琼脂柱预筛选法在头孢菌素菌种选育中的应用

[目的]获得高产稳定的头孢菌素优良菌株。[方法]先经UV诱变处理深冷孢子液,再培养单菌落,经富集培养划菌落带,采用琼脂柱预筛选法,通过摇瓶初筛、复筛及斜面传代单菌落菌型考察,研究琼脂柱预筛选法在头孢菌素菌种选育中的应用价值及稳定性。[结果]与单菌落分离直接摇瓶筛选法相比,采用琼脂柱预筛选法筛选单菌落省时、省力,效果好。经琼脂柱预筛选法获得的菌株性能稳定,摇瓶效价平均值高,F1、F2、F3、F4代的摇瓶效价分别高出对照16.7%、33.3%、16.0%、12.0%,其中F2代斜面可确认为生产用斜面。[结论]应用琼脂柱预筛选法进行菌种选育,可提高筛选效率和数量,增加高产菌株的获得几率,缩短筛选时间。

Fe(OH)_3胶体电泳实验再探索

在琼脂中加入适量的KNO3,经处理制成一定长度的琼脂柱,在其中插入铜线便制成Fe(OH)3胶体电泳实验的电极;探索了电压、电极间距、胶体浓度及环境温度等对实验效果的影响,提出了最佳的实验条件,获得了较快的电泳速度和清晰的电泳界面.

顶头孢霉的去代谢产物反馈调节选育模型的建立与应用

目的建立头孢菌素C产生菌———顶头孢霉的去代谢产物反馈调节的高效筛选模型,筛选解除代谢产物反馈调节的突变菌株,提高头孢菌素C的发酵单位。方法使用NTG、UV、60Co连续诱变,结合使用终产物头孢菌素C梯度平板耐受及琼脂柱预筛选的方法进行筛选。结果应用此模型筛选出的高产菌株NUC—118,经摇瓶发酵及30L发酵罐发酵,与出发菌株MNSA851相比,头孢菌素C的发酵单位提高了25%。结论解除代谢产物头孢菌素C反馈调节的筛选模型是一种高效的筛选高产头孢菌素C突变菌株的筛选模型。