改良琼脂糖电泳法分离碱性磷酸酶同工酶及其在肾脏疾病诊断中的应用

目的 用改良琼脂糖电泳法分离碱性磷酸酶同工酶并探讨在肾脏疾病诊断中的应用。方法 用改良琼脂糖电泳法对正常体检者和 16 2例肾脏疾病患者碱性磷酸酶 (ALP)同工酶进行分离和定量分析。结果 发现在慢性肾衰患者血清中存在胆汁型ALP ;肾小球肾炎和肾盂肾炎的ALP同工酶活性与正常者无显著性差异 ,慢性肾衰的ALP同工酶活性则显著高于正常体检者。在 6 9例慢性肾衰患者中 ,有 2 4例出现胆汁型ALP ,阳性率为 34 8%。结论 改良琼脂糖电泳法能定量分析肝、骨、胆汁等ALP同工酶 。

改良琼脂糖电泳法分离碱性磷酸酶同工酶及其在肺病诊断中的应用

目的探讨碱性磷酸酶 (AL P)同工酶在肺病诊断中的应用。方法用改良琼脂糖电泳法对正常体检者和 145例肺病患者血清中的 AL P同工酶进行分离和定量分析。结果发现在肺癌肝转移患者血清中存在胆汁型AL P同工酶 ,它对肺癌肝转移的诊断灵敏度为 89.5 % ,诊断特异性为 94.1% ,阳性结果的预示值为 97.1% ,阴性结果预示值为 80 % ,实验总有效率为 90 .9%。结论胆汁型 AL P同工酶可作为肺病诊断的辅助指标。

改良琼脂糖电泳法测定BALP在前列腺癌骨转移诊断中的应用

目的探讨改良琼脂糖电泳法检测骨碱性磷酸酶同工酶(BALP)在前列腺癌(PCa)骨转移诊断中的应用。方法神经氨酸苷酶处理血清,采用改良的琼脂糖电泳法分离测定50例健康体检者和163例PCa患者血清中的ALP同工酶。结果 (1)普通的琼脂糖电泳法对肝和BALP的分辨率较低,改良琼脂糖电泳法提高了分辨率。(2)PCa组的总ALP和BALP均高于对照组,PCa骨转移组的总ALP和BALP活性均显著高于对照组和无骨转移组(P<0.05),PCa无骨转移组的总ALP和BALP活性和对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论 BALP与PCa骨转移存在一定的相关性,经神经氨酸苷酶处理血清后,采用改良琼脂糖电泳法分离ALP同工酶有助于临床辅助诊断PCa有无骨转移。

琼脂糖电泳法和酶联免疫法测定碱性磷酸酶同工酶的比较

普通琼脂糖电泳不能分离碱性磷酸酶的肝型和胆汁型同工酶,也不能定量分析肝型和骨型同工酶,我们在实验中,将 TritonX-100加入琼脂糖中,发现区带压缩得更好,若再辅以热失活实验,能对肝型、骨型、小肠型和胆汁型同工酶进行定量分析。通过比较琼脂糖电泳法、酶联免疫法和热失活法对骨型同工酶的测定。

高效液相色谱法与琼脂糖电泳法检测β-地中海贫血携带者HbA_2结果的比较

目的比较高效液相色谱法(HPLC)与琼脂糖电泳法检测β-地中海贫血携带者HbA2的结果,探讨二者筛查β-地中海贫血的灵敏性和可靠性。方法产前筛查疑似β-地中海贫血携带者154例,同时检测β-地中海贫血基因、HbA2。HbA2分析采用法国Sebia琼脂糖凝胶电泳系统和HPLC分析系统同时进行分析。β-地中海贫血基因诊断采用反向点杂交法进行17种常见突变基因检测,以基因诊断结果作为金标准分别对HPLC分析仪和琼脂糖电泳的HbA2结果进行评价分析。结果在154份临床样本中,基因诊断为阳性的样本为65例;以HbA2>3.5%作为诊断β-地中海贫血携带者的最佳临界值,琼脂糖电泳共筛查出57例阳性,与基因诊断符合率为87.6%;HPLC分析共筛查出63例阳性,与基因诊断符合率为96.9%;琼脂糖电泳与HPLC分析仪诊断β-地中海贫血的灵敏性、特异性分别为84.6%、97.7%、96.9%及98.9%。HPLC分析仪阳性符合率、灵敏性明显高于琼脂糖电泳,差异有统计学意义(P<0.05);而HPLC特异性也稍高于琼脂糖电泳法,但比较无显著差异(P>0.05)。结论 HPLC筛查β-地中海贫血与基因诊断有较高的符合率,是一种筛查β-地中海贫血灵敏性、特异性和准确度都较高的理想方法。

琼脂糖电泳法、酶联免疫法和热失活法测定骨型碱性磷酸酶同工酶的比较

普通琼脂糖电泳不能分离碱性磷酸酶(ALP)肝型和胆汁型同工酶，也不能定量分析肝型和骨型同工酶。我们在实验中，将Triton X-100加入琼脂糖中，发现区带压缩得更好，若再辅以热失活实验，即能对肝型、骨型、小肠型和胆汁型同工酶进行定量分析。笔者采用琼脂糖电泳法、酶联免疫法(ELISA)和热失活法对骨型ALP进行测定，结果表明前两种方法具有显著相关性。通过与热失活法对比研究及大量的临床实践，获得了一些经验与实验数据，现报道如下。

乳酸脱氢酶同工酶琼脂糖电泳法的某些改进

<正> 目前国内有多种测定乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LD, LDH)同工酶的方法,但由于显色后的区带不甚清晰,故结果不能令人满意。用琼脂糖凝胶电泳法可克服上述缺点,但操作较繁并需较长时间。我们通过实践作某些改进,现介绍如下: 材料与方法 一、材料 (一)标本:健康人血清。 (二)仪器:1.电泳仪(DY-1型电泳仪);2.721型分光光度计。

琼脂糖凝胶电泳法测定血清中各种脂蛋白胆固醇

对琼脂糖凝胶电泳法同时测定血清极低密度脂蛋白（ VLDL）、低密度脂蛋白（ LDL）、高密度脂蛋白（ HDL）和脂蛋白 (a)[Lp(a)]的胆固醇 [即 VLDL- C、 LDL- C、 HDL- C和 Lp(a)- C]含量的方法进行评价。方法采用 Helena REP全自动快速电泳系统分离血清 VLDL、 LDL、 HDL和 Lp(a)，然后结合胆固醇酶染色法同时测定 VLDL- C、 LDL- C、 HDL- C和 Lp(a)- C的含量。分析了该法的精密度、准确度和干扰因素，并将该法与传统方法如测定 HDL- C的磷钨酸-镁沉淀法（ PTA- Mg2＋法）、测定 LDL- C的聚乙烯硫酸沉淀法（ PVS法）及测定 Lp(a)的免疫透射比浊法（ ITA法）进行比较。结果电泳法测定 VLDL- C、 LDL- C和 HDL- C的批内 CV分别为 5.16％～ 7.46％、 1.26％～ 3.28％、 3.78％～ 5.86％；批间 CV分别为 8.35％～ 11.25％、 2.78％～ 4.08％、 4.23％～ 6.36％。检测线性范围总胆固醇为 1.04～ 10.35 mmol/L，基本不受溶血、黄疸和脂血干扰。 VLDL- C、 LDL- C和 HDL- C的平均回收率分别为 90.3％、 94.3％和 89.6％。电泳法与传统法测定 LDL- C、 HDL- C的相关系数（ r）分别为 0.9609、 0.9557。电泳法测定 Lp(a)- C与 ITA法测定 Lp(a)的 r为 0.9235。以该法检测北京地区 98例健康人， HDL- C、 VLDL- C、

琼脂糖凝胶电泳法测定糖化血红蛋白及其临床应用

目的 采用琼脂糖凝胶电泳的方法测定糖化血红蛋白 (Hb Alc) ,了解 Hb Alc与空腹血糖的关系。方法 取正常人及糖尿病人 EDTA- K2抗凝全血 2 32例 ,制成血红蛋白溶液 ,使用法国 sebia公司 sebia HYDRASYS电泳仪及光密度计扫描仪 ,用琼脂糖凝胶进行电泳分离和光密度计扫描定量测定 Hb Alc;在全自动生化分析仪上用己糖激酶法测定空腹血糖。结果 对照组的 Hb Alc平均值 (% )为 x± s=5 .4 1± 0 .94 ,血糖的平均值 (mmol/ L )为 x± s=4 .92± 0 .87;糖尿病人的 Hb Alc平均值 (% )为 x± s=11.0 6± 4 .3,血糖的平均值 (mmol/ L )为 x± s=10 .86± 3.0 4 ,P<0 .0 1,血糖值与Hb Alc值有显著相关性 ,r=0 .985 ,回归方程 Y=1.10 15 x+1.815。结论 该方法标本用量少 ,分辨率高 ,重复性好 ,结果不受温度及胎儿血红蛋白的影响 ,Hb

琼脂糖火箭电泳法测定唾液溶菌酶活性

本文采用琼脂糖火箭电泳法测定唾液溶菌酶活性,将琼脂扩散方法和电泳技术结合一起,使溶菌酶在电场中泳动,在通过含有作用底物的凝胶时与溶壁微球菌发生水解作用,形成可见的溶菌透明峰,根据峰值与溶菌酶浓度的时数值成正比的关系求得样品溶菌酶含量。该方法简便、快速、稳定性好,灵敏度高,结果准确可靠。在本实验条件下最低检出量为1.25 μg/ml,在5.O-100.0μg/ml范围内呈良好的浓度-峰高的线性关系,r=O.9947,P<0.001,批内重复变异系数CV=4.15％,批间重复变异系数CV=7.42％,平均回收率为95％～114％。

一种基于琼脂糖凝胶电泳法检测SARS-CoV-2的新方法

鉴于琼脂糖凝胶电泳分析方法的准确、快速、简便等特性,优化后可以做为检出COVID-19病原的新方法。在不影响结果判读的情况下,通过对扩增时间及检测样本浓度进行优化,以达到预期目的。结果表明,检测SARS-CoV-2的最优反应程序为94℃预变性3 min;94℃变性时间、56℃退火时间及72℃延伸时间均降至5 s,且进行35个循环;最后72℃孵育5 min,最优模板用量比例(初始值设为4 ng)下限调整在(1:1000)^(1:5000)范围内。阳性样本测试结果符合预期。建立了一种简便、省时,适用于检测低载量病毒样本的新方法,为临床提供诊断参考。

琼脂糖凝胶电泳法测定小麦中长穗偃麦草的基因

为了验证琼脂糖凝胶电泳法检测小麦中长穗偃麦草基因的可行性,选取了小麦品种新春37与长穗偃麦草的杂交后代XC10、XC31、XC35,利用DNA提取、构建PCR体系、PCR扩增以及琼脂糖凝胶电泳等方法来检测其相关基因。并验证该方法对小麦相关基因检测的准确度和重现性。结果显示,该方法操作简单、准确度高,可用于小麦基因的检测分析。

一种快速鉴定RNA质量的方法

目的 建立一种快速鉴定RNA完整性的方法。方法 在常规琼脂糖凝胶电泳的基础上 ,结合甲醛变性琼脂糖凝胶电泳加以改进而成。结果 提取的总RNA用此方法电泳后可得到 2 8S、18S、5 .8S(5S)三条清晰的rRNA条带。结论 此方法可以达到对RNA完整性进行快速鉴定的目的。

细胞凋亡率检测方法的探索

目的探索可用于全面准确评价细胞凋亡率的检测技术。方法选取地塞米松诱导胸腺细胞凋亡模型,用流式细胞术及DNA琼脂糖凝胶电泳等方法对处于不同凋亡阶段的胸腺细胞凋亡率进行检测分析。结果流式细胞分析对于早期凋亡胸腺细胞的检测不仅具有高度灵敏性,而且可有效区分凋亡与坏死细胞,但对于凋亡晚期细胞膜严重受损乃至破碎的细胞,单纯流式细胞仪检测不能有效反映真实凋亡率;借助琼脂糖凝胶电泳法可检测破碎后释放到胸腺组织或培养基内的DNA碎片;当凋亡严重导致大量细胞破碎降解时,对样本进行细胞计数比较亦有重要参考价值。结论为全面和准确地评估细胞凋亡率,需选择多种检测方法结合分析,细胞学及寡核苷酸片段检测技术是一个相当不错的选择。

改良溴化乙锭染色法快速检测基因组DNA

目的探讨一种耗时少、检出率高的基因组DNA检测方法。方法采用改良的溴化乙锭染色法检测提取到的样本基因组DNA。采用分光光度仪进行敏感性验证,聚合酶链式反应确认该方法能否用来检测PCR产物。结果改良的溴化乙锭染色法显著减少基因组DNA的上样量,提高基因组DNA的检测敏感性,节省操作时间,无需loading buffer,并可粗略估计基因组DNA浓度。结论改良的溴化乙锭染色法只适用于初筛样本基因组DNA,不能用于评估DNA片段的长度。

肿瘤患者血清乳酸脱氢酶及其同工酶电泳图谱的变化

目的 :探讨不同肿瘤患者血清乳酸脱氢酶 (lachicdehydrogenase ,LDH)活性及其升高者同工酶图谱的变化规律。方法 :我们用比色法对 12 97例肿瘤患者的LDH活性进行测定 ,用琼脂糖凝胶电泳法对 2 90例LDH活性升高肿瘤患者和 30例健康者的同工酶进行观察。结果 :2 2 4 %的肿瘤患者血清LDH升高 ,LDH活性升高的肿瘤患者84 4 %的存在着同工酶图谱异常。LDH活性升高的肿瘤患者的同工酶谱异常表现为L3 ↑、L4↑、L5↑、L1↓、L2 ↓的规律。结论

小儿肾病两种血清白蛋白测定方法结果比较

目的 比较肾病患儿在采用BCG法与琼脂糖电泳法 (电泳法 )测定血清血红蛋白 (ALB)结果的差异 .方法 BCG法测定血清ALB的浓度 ;用电泳法测定血清ALB浓度 (双缩脲法测定TP) .结果 正常对照组 (31例 ) ,两种方法测定结果差异无显著性意义 (p >0 .0 5 ) .急性肾炎组 (35例 ) ,两法测定结果差异无显著性 (p >0 .0 5 ) ;肾病综合征组(36例 ) ,两法测定结果差异有非常显著性意义 (p<0 .0 1) .结论 肾病综合征患儿作ALB测定时 ,用电泳法优于BCG法 。