培养基琼脂浓度及抗生素对3种海洋微藻生长的影响

目的：确定用于分离、纯化及保种所用的固体培养基中优化的琼脂浓度和利于微藻生长并抑菌的抗生素浓度。方法：设计固体培养基中的琼脂浓度以及培养液中抗生素的种类和浓度，定时测定培养体系中三种微藻的生物量及细菌菌落随培养时间的变化。结果：利于固体培养基上三种微藻生长的琼脂浓度均为0．6％-0．8％；牟氏角毛藻用2001U／ml的庆大霉素和2001U／ml的青霉素联合作用，球等鞭金藻8701和盐藻分别用3001U／ml和400IU／ml的青霉素时可保证微藻较好生长。结论：不同微藻生长所需的抗生素浓度不同，抗生素对微藻生长的影响不完全取决于抑菌作用，青霉素促进球等鞭金藻8701生长主要是产生促生长因子，庆大霉素抑制生长可能是产生抑制因子。

不同琼脂浓度对常见细菌动力试验的影响

在微生物检验中,动力试验是重要鉴定项目之一。我们对常见的25种细菌,用不同琼脂浓度半固体进行穿刺动力试验,现将结果报道如下。 材料与方法 一、材料 1.培养基:血平板、SS琼脂平板、普通营养琼脂平板、TCBS平板、不同琼脂浓度半固体。 2.菌株来源:(1)埃尔托型霍乱弧菌稻叶型、小川型,副溶血性弧菌为舟山市本地从腹泻病人的粪便中分离得到,(2)淋病双球菌、志贺氏菌从舟山医院门诊病人的分泌物及粪便中分离得到,(3)不凝集弧菌从河水中分离得到,(4)其他肠杆菌细菌、假单胞菌、气单胞菌,G^+球菌及黄杆菌均为“WHO”浙江省临床微生物质控标本菌种。

琼脂浓度促进水稻花培绿苗率的作用

通过将3个早稻杂交组合花培愈伤组织转入不同浓度琼脂的分化培养基内,实验结果表明,3个组合均在琼脂浓度为0.6%、0.8%、1.0%的分化培养基内绿苗分化率逐渐提高,其中有两个组合的绿苗率在琼脂浓度为1.2%的分化培养基内绿苗分化率降低,而另一个组合的绿苗率继续在提高,表明提高琼脂浓度可以提高水稻花培的绿苗分化率,且不同基因型的水稻对琼脂浓度的要求各不相同。

琼脂浓度对马铃薯试管苗离体低温保存的影响

为研究渗透压在马铃薯种质资源试管苗长期保存中的作用,延长试管苗保存的时间,以早熟品种富金的脱毒试管苗为材料,通过设计5个不同浓度琼脂梯度,对脱毒试管苗保存情况进行试验,以筛选出最佳琼脂浓度。结果表明,富金试管苗在17℃离体低温保存条件下,MS培养基中琼脂浓度为18 g/L时,试管苗保存时间有明显延长效果,最长能保存4~5个月。

琼脂糖凝胶的合适浓度对于回收酶切后质粒载体的重要性

目的:探讨琼脂糖凝胶的不同浓度对回收不同大小的酶切后质粒载体纯度的影响。方法:将2种质粒载体酶切,并经不同浓度的琼脂糖凝胶电泳分析,通过比较酶切前和酶切后载体的相对位置,研究胶浓度对回收酶切后载体纯度的影响。结果:不同浓度的琼脂糖凝胶中,酶切前和酶切后载体的相对位置会发生变化,对能否成功回收到纯度高的酶切后DNA片段有重要影响;质粒大小不同,胶浓度的影响也不同。结论:合适的胶浓度对于回收酶切后质粒载体具有重要意义,应选择合适的胶浓度回收酶切后质粒载体。

小麦RAPD扩增时间循环参数及琼脂糖浓度的优化

对小麦RAPD常规的扩增循环参数及琼脂糖浓度进行了试验优化。结果表明:适宜的扩增循环参数为:94℃预变性2 m in,94℃15 s→36℃15 s→72℃30 s 40个扩增循环,72℃延伸10 m in,4℃保持。用于电泳介质的琼脂糖最佳浓度为2%。时间比常规减少一半。

布鲁氏菌Rev.1株接种不同条件制备TSA培养基验证试验

布鲁氏菌病是严重威胁人类健康的动物源性人畜共患病之一,动物布鲁氏菌病防治以预防为主。目前国内布鲁氏菌病疫苗有S2、A19、M5等,国际上还有S19、Rev.1等株疫苗使用,其中以羊种M5株和Rev.1株稳定性最不好。TSA是胰蛋白胨大豆琼脂培养基(也称胰酪大豆胨琼脂培养基),为商品化培养基,是布鲁氏菌Rev.1株适宜生长的培养基。选择不同琼脂浓度TSA培养基平板在不同条件(温度和时间)放置后接种布鲁氏菌Rev.1株,培养96 h后观察菌落生长情况并进行菌落结晶紫染色。通过对比分析发现,TSA培养基平板的湿度是影响变异检验结果准确性的重要因素,同时明确了布鲁氏菌Rev.1株所需TSA培养基的制备方法。

花生愈伤组织的诱导和再生体系的建立

以花生下胚轴为外植体,MS和1/2 MS为基本培养基,用不同浓度的激素及琼脂对愈伤组织诱导及分化的影响进行了试验,确定MS+6-BA 3.0 mg.L-1+NAA 0.4 mg.L-1+0.7%琼脂为诱导愈伤的最佳培养基。提高琼脂浓度可有效抑制玻璃化和褐化的发生,且琼脂浓度越大,愈伤组织越易分化出丛生芽。丛生芽在1/2 MS+NAA1.0 mg.L-1+0.7%琼脂培养基上生根率最高,达95%以上。

对影响草莓组培苗玻璃化若干因素的探讨

试验表明,适当增加组培瓶封口膜的透气性,琼脂浓度选择6.0g/L及碳源选择蔗糖,均可以有效地防止草莓玻璃化苗的发生。

TDZ对西南桦组织培养的影响

以西南桦种子无菌萌发苗的顶芽和带叶茎段为外植体,探讨TDZ、NAA、琼脂及糖浓度对西南桦组织培养的影响,建立西南桦以芽繁芽的快繁方法。结果表明,以3/4MS+2.5%蔗糖+0.65%琼脂+肌醇0.1 mg/L为芽诱导基本培养基,添加TDZ 0.025 mg/L+NAA 0.015 mg/L的条件下,顶芽外植体增殖效果最好,40 d增殖倍数为4.8;添加TDZ 0.025 mg/L+NAA 0.005 mg/L的条件下,带叶茎段外植体芽增殖效果最好,40 d增殖倍数为2.8,两种外植体增殖系数之和达到7.6。生根试验结果表明,3/4MS+2%蔗糖+0.65%琼脂+肌醇0.1 mg/L为生根基本培养基,添加0.1 mg/L IBA生根效果好。

提高甘蓝型油菜游离小孢子产胚率的研究

以 10个甘蓝型油菜基因型为材料进行游离小孢子培养 ,对如何提高可培养的基因型范围和产胚率进行了研究。结果表明 ,严格选择小孢子处于单核晚期的花蕾 ,在低温下分离小孢子 ,并采用含活性碳的NLN固液双层培养基 ,可大大提高产胚的基因型范围及产胚率。在固液双层培养基上 ,10个供试材料中有 7个获得了小孢子胚 ,产胚量最高的达 5 80个胚 /蕾。而在单层液体培养基上 ,仅有 4个基因型得到了胚 ,最高产胚量为 4 8个 /蕾。前者比后者平均产胚率提高 1～ 10倍。在小孢子胚发育至球形和早期鱼雷型阶段时 ,添加新培养液进行振荡培养 ,可提高胚胎发育的同步性 ,畸形胚大大减少。经过这些改进 ,使在含琼脂浓度较高的培养基上培养的子叶形胚直接发育成植株的频率大大提高。

生孢梭菌CFU计数培养基的研制

目的:研制一种适宜生孢子梭状芽孢杆菌(简称生孢梭菌)菌落形成单位(Colony Forming Units,CFU)计数的微生物培养基(简称培养基),使其CFU计数能够接近最大活菌数。方法:将生孢梭菌接种于硫乙醇酸盐培养基(不含琼脂),置35℃培养24-48h;将生孢梭菌的新鲜培养物置无菌离心管中,500r·min^(-1)离心5min。取上层菌液,用0.9%无菌氯化钠溶液稀释至与标准比浊管相同浓度,并作10倍系列稀释至1×10^(-6)备用。将上述菌液分别浇注混匀于琼脂浓度为0.5%,0.6%和0.7%的3个生孢梭菌CFU计数研究培养基(简称3个生孢梭菌CFU计数研究培养基),置厌氧条件下35℃培养。优选18h进行CFU/mL计数并观察菌落形态,优选琼脂浓度为0.5%的上述培养基作为生孢梭菌CFU计数培养基并与其他5个培养基进行生孢梭菌CFU计数的比较试验。将上述菌液采用浇注法和L棒涂抹法接种于上述6个不同的培养基,置不同培养条件及培养时间进行生孢梭菌的CFU计数。结果:生孢梭菌CFU计数培养基,浇注法接种,在厌氧条件下35℃培养18h,CFU计数最多,且菌落形态良好,可能最接近最大活菌数。结论:新研制的生孢梭菌CFU计数培养基是目前最适于生孢梭菌CFU计数的培养基。

扶芳藤组织培养再生体系的建立

扶芳藤茎段比叶盘易产生不定芽;4种基因型中,圆瓣扶芳藤的不定芽再生频率远远高于其他3种;MS+6-BA2.0mg·L-1是圆瓣扶芳藤不定芽诱导的最适培养基;低温处理10d可显著提高不定芽的再生频率;暗培养对扶芳藤再生影响不大;扶芳藤诱导不定芽的最适pH范围在5.8￣6.2之间;最适琼脂浓度为0.6%。

高斑叶兰的组织培养

1 植物名称 高斑叶兰[Goodyera procera（KerGawl.）Hook.]. 2 材料类别 茎段. 3培养条件 （1）芽诱导培养基：MS＋6-BA 0.5mg·L^-1（单位下同）＋NAA 0.05;（2）增殖培养基：1/2 MS＋6-BA 2.0＋NAA 0.2＋100 g·L^-1椰汁;（3）生根培养基：1/2MS＋IBA 1.0＋NAA 0.5＋0.5 g·L^-1活性炭.以上培养基蔗糖浓度（1）和（2）为3.0%,（3）为2.0%;琼脂浓度为5.5 g·L^-1;pH 5.8.培养温度为（24＋2）℃,连续光照12 h·d^-1,光照度为40μmol·m^-2·s^-1.

影响甘薯茎尖培养有关因素的研究

在２６～３４℃范围内甘薯茎尖分生组织离体培养均能成苗，在此温度范围两端，因品种不同成苗率有差别。最适温度为２９±１℃。２２～２４℃下甘薯茎尖分生组织虽能生长，但不能成苗。培养基ｐＨ４．６～７．０对较易培养成苗的甘薯品种成苗率无明显影响，高ｐＨ值对较难培养成苗的品种有影响。培养基琼脂浓度０．４～０．７％均适于甘薯茎尖分生组织培养。

结球白菜组培再生苗玻璃化问题初步研究

从培养基组份和培养条件两方面对结球白菜玻璃化的成因进行了研究 .初步认为激素浓度和琼脂浓度是影响结球白菜玻璃化的主要原因 .在一定范围内 ,降低BA、NAA浓度、提高琼脂浓度 ,不会影响芽的分化率 ,却有利于正常芽的分化形成 ;而改用通气性好的三角瓶或降低AgNO3 浓度 。

甘薯茎尖培养主要影响因素研究

温度在２６～３４℃范围内，甘薯茎尖分生组织培养均可成苗。在此温度范围以外，因品种不同成苗率有所差别。培养适宜温度为２８～３０℃。２２～２４℃条件下，甘薯茎尖分生组织虽能生长，但不能成苗。培养基ｐＨ值４６～７０对较易培养成苗的甘薯品种成苗率无明显影响，但ｐＨ值过高对较难培养成苗的品种有影响。培养基琼脂浓度０４％～０７％均适于甘薯茎尖分生组织培养。