瑞香狼毒提取物对山楂叶螨的生物活性及酶活性影响

瑞香狼毒的氯仿、石油醚、甲醇提取物对果树重要害螨山楂叶螨有很好的内吸和触杀活性 ;对氯仿提取物处理后的成螨体内几种重要酶系活性测定发现 ,在内吸处理中 ,其对蛋白酶、谷胱甘肽 S 转移酶 ,酯酶同功酶有不同程度的激活作用 ;在触杀处理中 ,对蛋白酶、谷胱甘肽 S 转移酶影响不明显 ,对酯酶同功酶有一定的抑制作用 ;研究表明 ,瑞香狼毒可以有效杀死山楂叶螨 ,是一种很有利用价值的杀虫植物。

瑞香狼毒提取物抗实验性癫痫筛选研究

目的 对瑞香狼毒六种提取物 (依次为瑞香狼毒水、生离物、丙酮、石油醚、乙醚、乙醇提取物 )进行药效学及毒性比较研究 ,筛选出一种高效低毒的抗癫痫化合物 ,便于临床前机制探讨。方法 采用动物三种惊厥模型 ,测定瑞香狼毒六种提取物抗实验性癫痫半数有效量 (ED50 )。计算其半数致死量 (L D50 )。结果 瑞香狼毒提取物 ～ ,即丙酮、石油醚、乙醚、乙醇四种提取物对小鼠最大电休克发作实验 (MES)、戊四唑惊厥实验(MET)和电刺激大鼠皮层惊厥阈值 (TL S)模型均具有较强的对抗作用。而其中丙酮提取物毒性较低 ,治疗指数高达 14 .9。结论 瑞香狼毒丙酮提取物是一种抗惊厥作用较强而毒性小的有希望的抗癫痫化合物。

瑞香狼毒提取物逆转肺癌细胞耐药的免疫组化研究

目的:探讨瑞香狼毒逆转肺癌化疗耐药的机制。方法:用瑞香狼毒水提取物处理肺癌细胞株,用药前后分别用免疫组织化学SP法检测肺癌细胞中:多药耐药相关蛋白(MDM2)、肺耐药蛋白(LRP)、热休克蛋白27(HSP27)和多药耐药基因(MDR-1)的表达状况。利用形态学图像分析,比较瑞香狼毒用药前后四种耐药基因表达的差异。结果:两个肺癌细胞株瑞香狼毒用药前后四种癌基因表达情况如下:NCI-H446细胞株用药前MDR-1、LRP和MDM2细胞阳性率和辉度均高于用药后(P<0.05),而HSP27的表达用药前后差异不显著(P>0.05)。NCI-H157细胞株用药前MDR-1、LRP和HSP27细胞阳性率和辉度均高于用药后(P<0.05),而MDM2的表达用药前后差异不显著(P>0.05)。结论:瑞香狼毒提取物对两种肺癌细胞株的某些耐药基因蛋白的表达有明显的抑制作用。

瑞香狼毒提取物对菜粉蝶的产卵忌避与杀卵作用

采用喷雾法，就瑞香狼毒（Ｓｔｅｌｌｅｒａ ｃｈａｍｅａｊａｓｍｅ Ｌ．）根乙醇提取物（简称ＳＣＥＥ）对菜粉碟（Ｐｉｅｒｉｓ ｒａｐａｅ Ｌ．）的产卵忌避作用以及对卵的孵化率的影响进行的测定。结果表明：１．５％的ＳＣＥＥ对菜粉碟的产卵有较强的忌避率，第１、２、３、５ｄ的产卵忌避率分别为７７．５９％、６４．２９％、５２．４６％、３１．２３％；１．５％的ＳＣＥＥ对菜粉蝶卵的杀卵作用差，７ｄ后的卵化率为５６．４１％。

瑞香狼毒提取物对肺癌细胞超微结构的影响

目的探讨中药瑞香狼毒水提取物对肺癌细胞超微结构的影响。方法用瑞香狼毒水提取物处理两个肺癌细胞株(人小细胞肺癌NCI-H446和人非小细胞肺腺癌NC I-H157)。用药前后分别取材,按悬浮细胞操作规程常规制备超薄切片,透射电镜观察用药前后两肺癌细胞株超微结构的变化。结果用药后较用药前两肺癌细胞株的超微结构变化主要表现在:①细胞形态的改变:多数细胞体积变小,形态不规则,胞质电子密度增高。少数细胞体积增大,表面胞膜突起消失,部分细胞膜呈线性中断。②细胞器的改变:细胞器减少或变形、结构不清。个别细胞线粒体呈气球样肿胀,嵴减少或消失。③细胞核的改变:细胞核内染色质边集,基质电子密度增高。有些细胞核内异染色质分界不清,核仁呈均一电子密度,网状结构消失。结论中药瑞香狼毒水提取物对肺癌细胞有明显的细胞毒作用。

瑞香狼毒提取物抗乳腺癌MCF-7细胞多药耐药的研究

该研究将探索瑞香狼毒提取物(SCE)抗乳腺癌多药耐药的作用及相关机制。以乳腺癌化疗敏感细胞株MCF-7及阿霉素耐药细胞株MCF-7/ADR作为实验对象,通过噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活力,采用Pi单染法测定细胞周期,4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色、流式细胞术检测细胞凋亡情况,单丹磺酰尸胺(MDC)染色以及GFP-LC3B-mcherry腺病毒转染检测自噬流情况,Western blot检测凋亡蛋白Bcl-2、Bax、caspase-9、caspase-3以及自噬蛋白LC3B、p62、Beclin-1的表达水平。实验结果显示,SCE能够显著抑制乳腺癌细胞敏感/耐药株的增殖,耐药因子为0.53,远低于阿霉素的耐药因子59,同时SCE处理后敏感/耐药细胞株的G0/G1期细胞比例均显著增加。另外,SCE给药后的DAPI染色表明,敏感/耐药细胞株均出现核浓缩、染色加深、核碎裂等一系列凋亡现象;流式双染结果表明SCE给药后敏感/耐药细胞株凋亡细胞比例均显著上升;Western blot结果显示SCE给药后敏感/耐药细胞株caspase-3、caspase-9、Bcl-2蛋白的表达水平均显著降低而Bax蛋白的表达水平显著升高。进一步,SCE处理后也能够使乳腺癌耐药株MDC阳性染色以及GFP-LC3B-mcherry转染后的黄色荧光斑点增多,并上调乳腺癌细胞自噬相关蛋白LC3B-Ⅱ、p62以及Beclin-1的表达水平。综上所述,SCE可能通过阻滞乳腺癌耐药细胞的细胞周期,并阻断自噬流,最终通过干预耐药细胞的凋亡抵抗而发挥抗耐药作用。

瑞香狼毒和坡柳提取物对小菜粉蝶幼虫的拒食活性测定

瑞香狼毒乙醇提取物对小菜粉蝶4龄幼虫24h选择拒食作用的拒食中浓度(AFC50)为219.6mg/L;完全拒食作用的AFC50为1246.4mg/L;坡柳乙醇提取物对小菜粉蝶4龄幼虫24h选择拒食作用的AFC50为691.6mg/L,完全拒食作用的AFC50为398.0mg/L.

瑞香狼毒根提取物对菜粉蝶幼虫的触杀作用

采用点滴法就瑞香狼毒（Stellera chameajasme L.)根乙醇提取物（简称SCEE）对菜粉蝶（Pieris rapae L.）不同虫态的触杀作用进行了测定，采用波特喷雾法就SCEE对菜粉蝶幼虫的毒杀作用的进行了测定，彩注射法就SCEE对菜粉蝶5龄幼虫的毒杀作用进行了测定，结果表明：SCEE对菜粉蝶卵，幼虫，预蛹和蛹的触杀作用差，SCEE对菜粉蝶幼虫的毒杀作用较强（波特喷雾法），SCEE对菜粉蝶5龄幼虫的毒杀作用强（注射法）。

瑞香狼毒提取物对昆虫生物活性的研究

就瑞香狼毒根乙醇提取物（简称SCEE）对菜粉蝶，桃蚜，小菜蛾，斜纹夜蛾和亚洲玉米螟的生物活性进行测定。采用夹毒法测定，SCEE处理2天后菜粉蝶五龄幼虫胃毒作用的LD50为12.32mg／头，采用叶碟法测定当SCEE浓度分别为5，10和50mg/mL时，处理7天后菜粉蝶五龄幼虫，小菜蛾三龄幼虫和斜纹夜蛾三龄幼虫的校正死亡率分别为100％、65．52％和16．67％。采用浸叶法测定，SCEE处理2天后，桃蚜的LC50值为0.5922mg/mL。采用食料混药法测定，处理7天和14后，SCEE对亚洲玉米螟三岭幼虫的校正死亡率分别65．52％和85．52％，以上结果表明SCEE对菜粉蝶幼虫，亚洲玉米螟幼虫和桃蚜具有很强的生物活性,而对斜纹夜蛾幼虫和小菜蛾幼虫的生物活性弱。

瑞香狼毒根提取物对四种蔬菜害虫的生物活性

应用叶碟法就瑞香狼毒（Ｓｔｅｌｌｅｒａ ｃｈａｍｅａｊａｓｍｅ Ｌ．）根乙醇提取物（简称ＳＣＥＥ）对４种重要蔬菜害虫的拒食率、ＬＣ５０和处理后７ｄ的校正死亡率进行了测定。结果表明，ＳＣＥＥ对菜粉蝶、桃蚜的生物活性很强，对斜纹夜蛾和小菜蛾的生物活性较弱。

瑞香狼毒丙酮提取物抗惊厥作用研究

目的 研究瑞香狼毒丙酮提取物 (AESC)抗惊厥作用。方法 采用五种动物惊厥模型 ,测定AESC时效关系 ,抗惊厥效应 ,并分析量效关系。结果 AESC能提高电刺激大鼠皮层惊厥阈值 ,384mg/kg灌胃和 174mg/kg腹腔注射 0 5～ 1h起效 ,2～ 3h达高峰 ,作用持续 7～ 10d ;而丙戊酸镁 15 0mg/kg腹腔注射作用虽强 ,但其维持时间仅 8h。AESC对小鼠听源性惊厥实验 (AS)、最大电休克惊厥实验 (MES)、戊四唑惊厥实验 (MET)均具有剂量依赖性对抗作用 ,其抗AS、MES、MET的ED50 分别为 10 3 0 5、12 3 83和 132 0 1mg/kg。AESC亦能拮抗大鼠海人藻酸惊厥 ,明显减少湿狗样颤抖 (WDS) (P <0 0 5 ) ,有效延长惊厥潜伏期 (P <0 0 5 )。结论 AESC对多种动物惊厥模型有效 ,是一种作用持续时间长 ,抗痫谱广的抗癫痫物质 ,其作用性质与丙戊酸镁相似。

瑞香狼毒水提取物对人肺鳞状细胞癌Survivin表达的影响

目的研究瑞香狼毒水提取物对人肺鳞状细胞癌NCI-H520细胞株的抑制作用及对Survivin表达的影响。方法用不同浓度的瑞香狼毒水提取物处理NCI-H520细胞,分别用MTT法检测肺癌细胞抑制率、半定量RT-PCR检测Sur-vivin mRNA水平以及用Western-blotting检测蛋白水平的表达。结果瑞香狼毒水提取物可显著抑制NCI-H520细胞的生长,随着药物浓度的升高抑制作用逐渐增强。瑞香狼毒作用4 h后细胞内Survivin蛋白的表达水平降低,而SurvivinmRNA的表达变化不明显。结论①瑞香狼毒水提取物可抑制NCI-H520细胞的生长,并具有浓度和时间依赖性;②瑞香狼毒水提取物可降低NCI-H520细胞的Survivin蛋白表达水平,而对mRNA水平无明显影响。

瑞香狼毒水提取物对人膀胱癌T24细胞Survivin表达的影响

目的研究瑞香狼毒水提取物对人膀胱癌T24细胞的抑制作用及生存素(Survivin)表达的影响。方法用不同浓度的瑞香狼毒水提取物处理T24细胞,分别用MTT法检测膀胱癌细胞抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率,免疫细胞化学检测药物作用后细胞中Survivin蛋白的表达。结果瑞香狼毒水提取物干预细胞后,①膀胱癌T24细胞增殖受到抑制,抑制效应呈剂量依赖性并随时间的延长逐渐升高;②瑞香狼毒水提取物可以促进膀胱癌T24细胞的凋亡;③膀胱癌T24细胞中的Survivin蛋白表达下降。结论瑞香狼毒水提取物可以通过下调Survivin蛋白的表达从而抑制膀胱癌T24细胞增殖,促进其凋亡,并具有浓度和时间依赖性。

瑞香狼毒叶提取物对皮肤石膏样毛癣菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用

目的研究瑞香狼毒叶提取物对常见皮肤表面菌的抑菌活性。方法采用药敏纸片法和二倍稀释法测定瑞香狼毒叶提取物对石膏样毛癣菌和金黄色葡萄球菌的抑菌作用。结果瑞香狼毒叶95%乙醇提取物浓度为100 mg·mL-1时对金黄色葡萄球菌抑菌圈直径达12.8 mm,对石膏样毛癣菌抑菌圈直径达12.0 mm,二氯甲烷萃取物对金黄色葡萄球菌最低抑制浓度(MIC)为0.25 mg·mL-1,对石膏样毛癣菌MIC为0.50 mg·mL-1。结论瑞香狼毒叶提取物对石膏样毛癣菌和金黄色葡萄球菌均有抑制活性,其中对金黄色葡萄球菌抑制活性较强。

草药瑞香狼毒丙酮提取物与低剂量卡马西平或丙戊酸镁配伍的抗惊厥研究

目的:探讨草药瑞香狼毒丙酮提取物(AESC)与西药卡马西平(CBZ)、丙戊酸镁(VPM)配伍使用后抗癫痫效果,并与西药单药进行比较。方法:观察AESC和CBZ、VPM不同的配伍方式和剂量,对大鼠癫痫模型、小鼠电休克惊厥模型、小鼠戊四唑惊厥模型和小鼠印防已毒素惊厥模型的作用,并观察AESC对健康自愿受试者CBZ和VPM血药浓度的影响。结果:AESC 500 mg/kg与CBZ 30 mg/kg及VPM 68 mg/kg配伍后对上述三种模型的抗惊厥效应明显优于单用CBZ、VPM组(P<0.01)。结论:采用AESC与小剂量抗惊厥西药CBZ或VPM合理配伍使用可提高抗惊厥效应及减少抗惊厥西药剂量,从而减少西药剂量相关的副作用,具有抗惊厥效应好、抗癎谱广、减少副作用等优点。

瑞香狼毒丙酮提取物抗惊厥谱的实验研究

目的:研究瑞香狼毒丙酮提取物(compounds of extracted by pyruvate from stellera chamaejasme L,CEPSC)抗惊厥作用。方法:采用动物5种惊厥模型,测定 CEPSC 时效关系,抗惊厥效应,并分析量效关系。结果:CEPSC 能提高电刺激大鼠大脑皮层惊厥阈值(TLS),384mg/kg 灌胃给药和174mg/kg 腹腔注射给药0.5～1h 起效,2～3h 达高峰,作用持续7～10天;而丙戊酸镁(VPA)150mg/kg 腹腔注射给药作用虽强,但其维持时间仅8h。CEPSC 对小鼠听源性惊厥(AS)、最大电休克惊厥(MES)、戊四唑惊厥(MS)均具有剂量依赖性对抗作用,其抗 AS、MES、ME 半数有效量(ED_(50))分别为103.05mg/kg,123.83mg/kg 和132.01mg/kg。CEPSC 亦能拮抗大鼠海人藻酸(KA)惊厥,明显减少湿狗样颤抖(WDS)频率(P<0.05),有效延长惊厥潜伏期(P<0.05)。结论:CEPSC 对动物多种惊厥模型有效,是一种作用持续时间长,抗惊厥谱广的具有开发价值的抗癫痫物质,其作用性质与 VPA 相似。

瑞香狼毒根中活性物质的分离鉴定及作用机理

以瑞香狼毒根为研究材料,模式植物拟南芥为受体,采用实验室活体生物实验方法研究了瑞香狼毒根提取物及不同极性溶剂萃取物对7 d龄拟南芥幼苗的生长抑制作用;采用活性跟踪的化合物分离方法,分析了其中的活性化合物成分,并通过拟南芥DR5-GUS转基因株系,研究了单体化合物对拟南芥生长发育及根系生长素分布的影响.结果显示,瑞香狼毒根乙醇提取物对拟南芥有很强的生长抑制作用,其乙酸乙酯和氯仿萃取物的抑制活性最为显著,从氯仿萃取物中分离得到两种香豆素类化合物伞形花内酯(1)和西瑞香素(2),其中化合物1能够显著抑制拟南芥幼苗生长及根系发育,且明显降低了根部内源生长素的分布水平;化合物2也有较为明显的抑制活性.研究表明,氯仿和乙酸乙酯萃取物是瑞香狼毒植物毒活性的主要有效部位;伞形花内酯(1)和西瑞香素(2)是瑞香狼毒植物毒活性的有效成分,化合物1对拟南芥生长发育的抑制作用与生长素途径密切相关.

瑞香狼毒根部提取物对人肺腺癌A549细胞增殖及凋亡作用的影响

目的:探讨瑞香狼毒根部提取物(SCE)对人肺腺癌A549细胞作用和潜在机制。方法:细胞划痕和MTT用以评价和筛选SCE对A549细胞抑制的最佳浓度;激光共聚焦和荧光显微镜分别观察不同浓度SCE作用于A549后线粒体膜电位和染色质变化;Western blot检测p53、MDM2蛋白表达。结果:SCE药物组A549细胞较空白对照组在24、48 h迁移率均显著降低(P<0.01);在1~20μg/mL范围内,随着药物浓度的增加,A549细胞抑制率增强;与空白对照组比较,SCE低、中、高剂量组绿色荧光细胞占比逐渐增加;随着SCE浓度升高,A549细胞荧光增强至白色,染色质凋亡呈碎块状;与空白对照组比较,SCE低、中、高浓度组p53蛋白表达显著上升(P<0.05);与空白对照组和SCE低浓度组比较,SCE中、高浓度组MDM2蛋白表达显著下降(P<0.01)。结论:SCE能够显著抑制肺腺癌A549细胞增殖,其作用机制可能与作用于线粒体膜电位和p53/MDM2负反馈通路有关。

瑞香狼毒通过Nrf2抗三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞多药耐药的研究

该研究将探讨瑞香狼毒提取物(SCL)抑制乳腺癌多药耐药的作用及机制。实验以人三阴性乳腺癌细胞亲本株MDA-MB-231,及其阿霉素耐药细胞株MDA-MB-231/ADR为研究对象,通过噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力;DAPI染色和Annexin-V/Pi凋亡双染检测细胞凋亡,Western blot(WB)检测Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)、核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱天冬酶(caspase)-9、caspase-3的表达水平,免疫荧光染色观察Nrf2细胞内分布,流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)水平。实验结果显示SCL的耐药因子是0.69,对应地,阿霉素和紫杉醇的耐药因子分别是8.40、16.36;DAPI染色结果显示SCL能够导致乳腺癌细胞核皱缩、碎裂;Annexin-V/Pi凋亡双染显示,在中、高剂量SCL的作用下,耐药细胞的平均凋亡率分别为32.64%、50.29%;WB检测结果提示:SCL能够明显降低抗凋亡蛋白Bcl-2、caspase-9和caspase-3表达水平,明显升高促凋亡蛋白Bax表达水平,进一步研究发现,SCL能够显著促进Keap1的表达,并明显抑制Nrf2和HO-1的表达,同时能够明显减少Nrf2的入核表达水平;相应地,流式检测细胞内ROS水平明显升高。综上所述,瑞香狼毒能够显著抑制三阴性乳腺癌MDA-MB-231多药耐药细胞的增殖,引起细胞凋亡,其机制与抑制Keap1/Nrf2信号通路,导致耐药细胞内ROS累积,并增加凋亡相关蛋白的表达有关。