-2和EGP-3无三螺旋结构;多糖的体外降血糖活性显示,4种多糖均能有效抑制α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的活性,且呈剂量依赖性,其中EGP-3的降血糖效果最优。研究表明,与EGP相比,3种纯化组分的相对分子质量均有所降低,且表现出更强的降血糖活性。

超声波辅助盐酸水解提取琼枝麒麟菜卡拉胶工艺优化

本文以琼枝麒麟菜(Betaphycus gelatinum)为原料,以粘度、硫酸基含量、平均聚合度加权分析结果为指标,优化超声辅助温和盐酸水解提取琼枝麒麟菜卡拉胶工艺,并测定最佳工艺下提取的琼枝麒麟菜卡拉胶红外光谱、分子量分布等理化特性和抗氧化活性.结果表明,超声辅助温和盐酸水解的最佳条件为:液料比40 mL·g^(-1)、盐酸最终体积分数为0.8%、超声温度75℃、超声时间10 min、超声功率612 W.在该条件下制备的样品,粘度为(1866.84±10.34)mPa·s,平均聚合度为(3.52±0.10),硫酸基含量为(0.42±0.01)mg·g^(-1),红外光谱表明其糖苷键断裂及硫酸基团脱落,凝胶渗透色谱表明其包含3个组分(分子量分别为18.0、3.4、0.7 kDa),其2-联苯基-1-苦基腈基(2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl,DPPH)清除率和2,2′-联氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(2,2′-azino-bis(3ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS)清除率的IC50分别为6.98、5.20 g·L^(-1).超声辅助温和盐酸水解可以有效水解琼枝麒麟菜卡拉胶,为后续低分子量琼枝麒麟菜卡拉胶纯化、改性、活性评价及应用提供基础理论.

琼枝麒麟菜和异枝麒麟菜硫酸多糖及其水解产物的抑菌作用

目的 :探讨琼枝麒麟菜 (Eucheumagelatinae)和异枝麒麟菜 (Eucheumastriatum)硫酸多糖的KCl分级产物 ,以及其经HCl水解的不同程度的水解产物对大肠埃希氏菌等 8种细菌的抑菌作用 ,研究抗菌活性与样品化学组成的关系 .方法 :用肉汤稀释法测定不同样品对不同菌株的最低抑菌浓度 (MIC) ;用明胶 -BaCl2 法测定硫酸基含量 ;用红外光谱初步分析琼枝和异枝麒麟菜硫酸多糖及其水解产物化学组成的差异 .结果 :未水解的琼枝和异枝麒麟菜硫酸多糖均无抑菌活性 ;琼枝和异枝麒麟菜硫酸多糖的抑菌谱范围随着水解程度增加而增大 ;异枝麒麟菜硫酸多糖部分水解的水解产物的抑菌谱范围比琼枝麒麟菜硫酸多糖部分水解的水解产物广 .结论

红藻琼枝麒麟菜中凝集素的提取、纯化及其性质研究

目的 从琼枝麒麟菜中分离纯化凝集素 ,并测定其生物活性。方法 采用缓冲液低温提取、4 0 %～ 90 %(NH4) 2 SO4分级盐析沉淀、SephadexG - 75凝胶过滤层析进行纯化 ;SDS -PAGE检测其纯度和测定分子量 ;考察该凝集素凝血活性的血型专一性 ,糖抑制性及高温、酸、碱处理下的稳定性。结果 琼枝麒麟菜中有凝集素 ,分子量为2 90 0 0。该凝集素对人A、B、O和AB 4种类型血细胞均显凝血活性 ,该活性对高温、酸、碱处理有较好的稳定性。结论 琼枝麒麟菜中存在凝集素 。

温度对琼枝麒麟菜生长及色素含量的影响

为进一步提高海南琼枝麒麟菜(Betaphycus gelatinum)产量,本研究主要探讨了温度对琼枝麒麟菜生长及色素含量的影响。结果表明,温度对琼枝麒麟菜生长的影响比较明显,27℃时琼枝麒麟菜生长最快,随着温度的升高或者降低,琼枝麒麟菜生长率均降低,长期低于18℃或者高于36℃会造成琼枝麒麟菜的死亡。在27℃时琼枝麒麟菜含水量最低,干物质积累最快,即光合作用率最大。不同温度下琼枝麒麟菜色素含量与生长率变化趋势基本一致,其藻胆蛋白含量远远大于叶绿素含量。

海洋环境因子对琼枝麒麟菜形态特征的影响

为探讨环境因子对麒麟菜形态特征的影响,结合海洋环境因子对海南岛琼枝麒麟菜的形态特征进行了聚类分析。结果表明,随着水的深度的增加,温度、盐度、透明度、溶解氧逐渐增大,pH逐渐降低,流速逐渐减小,N、P、COD逐渐减小。琼枝麒麟菜在潮间带水越深的区域养殖越好,随着水深的增加,琼枝麒麟菜的颜色逐渐变红,分枝和齿数逐渐变多,卷曲程度逐渐变小。在水文物理环境、水环境化学方面,均是低潮区下部比低潮区上部好,对比形态特征得到的也是低潮区下部琼枝麒麟菜的颜色最深,分枝和齿数最多,而且卷曲度最小。

琼枝麒麟菜多糖对γ射线照射小鼠脾细胞周期及细胞增殖的影响

目的探讨γ射线对小鼠脾细胞周期及增殖的影响,从细胞水平探讨琼枝麒麟菜多糖(EGP)的抗辐射作用。方法将50只小鼠随机分为正常对照组、模型组和3个不同剂量EGP实验组,灌胃10d后行一次性γ射线辐射,每只2Gy,20h后流式细胞仪检测脾细胞周期百分率及脾细胞对刀豆蛋白及脂多糖的增殖反应。结果小鼠经2Gyγ射线照射后,与正常对照组比较,G0/G1期脾细胞百分数明显增加(P<0.01),而S期和(M+G2)期脾细胞百分数明显减少(P<0.01);与模型组比较,EGP实验组能使受照小鼠脾细胞S、G2+M期的比例升高(P<0.01);脾细胞对刀豆蛋白及脂多糖的增殖反应均较模型组明显增强(P<0.05)。结论EGP对辐射损伤小鼠脾细胞具有一定的保护作用。

海水相对密度对琼枝麒麟菜的生长及其卡拉胶、色素含量的影响

探讨了海水相对密度对琼枝麒麟菜(Betaphycus gelatinum)生长及其色素含量的影响规律。结果表明,海水相对密度为1.016～1.030时,琼枝麒麟菜均可生存,海水相对密度为1.018～1.024时,琼枝麒麟菜生长良好,海水相对密度为1.022时,日生长率高达4.6%,海水相对密度为1.024时,琼枝麒麟菜卡拉胶含量最高,达到64.2%;海水相对密度分别为1.026,1.024,1.022,1.02时,叶绿素a、藻胆蛋白藻蓝素(PC)、藻红素(PE)、别藻蓝素(APC)含量分别达到最大值。

光照强度对琼枝麒麟菜生长及色素含量的影响

为了进一步提高琼枝麒麟菜的养殖产量,研究探讨了不同光照强度对琼枝麒麟菜生长及其色素含量的影响。琼枝麒麟菜对光照强度适应范围比较广,在光照强度500～11000lx均可生长。当光照强度在2000～3000lx时,琼枝麒麟菜的日生长率为1.5%,叶绿素浓度95.5μg/g,为最大。随着光照强度的增加,藻蓝蛋白(PC),别藻蓝蛋白(APC)和藻红蛋白(PE)的浓度分别下降;琼枝麒麟菜表面颜色也会逐渐发生改变,由棕红色变成黄绿色。光照强度对琼枝麒麟菜生长率和色素含量有很大的影响。

琼枝麒麟菜水泥框网片养殖技术与效益分析

总结了海南昌江海尾地区用水泥框网片养殖麒麟菜的技术,并分析了其养殖经济效益。总成本投入为5620元/亩(15亩=1 hm^2,下同),总净利润18140元/亩,盈亏平衡点产量86 kg/亩;生产经营安全率为88.1%;生产费用产出率为17.8%;成本利润率为291.5%。综合以上指标,采用水泥框网片养殖麒麟菜技术具有投入少、产量高、利润大、风险小等特点,其养殖模式值得大力推广。

琼枝麒麟菜多糖抗呼吸道病毒活性研究

为了评价琼枝麒麟菜多糖(EGP)包括粗提物(CEGP)及大于500 k Da多糖组分(LEGP)抗呼吸道相关病毒活性。采用Reed-muench法计算流感病毒H1N1、H3N2和H5N3,柯萨奇病毒CVB3及呼吸道合胞病毒RSV-long株滴度;采用观察细胞病变效应(CPE)法,确定CEGP和LEGP对犬肾细胞(MDCK),人宫颈癌细胞(He La)和人喉癌上皮细胞(HEp-2)的最大无毒浓度;通过细胞病变观察法(CPE)及四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)测定CEGP和LEGP抑制各病毒产生细胞病变的作用。结果表明:CEGP和LEGP对5种常见的呼吸道病毒H1N1、H3N2和H5N3,CVB3和RSV都有抑制作用,CVB3和RSV对CEGP和LEGP更敏感;CEGP和LEGP有抗多种呼吸道病毒作用,为抗呼吸道病毒新药的研发提供理论依据。

琼枝麒麟菜的营养成分分析与评价

为评价琼枝麒麟菜(Eucheuma gelatinae)的营养价值,提高其综合应用价值,测定了琼枝麒麟菜的基本营养成分、氨基酸、脂肪酸以及矿物元素,对其营养价值进行评价。结果表明:琼枝麒麟菜的水分、灰分、粗纤维、粗脂肪、粗蛋白以及总碳水化合物的质量分数分别为12.03%、10.63%、5.03%、0.25%、3.73%和73.36%;含有17种氨基酸,其中包括8种必需氨基酸,第一限制性氨基酸为色氨酸;含有10种脂肪酸,包括具有重要生理功能的花生四烯酸、二十二碳五烯酸以及二十二碳六烯酸;富含Na、Mg、Ca、Fe、Zn、Cu。研究表明琼枝麒麟菜具有较高的营养保健价值和应用开发前景。

超声波辅助酶法提取琼枝麒麟菜多糖及其理化性质研究

【目的】优化超声波辅助酶法提取琼枝麒麟菜多糖工艺,并对其理化性质进行初步研究,为琼枝麒麟菜多糖的开发利用提供科学依据。【方法】以琼枝麒麟菜多糖得率为评价指标,基于单因素试验的结果,利用响应面法对超声波辅助酶法提取工艺进行优化,通过测定样品总糖、蛋白、糖醛酸、硫酸根含量以及紫外光谱和红外光谱分析琼枝麒麟菜多糖的理化性质。【结果】各因素对琼枝麒麟菜多糖得率的影响排序为:酶解温度>超声波时间>超声波功率,超声波时间与超声波功率、超声波时间与酶解温度的交互作用对琼枝麒麟菜多糖得率影响极显著(P<0.01),超声波功率与酶解温度的交互作用影响不显著(P>0.05)。超声波辅助酶法提取琼枝麒麟菜多糖的最佳工艺条件:超声波时间33 min、超声波功率234 W、酶解温度67℃、酶解时间1.5 h、料液比1∶100(g/mL)、酶(m木瓜蛋白酶∶m纤维素酶=2∶1)添加量6.0%,在此条件下,琼枝麒麟菜多糖得率为28.41%。样品总糖含量为66.63%、蛋白含量为2.20%、糖醛酸含量为10.12%、硫酸根含量为22.21%。紫外光谱分析结果显示,在260和280 nm处未发现明显吸收峰;红外光谱分析结果显示,琼枝麒麟菜多糖具有多糖的特征吸收峰,在1062.78和1247.94 cm-1有吸收峰,是一种吡喃型硫酸多糖。【结论】通过响应面法优化的超声波辅助酶法提取琼枝麒麟菜多糖工艺操作简单可行,建立的回归模型具有可靠性,理化性质研究结果可为其高值化利用提供理论依据。

琼枝麒麟菜养殖方式及其效益分析

分析了水泥框网片夹苗养殖(简称夹苗养殖)和鱼排浮筏式挂养养殖(简称挂养养殖)两种模式养殖琼枝麒麟菜(Eucheuma gelatinae)的经济效益和生态效益。通过对比几种大型海藻对海水氮(N)、磷(P)无机盐和重金属吸收去除能力。结果表明,琼枝对无机磷的吸收能力优于其他藻类,对钙(Ca)、铁(Fe)元素的吸附效果显著优于海带和紫菜;以这两种养殖模式每养殖1 hm2琼枝,采用水泥框网片夹苗养殖模式可以去除海水中1.6 t N和7.7 t P,采用挂养养殖琼枝可去除海水1.9 t N和9.2 t P;而夹苗养殖技术具有易于推广的特点,年产量约1 500 kg;挂养养殖模式易受到养殖区域的限制,适用于苗种生产,年产量约1 800 kg。综合来看,两种养殖模式均有水质优化效果显著、经济效益高等特点;琼枝麒麟菜可以作为理想型的热带海域净化水质的经济型大型海藻进行推广。

碱法预处理琼枝麒麟菜提取卡拉胶的工艺优化

研究碱法预处理琼枝麒麟菜提取卡拉胶的工艺,通过响应面法优化工艺条件。在单因素实验的基础上,以KOH碱液质量分数、碱预处理温度和碱预处理时间为影响因素,以卡拉胶的产率和凝胶强度为响应值建立二次回归方程,通过响应面分析得到碱预处理琼枝麒麟菜提取卡拉胶的最佳工艺。实验结果显示最佳碱法预处理工艺为KOH碱液质量分数10%、碱预处理温度56℃和碱预处理时间6 h,在此条件下,卡拉胶产率75.23%±2.16%、凝胶强度(1378.5±16.27)g/cm^2。优化后的工艺有效改善了琼枝麒麟菜提取卡拉胶的生产条件。

琼枝麒麟菜的生物学特性与养殖试验

为了更广泛地养殖琼枝麒麟菜,研究了琼枝麒麟菜的生物学特性及摸索其新型的养殖模式。结果发现,水泥棒可以代替珊瑚枝作为琼枝麒麟菜的生长基;通过施缓释肥,琼枝麒麟菜生长良好,藻体颜色鲜艳、枝条粗大,施肥区产量是不施肥区的2.34倍。

琼枝麒麟菜多糖超声提取工艺及皮肤修复活性研究

目的优化琼枝麒麟菜多糖(EGP)的超声提取方法,并探讨EGP在皮肤损伤修复方面的作用。方法采用单因素考察和正交试验方法优化超声方法提取琼枝麒麟菜多糖(EGP),苯酚-浓硫酸法测定EGP中多糖含量。通过MTT细胞毒性实验、细胞增殖实验和划痕实验,研究EGP对人永生化表皮细胞(HaCaT)形态、增殖分化和细胞迁移速度的影响,评价其在皮肤损伤修复方面的作用。结果确定EGP的最优超声提取条件为:温度60℃,料液比1∶100,时间30min,EGP得率为40.3%±1.8%,其中多糖含量为48.2%±4.6%。EGP对HaCaT细胞几乎无毒,且在一定浓度范围内对HaCaT细胞的增殖有显著的促进作用;EGP还能加快HaCaT细胞的迁移速度,对皮肤损伤的愈合有显著的影响意义。结论超声法提取EGP时间短,工艺稳定,所得EGP毒性小,对皮肤及黏膜损伤的修复具有促进作用,可广泛应用于化妆品及医疗器械。

琼枝和异枝麒麟菜中硫酸酯基多糖不同提取方法的化学分析比较

采用"直接水提法"以及"KCl分级法"来提取琼枝和异枝麒麟菜中的多糖.分别用蒽酮-硫酸法、间苯二酚法、明胶-BaCl2分光光度法测定多糖样品的总糖质量分数、3,6-内醚半乳糖质量分数、总硫酸基质量分数;用凝胶色谱法测定各多糖样品的相对分子质量分布情况;用GC-MS测定麒麟菜硫酸酯基多糖的单糖种类及含量.结果显示采用"直接水提法"以及"KCl分级法"比传统的"碱处理法"产率高,而且硫酸基质量分数也明显增高.两种麒麟菜多糖均为硫酸酯基多糖,大部分都属于κ-卡拉胶类.各多糖样品的相对分子质量分布在105左右.麒麟菜多糖主要是由半乳糖和3,6-内醚半乳糖组成,此外还含有少量的葡萄糖、木糖、塔罗糖和艾杜糖等,不同方法提取的多糖样品其单糖种类基本一致.

琼枝麒麟菜对富营养化海水氮磷的去除及对水体中Chl a含量的影响

研究了琼枝麒麟菜对富营养化海水氮磷的吸收及其对Chl a的影响。结果表明,养殖琼枝麒麟菜能有效去除富营养化海水中的可溶性无机氮(DIN)和PO4-P。对DIN的清除,72 h就达到很好的效果,直至几乎耗尽;琼枝麒麟菜优先利用NH4-N,而后是NO3-N和NO2-N。琼枝麒麟菜对水体中PO4-P的清除效果24 h就十分明显,养殖密度在6 kg/m3以上时PO4-P浓度不会出现回升。养殖琼枝麒麟菜能控制海水中Chl a含量,144 h水体中的Chl a含量达到最低值,养殖密度在4 kg/m3以上时Chl a水平不会出现回升。因此,琼枝麒麟菜是热带海域最理想的净化水质、控制赤潮的经济大型海藻之一。

琼枝麒麟菜多糖抗单纯疱疹病毒2型活性研究

目的探讨琼枝麒麟菜多糖(EGP)抗单纯疱疹病毒2型(HSV-2)的活性及其作用机制。方法联合采用观察细胞病变效应(CPE)法和MTT法评价EGP对Vero细胞的毒性。空斑减数实验检测EGP对HSV-2的综合抗病毒活性、直接灭活作用、吸附及进入细胞过程的抑制作用、和感染后的治疗作用。Real-time PCR(RT-PCR)检测EGP对HSV-2基因表达及其DNA复制的影响。结果 EGP浓度低于125μg/mL对Vero细胞无毒性。EGP具有较强的综合抗病毒活性,在实验所用最低浓度(1.95μg/mL)下,EGP可达到80%的HSV-2病毒抑制率。EGP对HSV-2具有很强的直接灭活和抑制吸附作用,治疗作用相对较弱。同时,EGP可以下调HSV-2早期基因UL52和晚期基因UL27的表达,但是对病毒的DNA复制过程无影响。结论麒麟菜多糖具有显著的抗HSV-2感染活性,主要通过干扰病毒对细胞的粘附、侵入而发挥作用。