改良支气管肺泡灌洗液细胞分类计数制片及染色法

目的：改良支气管肺泡灌洗液细胞分类制片及染色方法，并对其临床实用性进行验证。 方法：随机抽取50例门诊及住院患者肺泡灌洗液标本，分别用改良的自动化瑞氏吉姆萨染色法及传统手工HE染色法染色，由两名具有专业技术能力的检验人员分别进行显微镜下细胞分类计数，评估两种制片方法检测结果的可比性。 结果：两种方法对肺泡灌洗液中吞噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞和嗜酸性粒细胞计数一致性较好，相关系数（r）均〉0.95。改良法染色的细胞形态完整，细胞核和细胞浆分辨清楚，可见颗粒、空泡等细微结构；而传统法染色后的细胞固缩明显，细胞体积变小，细胞核和细胞浆分辨清晰度下降，颗粒和空泡等细胞结构辨认不清。改良法比传统法省去了滤液离心富集细胞的过程（6 min），并且使用自动化瑞氏吉姆萨染色法（20 min）代替了手工HE染色法（30 min），每份标本至少节省了15－20 min的制片和染色时间。 结论：改良的自动化瑞氏吉姆萨染色法优于手工HE染色法，更适用于支气管肺泡灌洗液细胞分类计数，尤其是批量检测。

淋巴细胞微核的两种染色方法检测结果分析

目的通过吉姆萨和瑞氏吉姆萨两种染色方法对放射工作者外周血淋巴细胞微核率检测,探讨人外周血淋巴细胞微核检测的染色方式,寻求合适的染色方法,降低漏检率,降低误检率,提高淋巴细胞微核的检测质量,缩短检测周期,提高工作效率。方法常规微量全血细胞培养,37℃72小时获取淋巴细胞,分别用吉姆萨和瑞氏吉姆萨两种染色方法,对382例放射工作者岗中微核率进行检测。对每份标本两种染色方法结果进行对照分析。结果两种染色方法比较,微核率存在较小差异,但两者在阅片时存在较明显差异,瑞氏吉姆萨复合染色效果更佳,易于辨认。结论在淋巴细胞微核率检测中,瑞氏吉姆萨复合染色法优于吉姆萨染色。

新型荧光探针组合用于循环肿瘤细胞中鉴定的研究

目的验证新型荧光探针组合鉴定循环肿瘤细胞(CTCs)的可行性,建立一种新的鉴定CTCs的方法。方法选取Eca-109和HeLa两种肿瘤细胞系,将肿瘤细胞系制作成单细胞悬液代替CTCs,对其进行分离、荧光探针组合染色和瑞氏吉姆萨染色,分别观察染色的肿瘤细胞的形态,对比测量到的肿瘤细胞形态学特征,包括细胞长径、细胞核长径、细胞表面积和核质比,计算新型荧光探针组合与瑞氏吉姆萨分别染色肿瘤细胞系的符合率。在此基础上,课题组选取5例次肿瘤患者,按照上述实验方法进行临床验证,观察新型荧光探针组合染色CTCs的情况。结果分析瑞氏吉姆萨染色和荧光探针组合染色Eca-109和HeLa的细胞形态学结果,发现细胞长径、细胞核长径、细胞表面积和核质比均无差异;对两种肿瘤细胞系的细胞形态学结果的均数分析发现也无差异。因此,课题组认为瑞氏吉姆萨染色和荧光探针组合染色的同一肿瘤细胞系在形态学上是一致的。在5例次临床验证实验中,新型荧光探针组合染色检出2例次。结论建立的新型荧光探针组合可用于CTCs的检测。