亲和层析一步纯化IgM类单克隆抗体

本文介绍采用兔抗鼠IgM血清制备的亲和层析柱从小鼠腹水中一步提纯单克隆抗体IgM的方法。提纯的IgM应用琼脂糖电泳检测,为一个区带;应用还原条件下的SDS—PAGE检测,分离为分子量～80K的重链和～25K的轻链两条区带,几未见其他杂带;应用免疫印染法鉴别,进一步确证为IgM,不含常见的杂质IgG。实验过程还发现提纯的IgM不够稳定,在贮存过程有降解现象。另外应用同一亲和柱从吸附IgG后的小鼠血清中提取多克隆抗体IgM的效果也是良好的,经用还原条件下的SDS-PAGE检测,同样也只分离为轻、重链两条区带,未见混有其他杂蛋白。

辣椒叶片基因组DNA提取方法的研究

本项研究采用SDS法、CTAB1法、CTAB2法及CTAB3法对辣椒叶片基因组DNA进行提取,通过琼脂糖凝胶电泳法与紫外吸收检测法对DNA的纯度进行检测。试验证明几种提取方法均能提取出辣椒叶片的基因组DNA,其中CTAB3法提取的DNA经琼脂糖凝胶电泳检测得到一条迁移率很低的整齐清晰的DNA条带,所提取DNA的质量和纯度较高。紫外吸收检测结果表明,CTAB3法提取的辣椒叶片DNA具有典型天然DNA分子的标准紫外吸收光谱特点。所以此方法为辣椒叶片基因组DNA提取的最佳方法。

两种不同Y染色体AZF微缺失检测方法比较

目的比较多重聚合酶链反应结合琼脂糖凝胶电泳检测法(检测15个位点)和实时荧光定量PCR检测法(检测6个位点)检测Y染色体AZF微缺失。方法对575例不育症患者随机选择两种不同检测法进行检测(电泳法检测300例,荧光PCR法检测275例)。结果电泳法检测出AZF微缺率为8.33%(25/300),荧光PCR法检出AZF微缺率为5.82%(16/275);使用电泳法检出1例患者仅缺失AZFb(sy133、sy145),该位点为荧光PCR法不涉及,同时患者染色体核型为46,XY,del(Y)(q11.23)。结论虽然电泳法检出率高于荧光PCR法,同时检测染色体核型可弥补荧光PCR漏检率。