瑞拉菌素产生菌S-5120菌株防治黄瓜霜霉病害的研究初报

经黄瓜霜霉病孢子萌发试验和离体叶片抑菌试验表明,瑞拉菌素产生菌S-5120菌株和瑞拉菌素均对黄瓜霜霉病有较强抑制作用.温室防病试验表明,瑞拉菌素产生菌S-5120发酵液对黄瓜霜霉病有明显的保护和治疗作用.相对保护效果达75.17%;治疗效果达69.69%,且高于农抗-120的相对防效62.65%.

1.2%瑞拉菌素EW对苹果树腐烂病菌的室内毒力测定和田间药效试验

用瑞拉菌素、福美砷两种杀菌剂对苹果树腐烂病病菌进行了室内毒力测定和田间药效试验。结果表明,瑞拉菌素对苹果树腐烂病病菌的抑制作用效果优于福美砷,有效中量ED50分别为28.7、35.6mg/kg;1.2%瑞拉菌素水乳剂的毒力效果是40%福美砷WP的1.24倍;1.2%瑞拉菌素水乳剂涂治后的伤口愈合率为49.94%,明显优于40%福美砷WP的伤口愈合率,其相对防效达到88.17%。

1.2%瑞拉菌素EW防治水稻稻瘟病的田间药效试验

瑞拉菌素Zuelaemycin是委内瑞拉链霉菌秦岭变种Streptomyces venezuelae var．qinlingensis．n．Var产生的一种农用抗生素，属于氨基糖苷类，可有效防治稻瘟病Pyricularia grisea。为验证其对稻瘟病防效，于2003年和2004年分别在陕西、湖北、宁夏、四川四省进行了田间药效试验，试验结果显示，瑞拉菌素在有效成分用量为16．5g／hm^2和18g／hm^2时，对水稻叶瘟病的防效分别可达83．2％和87．2％，对水稻穗颈瘟的防效分别可达77．81％和82．17％，与有效成分用量225．0～337．5g/hm^2的三环唑WP的防效相当或优于后者，1．2％瑞拉菌素EW防治水稻稻瘟病的增产效果也高于其它对照药剂。综合各田间试验结果，显示1．2％瑞拉菌素EW对水稻稻瘟病具有良好的防效，优于传统药剂，在大田生产上具有良好的推广应用前景。

瑞拉菌素发酵液对丹参和黄芩种子萌发和幼苗生长的影响

室内测定瑞拉菌素(Zuelacmycin)发酵液对丹参(Salvia miltiorrhizaBge)和黄芩(Scutellaria ba-icalensisGeorgi)种子萌发和幼苗生长的影响。结果表明,不同稀释倍数瑞拉菌素发酵液对丹参和黄芩的种苗生长影响不同,对种子萌发均表现出低稀释倍数抑制,高稀释倍数促进的作用,但在低稀释倍数下,对丹参种子的萌发抑制作用较黄芩弱。同一稀释倍数瑞拉菌素发酵液对丹参幼苗生长的影响也较黄芩弱。根尖解剖学观察表明,低稀释倍数瑞拉菌素发酵液处理后的黄芩和丹参,根尖形态结构发生了明显的细胞组织学异常变化。

瑞拉菌素产生菌的鉴定

自陕西秦岭太白山土壤中分离到 1株编号为S 5 12 0的放线菌。根据对其生物特征鉴定、生理生化特征分析 ,它与链霉菌属中委内瑞拉链霉菌最为相近 ,但菌种S 5 12 0对梨黑星病菌、苹果腐烂病菌等多种引起植物病害的病原真菌有拮抗和溶菌作用 ,故认为S 5 12 0是委内瑞拉链霉菌的一个新变种 ,定名为委内瑞拉链霉菌秦岭变种(Streptomycesvenezuelaevar .qinlingensis.n .Var)。

1.2%瑞拉菌素水乳剂防治小麦白粉病的效果

为了解瑞拉菌素对小麦白粉病的防治效果,用1.2%瑞拉菌素水乳剂在小麦田间进行不同喷施浓度、时间和次数试验。结果表明,在3个1.2%瑞拉菌素水乳剂喷施浓度(稀释600倍、700倍和800倍)中,600倍稀释液对小麦白粉病防治效果最好,防效达77.6%,保产作用为9.9%。从喷药次数看,用650倍的稀释液在小麦抽穗和扬花期喷施两次的防病效果最好,防效达74.4%,保产作用为10%;若喷施一次时,扬花期喷施的效果优于抽穗期喷施。

瑞拉菌素浸种处理对附子种根发生和种苗形态的影响

采用室内盆栽法,研究瑞拉菌素对附子种根发生和种苗形态的影响。结果表明,随瑞拉菌素稀释倍数的降低,子根长度、数目和鲜干质量均增大;而侧根长度先增大后减小,侧根数则随稀释倍数的降低而减小,其中在800倍液处理下侧根数最大,侧根鲜干质量在400倍液处理下最小,200倍下最大且显著高于CK2。瑞拉菌素浸种处理后的附子幼苗的苗高、展开叶数和地上部分鲜干质量均高于CK2,且800倍液和200倍液处理下表现突出。与多菌灵相比,瑞拉菌素对附子浸种是安全的,其200倍稀释液最适宜浸种。

1.2%瑞拉菌素水乳剂对油菜菌核病的防治效果

用100倍、300倍和500倍的1.2%瑞拉菌素水乳剂稀释液,通过室内离体叶片接菌、田间植株接菌和在自然发病情况下对油菜进行喷施药试验。结果表明,不同倍数稀释液1.2%瑞拉菌素水乳剂处理对油菜菌核病均有一定的防(抑)治效果。室内离体叶片接菌鉴定其抑制率分别为79.53%、68.27%、26.47%,田间接种鉴定的防治效果分别为30.1%、29.9%、19.12%,在不接种自然发病情况下,防治效果分别达到为70.89%、66.24%、34.20%。由此可见1.2%瑞拉菌素水乳剂能有效控制油菜菌核病害蔓延发展,保护油菜的运输器官,保护油菜叶片免收危害,确保油菜正常光合作用,增加粒质量和角粒数,增产保产效果明显。

瑞拉菌素对10种作物幼苗生长的影响

用3个浓度梯度的瑞拉菌素稀释液对辣椒、芥菜、萝卜、黄瓜、玉米、韭菜、水稻、小麦、高粱、番茄10种作物进行室内砂培试验,测定供试作物的出苗率、根长、苗高、鲜质量4项指标。结果表明,浸种处理时,3种浓度的瑞拉菌素稀释液对萝卜、玉米、辣椒、芥菜4种作物是安全的,韭菜和水稻的最低安全浓度是100倍的稀释液,黄瓜、小麦、高粱最低安全浓度是400倍的稀释液,但3种浓度的稀释液对番茄生长均有显著抑制作用。

瑞拉菌素产生菌GAO-1-GR-2发酵工艺条件优化研究

对瑞拉菌GAO-1-GR-2的发酵条件进行了单因素研究,通过正交试验设计对该菌株的培养基进行了筛选。并对其发酵条件进行了研究,结果表明:有机氮源以酵母粉和黄豆饼粉为宜;碳源以葡萄糖和饴糖最好,但考虑到发酵成本,应选用葡萄糖2%。发酵培养基应呈中性,以采用自然pH为宜,pH超过8,或小于7,则会抑制发酵产物活性;通气量为1:0.5最好,能降低20%耗氧量;摇床转速140 r/min,培养温度30℃,发酵周期72 h。抗生素发酵原粉效价能达到4 000μg/mL。

大孔吸附树脂在瑞拉菌素高产菌GAO-1-GR-2活性物质提取中的应用

以瑞拉菌素高产菌GAO-1-GR-2发酵液为基础,选用不同粗提温度和5种不同的大孔吸附树脂提取瑞拉菌素高产菌GAO-1-GR-2抑菌活性物质,以稻瘟菌为指示菌,进行吸附条件优化。结果表明:最佳粗提温度为60℃,GAO-1-GR-2抑菌活性物质活性最强且提取效率最高,HP-20对活性物质的吸附效果较好,并且获得了较优的吸附条件:上样液pH值为6.0,最佳的吸附流速为2.0mL/min,最佳的洗脱液为体积分数50%甲醇、70%乙醇和30%丙酮,洗脱液最佳流速为1.5mL/min。

瑞拉菌素产生菌RL-2的诱变育种

本研究以委内瑞拉链霉菌秦岭变种RL-2(Streptomyces venezuelaevar.qinlingensis RL-2)为出发菌株,分别采用紫外线、氯化锂及紫外线加氯化锂的复合诱变方式对其孢子悬液进行诱变处理。在复合诱变的紫外线照射时间为45s和氯化锂浓度为0.4%的情况下,获得一株瑞拉菌素的高产突变菌株UVL-108且连续传接6代其遗传特性较稳定。采用双向培养及生长速率法对其进行初筛和复筛,结果表明:UVL-108的拮抗性能较出发菌株提高了77%,其发酵液对稻瘟病菌的抑菌毒力是出发菌株的3倍。