瑟氏泰勒虫病诊断技术的研究进展

瑟氏泰勒虫病是牛的1种血液原虫病.呈世界性分布,多发生于东亚地区,疫区内的发病率和致死率均较高,给畜牧业带来了巨大的经济损失.本文对瑟氏泰勒虫病诊断技术的研究进展进行了概述,以求为从事本病研究的科研工作者提供参考.

贝尼尔缓释剂的研制及其对牛瑟氏泰勒虫病的防治效果

选用β－环糊精制备了贝尼尔缓释剂。该制剂为细颗粒状悬浮液，颗粒大小为０．２～０．４μｍ，分布均匀，粘度小，流动性好，稳定性较好，便于肌肉注射。通过兔、牛体内的免疫学测定，证明该缓释剂的药物释放时间比对照水剂延长０．８～１倍。贝尼尔缓释剂对瑟氏泰勒虫感染的预防试验结果表明，按每公斤体重５ｍｇ的剂量一次肌注，无论对本地牛还是外地引进牛，在２个月的保护率均达１００％，染虫率仅为０．１％～１％，呈现一定水平的带虫现象，而对照贝尼尔水剂组的保护期仅为２０ｄ。在牛瑟氏泰勒虫病的早期（１０ｄ以内）使用该缓释剂进行治疗，治愈率可达１００％，区域试验结果也证明了这一点，但剂量要适当加大，按每公斤体重用药７～１０ｍｇ。

牛瑟氏泰勒虫病PCR诊断方法的建立

为建立特异、敏感、快速的诊断方法,根据本实验室已测得的瑟氏泰勒虫P33表面蛋白基因序列,设计一对特异性引物,扩增出大小为499 bp的基因片断,经克隆、测序分析,与已知基因序列同源性为100%。用该对引物建立的牛瑟氏泰勒虫病PCR诊断方法,通过对75份牛血液样本检测,检出率为72%(54/75)。该方法具有特异性好、敏感性强等优点,可用于牛瑟氏泰勒虫病的诊断和流行病学调查。

以P33重组蛋白为诊断抗原建立牛瑟氏泰勒虫病乳胶凝集试验

本试验用P33重组蛋白建立了牛瑟氏泰勒虫病乳胶凝集试验。对81份被检血清的检测结果,阳性率为44.4%,明显高于血涂片镜检法的21.0%(P<0.01),而且在该病流行地区的不同牧场、不同性别和不同年龄牛的阳性率之间未见显著差异。试验表明,以P33重组蛋白作为诊断抗原具有特异性强、抗原易纯化和成本低等优点。

牛瑟氏泰勒虫实验动物模型的研究

利用严重联合免疫缺陷 (SCID)鼠不能产生特异性免疫应答特性 ,用健康牛红细胞通过反复输血法置换SCID鼠体内的红细胞 ,再接种瑟氏泰勒虫 ,并定期给感染鼠输入健康牛红细胞。SCID鼠体内被置换的红细胞最高可达 90 %左右 ;瑟氏泰勒虫在SCID鼠体内能迅速增殖 ,在感染的第 1 0天前后 ,末梢血液中红细胞的染虫率高达 2 3 %左右。从SCID鼠末梢血液中能检出虫体的期限为 2 5～ 30d;感染鼠表现的临诊症状与感染牛的临诊症状相似。从而成功地建立了瑟氏泰勒虫的实验动物模型。

奶牛瑟氏泰勒虫病诊断和综合防制的研究

从青岛市崂山区宁韩镇的奶牛分离获得瑟氏泰勒虫中韩珠,进而建立了诊断奶牛瑟氏泰勒虫病的间接免疫荧光试验;对青岛地区奶牛瑟氏泰勒虫病进行了流行病学调查、综合防制试点及推广工作,取得了显著效果。

瑟氏泰勒虫与环形泰勒虫某些特性的比较研究

通过长角血蜱和残缘璃眼蜱的交互传递试验、虫体形态学观察及过氧化物酶等同工酶的分析，对瑟氏泰勒虫及环形泰勒虫作了比较研究。结果表明，长角血蜱只能传播瑟氏泰勒虫而不能传播环形泰勒虫；同样，残缘璃眼蜱只能传播环形泰勒虫而不能传播瑟氏泰勒虫。瑟氏泰勒虫以杆形和梨子形为主，其比例一般保持在６７％～９０％之间；而环形泰勒虫则主要以圆环形和卵圆形为主，占总数的７０％～８５％。经聚丙烯酰胺凝胶电泳法分析表明，这两个种的过氧化物酶同工酶均有两条带，但瑟氏泰勒虫的迁移速度要比环形泰勒虫的明显的快。

间接免疫荧光抗体试验检测瑟氏泰勒焦虫病的研究

用从青岛奶牛中分离的瑟氏泰勒焦虫株建立了间接荧光技体试验（IFA），人工感染牛7天后即可检出血清抗体，30天左右阳性反应较强，康复后一年仍为阳性反应，阳性检出率比查虫法高，与异种焦虫及其他血原虫血清光明显交叉反应。

贝尼尔缓释剂的研制及对牛瑟氏泰勒虫病防治效果的研究

本试验首次用β-环糊精制备了贝尼尔缓释剂,并用于牛瑟氏泰勒虫病的防治上。首次制备兔抗贝尼尔血清,用免疫学方法检测贝尼尔在动物体内的消长情况.免疫学检测结果表明,该缓释剂的缓释效果比水剂组约延长1倍;本地牛按3mg·kg^(-1)体重剂量,外地牛按5mg·kg^(-1)体重剂量,进行肌肉注射,预防效果达100%.

牛瑟氏泰勒虫病致病机理的研究进展

牛瑟氏泰勒虫病是由蜱传染的一种血液原虫病。近年来,随着养牛业的发展,牛瑟氏泰勒虫病的发生呈上升趋势,尤其是引进牛和改良牛的发病率和致死率均较高,给养牛业带来了巨大的经济损失。本文对近年来牛瑟氏泰勒虫病的病原体、流行病学、病理学和致病作用等与此病的致病机理相关的方面的研究进展作一总结,以便广大兽医工作者对此病有更加深入的认识。

咪唑苯脲和磷酸伯氨喹对牛瑟氏泰勒虫病的疗效评价

牛瑟氏泰勒虫病是由泰勒属的瑟氏泰勒虫(Theileria sergenti)引起的一种蜱传性血液原虫病,在我国云南、贵州、广东、江苏、河南、陕西、甘肃、河北、辽宁、吉林、青海等省均有发现。但不同地区报道的病原的致病性有所不同。韩风光等(1980)报告在辽宁省辽阳地区发病严重,引起奶牛死亡;

不同地区牛瑟氏泰勒虫主要抗原32k蛋白编码基因酶谱分型

提取日本和澳大利亚等不同地区牛红细胞感染瑟氏泰勒虫的ＤＮＡ，利用其主要表面抗原３２ｋ蛋白编码基因的５’和３’端附近序列合成一对引物，经ＰＣＲ方法扩增出约９００ｂｐ大小的基因片段，连接入ｐＢＲ３２２质粒中，转出入大肠杆菌ＪＭ１０９中，经四环素及氨苄青霉素培养筛选出２０～３０个克隆，再用ＰＣＲ方法扩增出每个克隆的靶基因，经ＨｉｎｄⅢ，ＢｇＩＩ和ＫｐｎⅡ限制性内切酶消化后电泳，可分出１型、２型和３型不同酶谱电泳型，且证明不同地区牛感染此原虫的类型不同。

防治牛瑟氏泰勒虫病的药物筛选试验

近年来珲春市连年发生牛瑟氏泰勒虫病,其发病率、死亡率高,对畜牧业危害程度不亚于某些恶性传染病,尤其对改良的新品种、外地引进的牛威胁更为严重。国内对治疗牛环形泰勒虫病的药物研究较多,药物不下20余种,国外使用的药物种类更多。然而,人们忽视了防治牛瑟氏泰勒虫病药物的研究或重视不够。截至目前,对于本病尚无一种公认的特效药物。虽然磷酸伯氨喹对牛瑟氏泰勒虫病有较好的疗效。

三株牛瑟氏泰勒虫P32表面蛋白基因的克隆与序列分析

为分析我国分离的3株牛瑟氏泰勒虫P32基因序列,根据GenBank上登录的牛瑟氏泰勒虫P32表面蛋白基因序列设计合成1对引物,用PCR方法分别扩增出牛瑟氏泰勒虫辽阳株、宁县株和汶川株的P32基因片段,并成功地将该基因纯化后克隆到pGEM-T Easy载体上,将经PCR鉴定和EcoRⅠ酶切鉴定为阳性的重组质粒进行测序。结果表明,克隆的这3株牛瑟氏泰勒虫P32基因片段长度均为875 bp,编码283个氨基酸。核苷酸同源性分析表明,该基因辽阳株与宁县株的同源性最高,为99.4%,汶川株与这2株的同源性分别是92.1%和91.9%,而我国辽阳株与日本株(AB016280)、俄罗斯株(AB016279)的同源性较高,分别为99.8%和99.6%。

奶牛附红细胞体和瑟氏泰勒虫混合感染的诊疗

附红细胞体病(Eperythmzoonosis)是由专性血液寄生物附红细胞体(Eperythrozoon)引起的一种人畜共患的血液传染病。寄生于人、动物红细胞表面、血浆及骨髓内,主要临床症状为贫血、黄疸、发热等。瑟氏泰勒虫病是由长角血蜱传播的牛血液原虫病。临床上表现为体温升高,精神不振,食欲减退,贫血和体表淋巴结肿胀等。该病呈世界性分布,多发生于东亚地区,疫区内的发病率和致死率均较高,给畜牧业带来了巨大的经济损失。本文通过血涂片镜检及姬姆萨氏染色等方法,确诊一例奶牛附红细胞体和瑟氏泰勒虫混合感染病例,运用土霉素、贝尼尔等药物对该病进行治疗,收到较理想的效果,可为临床防治该病提供参考依据。