赤羽病琼脂免疫扩散试验诊断方法的研究

应用引自美国和日本的赤羽病毒和标准阳性血清 ,制备了琼脂免疫扩散试验 (AGID)抗原和高免阳性血清 ,建立了赤羽病AGID诊断方法。应用此方法对上海、杭州、广州等地的 1383头牛进行了检疫 ,AGID抗体阳性牛 746头 ,阳性率为5 4.0 % ,与流行情况相符。同时对从澳大利亚、美国、新西兰和加拿大等国进口的牛、羊、猪血清 16 2头份进行了检疫 ,全部为AGID抗体阴性。

禽流感病毒重组核蛋白抗原的纯化及在琼脂免疫扩散试验中的应用

采用RT-PCR扩增我国H5N1禽流感病毒NP基因,亚克隆于含有组氨酸标签的原核表达载体中,在大肠杆菌中高效表达。所表达的蛋白经Ni+亲和色谱法纯化,SDS-PAGE电泳分析其纯度达95%以上,Western-Blotting鉴定具有良好的免疫反应活性。利用纯化蛋白作为诊断用抗原,建立了禽流感的琼脂扩散诊断方法。所建立的诊断方法在对禽流感强阳性和弱阳性血清的检测中,均出现了致密而清晰的沉淀线,且沉淀线的亮度与所加入的重组抗原的量成正比;而对鸡新城疫、鸡传染性法式囊等8种禽疫病阳性血清和SPF鸡血清的检测中,无沉淀线出现且没有交叉反应;利用该方法对30份进出口送检样品进行检测,其结果与国内同类试剂盒相符性达100%。实验室和现地使用证明,利用纯化的重组NP抗原所建立的方法简便、可靠、易于标准化,可为我国禽流感的兽医诊断、流行病学普查和出入境检验检疫提供有力的保障。

应用琼脂免疫扩散试验检测番鸭细小病毒抗体

将分离的番鸭细小病毒通过正常发育的番鸭胚传代 ,分别取不同代次的病毒尿囊液经氯仿、聚乙二醇浓缩处理后制成不同代次的抗原。该抗原与抗番鸭细小病毒抗血清在含有 2 0 g/LPEG 60 0 0的琼脂平板上作用 ,可见有明显的沉淀线。

应用琼脂免疫扩散试验检测猪伪狂犬病抗体的研究

建立了AGID用于猪伪狂犬病 (Pseudorabies ,Pr)的诊断。对 98份被检血清的AGID结果与SN结果比较 ,当SN滴度大于 1:8时两者的阳性检出符合率为 10 0 %,SN滴度小于或等于 1:8时 ,两者的阳性检出符合率为 87.5 %,AGID和SN总的阳性符合率为 94.4%。结果表明 ,AGID对Pr可进行特异性诊断 。

琼脂凝胶免疫扩散试验(AGID)在检测珍稀雉类新城疫病毒上的应用

珍稀雉类新城疫是由新城疫病毒引起的一种高度接触性急性传染病,笔者通过琼脂凝胶免疫扩散试验方法(AGID)来检测珍稀雉类新城疫病,从而建立一种简易、快速、准确的诊断方法,为快速检测本病提供可靠依据。

东亚钳蝎蝎毒的琼脂单项辐射免疫扩散试验

本文报告了东亚钳蝎蝎毒的琼脂单项辐射免疫扩散试验。结果可知，应用东亚钳蝎蝎毒免疫家兔所制备的免疫血清与蝎毒进行琼脂单项辐射免疫扩散试验是完全可行的。所产生的三个沉淀环由内向外依次变淡，并随抗原稀释倍数的增加而依次有规律地变小，可重复性强，本方法不仅可用于蝎毒的定性鉴定，也可用于蝎毒的定量检定。

应用琼脂免疫扩散试验检测猪伪狂犬病

应用琼脂免疫扩散试验对 5个猪场共 175份样进行猪伪狂犬病血清学检测。共检出阳性血清 90份 ,阳性率5 1 4 % ,血清阳性猪场有 4个 ,占所测猪场 80 .0 %。

琼脂凝胶免疫扩散试验(AGP)在检测珍稀雉类禽流感病毒上的研究应用

禽流感是由禽流感病毒引起禽鸟类的一种急性高度接触性传染病,发病率和死亡率均高达90%以上,为了建立一种简易快速准确的诊断方法。笔者采用琼脂凝胶免疫扩散试验方法(AGP)检测珍稀雉类患疑似禽流感病18例,阳性检出率100%,用HA、HI验证试验符合率为100%。从而建立一种简易、快速、准确的诊断方法。为快速检测本病提供可靠依据。

应用琼脂凝胶免疫扩散试验检测雏鸡卵黄和血清中的禽流感母源抗体

作者对来自3个养鸡场的父母代种鸡进行过禽流感H5型灭活苗紧急免疫接种的3批次共251只1日龄雏鸡应用琼脂凝胶免疫扩散试验(AGID)进行了血清与卵黄中禽流感母源抗体符合率的比较试验。试验结果表明:应用AGID检测1日龄雏鸡卵黄中禽流感母源抗体快速、简易、准确、敏感、检出率高,适用于口岸检疫、国内引种检疫及疫情监测等方面。

小鹅瘟琼脂免疫扩散试验

小鹅瘟是鹅的一种急性病毒性传染病,主要侵害出壳后4至20日龄的雏鹅;成年鹅多呈隐性感染。本病于1956年由我国方定一教授发现并首次报导,定名为'小鹅瘟'。

马传贫血病琼脂凝胶免疫扩散试验的方法

马传染性贫血病是由马传染性贫血病毒引起的马、驴、骡传染病,其特征主要为间歇性发热、消瘦,进行性衰弱、贫血和浮肿,马传染性贫血病给养马业造成巨大经济损失,此病病程复杂,根据临床症状可作初步诊断,但确诊还要进行实验室诊断.实验室诊断方法有补反试验、荧光抗体技术、中和试验、ELISA试验、琼脂凝胶免疫扩散试验等,下面详细谈谈琼脂凝胶免疫扩散试验.

马传染性贫血琼脂凝胶免疫扩散试验的影响因素

在马传染性贫血防治(简称马传贫)工作中,仍以琼脂凝胶免疫扩散试验为主要检测手段。该方法简便特异、快速。但是,该试验容易受到多种因素的影响,使试验特异性、敏感性、精确性不理想,结果判断的不准确。本文就抗原、抗体性质、琼脂板以及反应条件等各种影响因素及试验中的注意事项对马传染性贫血病琼脂凝胶免疫扩散试验的影响进行了逐一分析。

马传染性贫血病琼脂凝胶免疫扩散试验常见问题浅解

兽医实验室中，常利用琼脂凝胶免疫扩散试验对马传染性贫血病进行诊断和检疫。

琼脂糖免疫扩散法在微量血痕鉴定中的应用

我们实验用琼脂糖免疫扩散法鉴定微量血痕种属,效果良好,并已应用于实际检案。现将实验方法及结果介绍如下。一、实验原理抗原在混有抗体的琼脂糖凝胶中溶解扩散,与周围的抗体结合。

鸡传染性喉气管炎兔源高免血清的制备及其双向琼脂扩散试验

用不同方法纯化 IL T病毒抗原免疫实验家兔 ,收集免疫血清做双向琼脂扩散试验 ,并进行特异性、敏感性和田间试验。结果用化学法纯化的 IL T病毒抗原免疫家兔可获得高效价 IL T免疫血清 ,以此血清做双向琼脂扩散试验 ,检查 15羽人工感染 IL T发病鸡喉咽部分泌物和 10羽健康鸡分泌物 ,结果发病鸡阳性检出率 10 0 % ,健康鸡阳性检出率为 0 ,临床症状出现 1周内阳性率10 0 % ,自然发病鸡群阳性率 80 .6 %。表明用化学法纯化的 IL T病毒抗原免疫家兔可获得高效价血清 ,以此建立的双向琼脂扩散试验是一种特异性强、灵敏度高的 IL

应用琼指免疫扩散试验检测猪伪狂犬病病毒血清抗体的试验研究

用BHK—21细胞增殖的伪狂犬病病毒液,经硫酸铵沉淀、透析,用聚乙二醇(PEG,分子量为2000)浓缩,制备抗原。应用琼脂免疫扩散试验(ACID)检测临床送检血清并将这些结果与同一份血清的微量中和试验结果作比较,在102份血清样品检验中,两种试验方法检出阳性数基本相符。试验结果表明,琼脂免疫扩散试验是一种简便、准确、快速的方法。

双向琼脂扩散试验中两种创新材料的介绍

在医学实验教学工作中，实验教师也要充分发挥自身的创造性价值。有时候将生活中的一些常见材料或平时实验中的一些废弃材料灵活运用于实验教学中，就能取得满意的效果。下面介绍笔者在免疫学的双向琼脂扩散试验的实验教学中，采用2种创新材料取得了满意效果并进行讨论，现介绍如下。

琼脂扩散试验操作方法及注意事项

琼脂扩散试验（简称“琼扩”）是临床中病原诊断和抗体效价测定的主要方法之一。该方法简洁、快速，在临床中应用广泛，特别适用于大量血清样品的检测和流行病学群体的定性诊断。缺点是需要时间过长，灵敏度不高。琼脂扩散试验是根据沉淀试验的原理，利用可溶性抗原和抗体在半固体凝胶中进行的相向扩散反应，当抗原、抗体的分子相遇并达到适当的比例时，就会相互结合，凝集，形成抗原-抗体的结合物，在抗原、抗体比例较适合并有电解质的存在及一定温度的条件下，形成白色可见的沉淀线，此种沉淀反应，称为琼脂免疫扩散试验，本法可用已知抗原测定未知抗体，也可以用已知抗体测定未知抗原。在传染病的实验室诊断中，常用于鸡马立克氏病抗体检测。也曾有用此法检查鸡法氏囊病、小鹅瘟、猪瘟病和炭疽等疾病的报道。现以检测鸡马立克氏病的抗体为例，将其操作方法介绍如下。

马传贫琼脂扩散试验打孔小窍门

在马传贫琼脂凝胶免疫扩散试验中．常规的打孔方法是：先向平Ⅲ中浇注凝胶液，然后用打孔器打孔，之后用针头挑拨出孔内物。 此法的缺点是：