超高压辅助提取甜叶菊中瑞鲍迪苷A工艺及其机理分析的研究

通过超高压辅助提取甜叶菊中瑞鲍迪苷A工艺的寻优试验,以瑞鲍迪苷A得率为响应值,考查液料比、提取压力和保压时间三个因素对瑞鲍迪苷A得率的影响。试验结果表明,在16.8∶1mL/g液料比、429.5MPa提取压力和7.7min的保压时间下,瑞鲍迪苷A的得率达到35.2mg/g。超高压辅助提取改变了甜叶菊粉内部的微组织结构,表面的孔隙变得更大更多,组织结构变得更加疏松,从而强化了瑞鲍迪苷A的润湿、溶解和扩散的传质过程。

HPLC法快速测定甜叶菊中瑞鲍迪苷A

建立以甜叶菊叶片为原料,采用超声萃取法用体积浓度70%的乙醇对瑞鲍迪苷A进行提取,使用高效液相色谱仪检测甜叶菊样品液中瑞鲍迪苷A含量的方法。采用-NH2基柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈与水体积比80∶20,流速1.2 m L/min,紫外检测波长210 nm,进样量15μL。甜叶菊中瑞鲍迪苷A分别在纯水、体积浓度70%乙醇、80%乙腈中提取得率为10.25 mg/g、11.52 mg/g、13.49 mg/g,范围内线性关系良好相关系数R2=0.999 9。采用体积浓度70%乙醇对瑞鲍迪苷A进行提取,此方法安全有效、操作简单、定量准确。

高效液相色谱法同时测定奶昔粉中的安赛蜜和瑞鲍迪苷A

目的建立高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)同时快速检测奶昔粉中安赛蜜和瑞鲍迪苷A含量的分析方法。方法样品用水溶解稀释,加入沉淀剂,离心过滤得样品供试液。采用C18色谱柱,以硫酸铵溶液:乙腈:甲醇=65:30:5(V:V:V)作为流动相,检测波长为210nm,流速0.6mL/min,进行检测,外标法定量。结果本方法在20min内完成2种目标化合物的分离分析。试样中安赛蜜浓度在0.0040~0.0403 mg/mL的范围内与峰面积的线性关系良好,相关系数r>0.999,在3水平不同浓度安赛蜜标准溶液添加下,安赛蜜的回收率为98.58%。试样中瑞鲍迪苷A浓度在0.0028~0.0283mg/mL的范围内与峰面积的线性关系良好,相关系数r>0.999。在3水平不同浓度瑞鲍迪苷A标准溶液添加下,瑞鲍迪苷A的回收率为99.04%。均符合标准GB/T27404-2008《实验室质量控制规范食品理化检测》中的要求,且目标峰分离效果更好,效率提升49.5%。结论该方法快速、准确、灵敏,适合同时测定奶昔粉中安赛蜜和瑞鲍迪苷A含量。

两种天然甜味剂甜菊苷和瑞鲍迪苷A在不同溶剂中的溶解度测定

用高效液相色谱(HPLC)法测定了两种天然甜味剂甜菊苷和瑞鲍迪苷A在不同纯溶剂中的固液平衡数据,温度范围为288.15~328.15 K。从实验数据知,所有研究的体系的溶解度均随温度的升高而增大。实验数据用三参数方程和NRTL模型拟合,拟合结果显示,两种模型均有好的拟合结果。由得到的溶解度数据,可指导甜菊苷与瑞鲍迪苷A的分离及结晶纯化溶剂的选择。

甜叶菊中甜菊苷与瑞鲍迪苷A含量测定方法研究

采用反相高效液相色谱法测定甜叶菊中甜菊苷和瑞鲍迪苷A含量,研究测定方法的精密度、线性关系、重复性、稳定性、准确度。研究结果显示,甜菊苷和瑞鲍迪苷A在0.25~2.50 mg/m L范围内与峰面积呈较好的线性相关关系;甜菊苷和瑞鲍迪苷A的加样回收率分别为97.3%和98.6%,RSD分别为2.4%和2.6%。本测定方法快速灵敏、准确可靠,可用于甜叶菊中甜菊苷和瑞鲍迪苷A的质量控制。

高效液相色谱法测定发酵乳中甜菊糖苷

通过优化色谱条件和样品前处理条件,建立测定发酵乳中甜菊糖苷(包括甜菊苷、瑞鲍迪苷A、瑞鲍迪苷B、瑞鲍迪苷C、瑞鲍迪苷F、杜克苷A、甜茶苷及甜菊双糖苷)的高效液相色谱法,并进行方法学验证。用水提取发酵乳中甜菊糖苷,45℃水浴超声提取20 min,再加入30%的乙腈继续在45℃水浴超声提取10 min,亚铁氰化钾-乙酸锌沉淀剂沉淀蛋白,C18柱分离,磷酸钠缓冲液和乙腈梯度洗脱,紫外检测器在210 nm波长处检测。结果表明:本方法在1~50μg/mL质量浓度范围内有较好的线性关系,方法检出限(RS/N=3)为3.0 mg/kg,定量限(RS/N=10)为10.0 mg/kg;当甜菊糖苷的添加量在15~200 mg/kg时,加标回收率为92.0%~103.1%,相对标准偏差小于3.0%。该方法具有快速、准确、稳定性好、灵敏度高等优点,可用于发酵乳中甜菊糖苷含量的检测。

β-环糊精葡萄糖基转移酶的固定化及其酶学性质

采用吸附-交联法对β-环糊精葡萄糖基转移酶(β-cyclodextrin glycosyltranserase,β-CGTase)进行固定化,对吸附载体进行了比较和筛选,优化了交联条件,并对固定化后酶的催化特性进行了初步分析。研究表明阴离子交换树脂D380对β-CGTase的吸附性较好;固定化的最佳条件为:戊二醛浓度0.02%、pH 8.0、4℃和固定化8 h,固定化后β-CGTase的酶活可达842 U/g。固定化β-CGTase的热稳定性显著提高,具有良好的操作稳定性;与游离态相比,固定化β-CGTase催化瑞鲍迪苷A形成的产物较少,显现出更佳的催化特异性。

高效液相色谱法测定甜叶菊中的3个甜菊醇糖苷的含量

目的：建立高效液相色谱法分析甜叶菊中3个甜菊醇糖苷含量。方法：采用Poroshell 120 EC—C18色谱柱（4．6mm×150mm，2．7μm），以乙腈-磷酸水溶液（30：70）为流动相进行分离，在紫外检测波长210nm下进行检测，外标法定量。结果：3个甜菊醇糖苷的检出限为1．0—1．2mg·kg^-1，定量限为2．5—3．0mg·kg^-1；在50～1000mg·L^-1的浓度范围内线性良好，相关系数为0．9999—1．000；瑞鲍迪苷A、瑞鲍迪苷C和甜菊苷的加标回收率分别为92．8％、87．2％、90．3％，RSD分别为3．9％、2．7％、4．8％；精密度的RSD分别为1．2％、2．1％、1．3％；重复性的RSD分别为3．3％、6．4％和4．7％。结论：本方法操作简便，快速，分离度和准确度高，可用于甜叶菊原料的质量控制。