琼脂电泳法分析血红蛋白成分

目的 分析地贫筛查血样的血红蛋白成分。方法 应用SEBIA 公司的HYDRASYS system 作血红蛋白琼脂电泳 (PH8.6)。结果 491例中372例呈正常人血红蛋白电泳区带,83例呈β-地中海贫血样血红蛋白电泳区带,8例呈α-地中海贫血样电泳区带,7例呈α、β-地中海贫血样血红蛋白电泳区带,21例呈异常血红蛋白电泳区带。结论 利用琼脂电泳可达到地贫筛查目的,对进一步检测及病情诊断具重要意义。

血红蛋白酸性琼脂电泳及其临床应用

本文介绍一种酸性琼脂电泳方法。它可以比较容易地分开血红蛋白A和血红蛋白F、可将异常血红蛋白分成两大类,即酸性电泳阳性和酸性电泳阴性两类异常血红蛋白。此法在血红蛋白病中比较常用的是鉴别血红蛋白S与其它电泳速度相同的变异物,帮助诊断镰状细胞贫血。在常见病方面,这种方法还能分开血红蛋白A和糖基化血红蛋白,用来帮助诊断糖尿病。

琼脂糖粉的质量对PCR扩增产物琼脂糖凝胶电泳的影响

目的:研究琼脂糖粉的质量对聚合酶链式反应(PCR)产物琼脂糖凝胶电泳的影响。方法:PCR产物琼脂糖凝胶电泳中分别使用不同牌子的琼脂糖粉,同时跑胶图像。结果:质量差的琼脂糖粉电泳结果有明显弥散现象,而更换高质量的琼脂糖粉,未见弥散现象。结论:琼脂糖粉质量在分子生物学PCR产物琼脂糖凝胶电泳实验中扮演重要角色,使用高质量的琼脂糖粉对实验的成功至关重要。

琼脂糖与聚丙烯酰胺凝胶电泳在SSR鉴定杂交油菜种子纯度中的比较

对3对候选引物SR85、SR332、SR407所扩增的秦优33杂交种及其父母亲本的DNA-SSR片段进行琼脂糖与聚丙烯酰胺凝胶电泳分离。两种电泳检测结果比较表明,(1)利用琼脂糖凝胶电泳分离后,3对候选引物对杂交种所扩增的SSR条带均为父母亲本条带的互补。其中引物SR332所获的两条互补条带的迁移率相差大,电泳图谱能清晰鉴别出父本、母本及杂种植株。引物SR85和SR407杂交种的互补条带迁移率相近,在鉴定中易出现人为误差。(2)利用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后,引物SR332所扩增条带未能区别杂交种与父本植株。引物SR85和SR407对杂交种所扩增的条带均为父母亲本所扩增条带的互补,相互差异显著,条带清晰稳定。可见,琼脂糖与聚丙烯酰胺凝胶电泳都是SSR技术鉴定种子纯度的有效途径,种子纯度分析应根据区别材料的遗传关系和引物分析表现来选择不同的电泳介质。

全自动琼脂糖凝胶电泳检测地中海贫血7500例结果分析

目的:探讨全自动琼脂糖凝胶电泳仪在地中海贫血(简称地贫)筛查中的应用。方法:采用全自动琼脂糖凝胶电泳仪对7500例标本进行Hb电泳,测定异常Hb、HbA2及HbF含量,其中439例同步做地贫基因检测。结果:7500例中检出β地贫615例,异常Hb245例;439例电泳对比基因检测结果显示β地贫、HbH病的电泳检测结果与基因检测结果完全吻合,HbCS的检测结果吻合率达99.77%。以HbA2≤2.55%诊断α1地贫,敏感度和特异度分别为88.9%和73.3%,以HbA2≤2.65%诊断α2地贫敏感度和特异度分别为81.3%和66.3%。结论:全自动琼脂糖凝胶电泳分辨率高,能准确分析出HbA2、HbH、HbCS、HbF异常增高及其它异常Hb,能很好诊断β地贫、HbH病和HbCS。

影响琼脂糖凝胶电泳条带扭曲程度的因素

在不同的电压与载样量下,分别使用溴化乙锭(EB)与新型核酸染料GoldViewna II及GoldView对凝胶中的DNA进行染色,观察电泳条带扭曲程度,了解电压、载样量与核酸染料对琼脂糖凝胶电泳条带扭曲程度的影响。使用GoldViewna II染色,当电压≥10V/cm时,DNA条带的扭曲程度随载样量增大而加剧;当DNA载样量≥10ng时,DNA条带的扭曲程度随电压升高而加剧。使用EB染色,仅当载样量≥50ng时,条带出现轻微扭曲,扭曲程度与电压无明显关系。结果表明使用GoldView染色,当电压不超过20V/cm或载样量不超过100ng时,DNA条带不扭曲。在琼脂糖凝胶电泳中,若要避免DNA条带扭曲干扰实验结果,使用GoldViewna II染色,若DNA载样量≥10ng,应控制电压≤5V/cm;使用EB染色,载样量应≤50ng;使用GoldView染色,可以使用20V/cm的电压缩短实验时间。

螺旋藻多糖的琼脂糖凝胶电泳鉴别

目的用琼脂糖凝胶电泳对螺旋藻多糖进行定性鉴别。方法利用螺旋藻多糖与肝素、硫酸软骨素、标准硫酸化的葡聚糖之间电荷密度及分子量的差异 ,在巴比妥缓冲液中进行琼脂糖凝胶电泳。结果根据电泳迁移率 ,可明显区分螺旋藻多糖与其他多糖。结论该法重现性较好 ,操作简单 。

琼脂糖电泳凝胶中回收微量DNA片段的新方法

对现有的 DNA片段回收方法进行了改进 .琼脂糖凝胶中目的 DNA片段条带切割后 ,浸入适量的 TE溶液 (0 .2～ 0 .4 m L/ g琼脂糖胶 ) ,在 37℃水浴保温 1 5 min,以溶出凝胶中的 DNA,利用相应的引物对浸出的微量DNA样品进行与原 PCR反应相同条件下的 PCR扩增 ,直接用 75 %乙醇沉淀后 ,适量 TE溶解得到回收的目的DNA样品 .此法回收的 DNA片段可用于分子克隆 ,特别是适用于 TA载体的克隆与测序 ,适合大批量微量样品的准确回收 ,防止了因试剂盒回收造成的微量

对琼脂糖凝胶电泳分离DNA片段的有效性的再认识

目的 探讨琼脂糖凝胶电泳对DNA酶切片段的分离效果。方法 将酶切后DNA片段进行琼脂糖凝胶电泳 ,回收单一目的片段并再行电泳 ,观察非目的片段的分离效果。结果 第一次回收的“单一”目的片段中 ,除目的DNA外 ,还含有多条较小的DNA分子 ;再次电泳回收的单一目的片段中 ,肉眼已看不见其它DNA分子 ,其纯度已大为提高 ;但是将几个批次的再次回收的目的片段浓缩后进行电泳发现其中仍然含有其它DNA片段。结论 琼脂糖凝胶电泳难以将大小不同的DNA片段彻底分开 ,电泳后回收的目的片段中含有大小不同的污染分子。

尿蛋白SDS琼脂糖凝胶电泳方法建立及临床应用

目的 建立应用于临床的尿蛋白十二烷基硫酸钠 (SDS) 琼脂糖凝胶 (AGE)电泳方法。方法 分别对Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型 4种琼脂糖、不同的缓冲对、电压和电泳时间进行实验 ,确定最佳的分离条件 ,建立测定方法。结果 当Ⅳ型琼脂糖凝胶浓度为4 0g/L ,SDS含量为 1g/L ,在pH 7.0的AMP 咪唑 HCl缓冲体系下进行电泳 ,可以有效地将尿蛋白按分子量大小进行分离。 5 7份临床尿蛋白阳性标本电泳结果表明 ,生理性蛋白尿 2 4例 ,中、高分子蛋白尿 5例 ,小分子蛋白尿 11例和混合型蛋白尿 17例。结论 本法具有分离效果好、操作简便、灵敏度高、成本低廉等优点 ,可以将尿蛋白按分子量大小分为小分子、中分子以及混合型 ,对肾脏疾病的受损部位和损伤程度的判断具有较高的价值 ,适于基层实验室的常规开展。

琼脂糖性质对凝胶电泳法分离金属性和半导体性单壁碳纳米管的影响

利用琼脂糖凝胶电泳分离单壁碳纳米管(SWCNTs)技术,考察了MB,Agarose,Agarose B和LRU 4种琼脂糖对SWCNTs分离效率的影响.紫外-可见-近红外(UV-Vis-NIR)吸收光谱研究结果表明,不同的琼脂糖对SWCNTs中s-SWCNTs的分离效率影响较小,而对m-SWCNTs的分离效率影响较大.分析4种琼脂糖凝胶的凝胶强度和凝胶网孔尺寸等发现,影响SWCNTs中m-SWCNTs分离效率的主要因素是琼脂糖的凝胶强度和琼脂糖凝胶形成的网孔尺寸,小的凝胶网孔尺寸有利于m-SWCNTs富集,高凝胶强度则不利于其富集.

琼脂糖凝胶电泳法测定血清中各种脂蛋白胆固醇

对琼脂糖凝胶电泳法同时测定血清极低密度脂蛋白（ VLDL）、低密度脂蛋白（ LDL）、高密度脂蛋白（ HDL）和脂蛋白 (a)[Lp(a)]的胆固醇 [即 VLDL- C、 LDL- C、 HDL- C和 Lp(a)- C]含量的方法进行评价。方法采用 Helena REP全自动快速电泳系统分离血清 VLDL、 LDL、 HDL和 Lp(a)，然后结合胆固醇酶染色法同时测定 VLDL- C、 LDL- C、 HDL- C和 Lp(a)- C的含量。分析了该法的精密度、准确度和干扰因素，并将该法与传统方法如测定 HDL- C的磷钨酸-镁沉淀法（ PTA- Mg2＋法）、测定 LDL- C的聚乙烯硫酸沉淀法（ PVS法）及测定 Lp(a)的免疫透射比浊法（ ITA法）进行比较。结果电泳法测定 VLDL- C、 LDL- C和 HDL- C的批内 CV分别为 5.16％～ 7.46％、 1.26％～ 3.28％、 3.78％～ 5.86％；批间 CV分别为 8.35％～ 11.25％、 2.78％～ 4.08％、 4.23％～ 6.36％。检测线性范围总胆固醇为 1.04～ 10.35 mmol/L，基本不受溶血、黄疸和脂血干扰。 VLDL- C、 LDL- C和 HDL- C的平均回收率分别为 90.3％、 94.3％和 89.6％。电泳法与传统法测定 LDL- C、 HDL- C的相关系数（ r）分别为 0.9609、 0.9557。电泳法测定 Lp(a)- C与 ITA法测定 Lp(a)的 r为 0.9235。以该法检测北京地区 98例健康人， HDL- C、 VLDL- C、

琼脂糖凝胶电泳操作中值得注意的几个问题

针对琼脂糖凝胶电泳中经常出现的电泳图谱条带模糊、弯曲 ,图谱背景荧光较强 ,凝胶胶面不平以及重复性差等问题 。

硫酸化香菇多糖的琼脂糖电泳鉴别

目的用琼脂糖凝胶电泳鉴别香菇多糖及硫酸化香菇多糖。方法利用肝素、低分子肝素、香菇多糖、硫酸化香菇多糖之间电荷密度及相对分子质量的差异 ,在巴比妥缓冲液中进行琼脂糖凝胶电泳。结果根据电泳迁移率的不同 ,可明显区分香菇多糖及其硫酸化衍生物。结论该法重现性好 ,操作简单 ,可用于香菇多糖及硫酸化香菇多糖的鉴别。

HelenaSAS-3全自动琼脂糖电泳仪在血红蛋白分析中的应用及评价

目的探讨HelenaSAS-3型全自动琼脂糖凝胶电泳分析系统在地中海贫血诊断中的临床应用。方法采用琼脂糖凝胶电泳检测200份标本中的血红蛋白A和A2含量。选择两份血红蛋白液进行批内、批间精密度试验。结果200例标本中,170例健康体检者、12例急性淋巴细胞白血病患者、12例急性髓系细胞白血病患者、4例非何杰金氏淋巴瘤患者血样血红蛋白A、血红蛋白A2的平均值±标准差分别是(%):97.55±0.51、2.44±0.51,97.01±0.329、2.99±0.32,97.42±0.57、2.84±0.28,97.44±0.55、2.55±0.55。2例β-地中海贫血患者血红蛋白电泳血红蛋白F均高于正常成人水平;血红蛋白A、A2批内、批间精密度试验CV%结果分别是:0.17、7.76,0.16、7.14。结论Helena公司SAS-3型全自动琼脂糖凝胶电泳分析系统够清晰分辨血红蛋白A2和血红蛋白F增高者,为临床诊断地中海贫血及异常血红蛋白病提供准确的实验室方法和依据。

琼脂糖凝胶电泳及SSCP法在淋巴瘤克隆性TCRγ基因重排检测中的应用

目的比较琼脂糖凝胶电泳和单链构象多态性分析(SSCP)法对淋巴瘤克隆性T细胞受体(TCR)γ基因重排的检测结果,探讨TCRγ基因重排的有效检测方法。方法从T、B细胞淋巴瘤及反应增生性淋巴组织中提取DNA,分别用两组TCRγ基因重排通用引物进行PCR扩增,扩增产物分别进行琼脂糖凝胶电泳和SSCP。结果T、B细胞淋巴瘤均出现克隆性TCRγ基因重排。SSCP法两组PCR产物在T细胞淋巴瘤中的阳性率分别为77.6%和75.9%,B细胞淋巴瘤均为10%;与SSCP相比,琼脂糖凝胶电泳中两组PCR扩增产物的假阳性率分别为15.3%和14.4%,所有反应增生性淋巴组织均出现假阳性。结论T、B细胞淋巴瘤中都存在克隆性TCRγ基因重排,仅用琼脂糖凝胶电泳检测可能出现假阳性,SSCP灵敏性较高。

琼脂糖凝胶电泳法快速筛选轮状病毒

本文用琼脂糖凝胶电泳检测轮状病毒RNA,并与聚丙烯酰胺凝胶电泳的结果相比较,结果43份聚丙烯酰胺凝胶电泳阳性的标本,琼脂糖凝胶电泳亦均为阳性。两种方法检测轮状病毒RNA的敏感度一致,而琼脂糖电泳省时、简便、经济。可作为一种快速方法用于轮状病毒感染的筛选和快速诊断。

用Helena SPIFE琼脂糖凝胶电泳系统进行血清蛋白电泳

目的 :评价HelenaSPIFE琼脂糖凝胶电泳 (AGE )系统进行血清蛋白电泳的方法。方法 :用HelenaSPIFE全自动快速电泳系统进行血清蛋白电泳 ,确立了该法的参考值范围 ,分析了该法的精密度和干扰因素 ,同时将该法与传统的醋酸薄膜电泳方法 (CAE)进行了比较。结果 :AGE测定了 72例正常人血清中白蛋白 ,α1球蛋白 ,α2球蛋白 ,β球蛋白 ,γ球蛋白的浓度 ,确立其参考值范围分别为 3 3 2～ 49 8g/L ,1 8～ 3 8g/L ,4 6～ 9 3g/L ,7 3～12 3g/L ,9 5～ 19 4g/L。批内、批间精密度在 1 2 1%～ 2 77%和 3 70 %～ 5 5 7%之间。基本不受黄疸、血脂和溶血的干扰。与CAE比较 ,5个蛋白区带中 ,除肾病综合征的 β球蛋白、急性时相反应的α2 球蛋白外 (相关系数r分别为 0 788和 0 769) ,其他区带的相关性好 ,r值在 0 82 3和 0 975之间。结论 :电泳法 (AGE)测定值与传统法基本一致 ,AGE且自动化 ,操作简便 ,精密度高 。

血清α-醋酸萘酯酶同工酶琼脂糖凝胶电泳法及临床应用

为简化α－醋酸萘酯酶同工酶检查技术，建立琼脂糖凝胶电泳法。１０ｇ／Ｌ琼脂糖－ＰＶＰ和ｐＨ７．４０．１ｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ－ＨＣｌ缓冲液，泳池ｐＨ８．６，μ＝０．０６巴比妥缓冲液，滤纸刺槽加样，电压１５０Ｖ，电流２ｍＡ／ｃｍ电泳４０ｍｉｎ，搭桥填充染色。染色液由α－醋酸萘酯ｐＨ６．２０．１ｍｏｌ／ＬＰＢ液和固蓝Ｂ盐组成，３７℃染色２０ｍｉｎ，醋酸漂洗比色。结果对照组（ｎ＝３０）α－ＡＮＥ同工酶谱带３～４条（Ｅ１、Ｅ１ａ、Ｅ２、Ｅ３）着色强度Ｅ３＞Ｅ１＞Ｅ１ａ＞Ｅ２，ｘＥ３占８８％，Ｅ１～Ｅ２１２％左右，相对电泳位置Ｅ１：ｐｒｅＡｌ／Ａｌ，Ｅ１ａ：Ａｌ／α１，Ｅ２：ｐｒｅ－α２，Ｅ３：α２／β，Ｒｆ分别为０．５４５、０．５２７、０．４３６、０．３６４。Ｅ３区组成复杂，用ＮＡＮＡ酶水解和ＷＧＡ亲加试验证明它富含ＳＡ和ＧｌｃＮＡＣ的一组不均一的糖蛋白。谱形异常的典型病例有Ⅰ型在症糖尿病和部分肝癌患者，它除有正常谱带外，前者多Ｅ４和Ｅ５，其色度比（％）Ｅ４０．１１４，Ｅ５０．１９８，相对电泳位置在β和β与Ｐｒｅ－γ之间，Ｒｆ＝０．２５４，０．１８２。肝癌病人谱带也多１～２条（Ｅ５和Ｅ６）位于Ａ／ｐｒｅ－γ和ｐｒｅ－γ，?