琼枝白化特征及其附生菌群多样性分析

2021-2022年,海南昌江养殖的琼枝(Betaphycus gelatinae)白化现象频发,造成了一定的经济损失,影响了海洋生态环境。为探究白化琼枝的特征和附生菌群落结构的差异,本研究分析了不同状态琼枝的形态差异;测定了色素含量、光合生理、生理生化等指标;分离、鉴定了不同状态琼枝表面的可培养附生细菌,同时采用16S rRNA高通量测序技术分析了健康琼枝(BgR)和白化琼枝(BgW)表面附生细菌的α多样性、β多样性以及菌群群落结构组成。研究显示,白化琼枝藻体的皮层组织结构遭到破坏,色素含量、最大光合效率(QY_max)显著降低,活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、脯氨酸(Pro)含量显著降低(p<0.05);BgW的可培养附生细菌数量(2.76×10^(7) cfu/g)显著高于BgR(3.3×10^(4) cfu/g),BgR中可培养附生细菌优势菌为鲁杰氏菌属(Ruegeria),BgW中为Yoonia属;高通量测序结果显示,两组样品附生菌群的α多样性指数无显著差异,但BgW的Ace、Chao、Simpson指数均有所升高,相似性分析(ANOSIM)表明,BgR和BgW表面附生菌群之间存在显著差异,比对注释结果共识别出253个OTUs,无色杆菌属(Achromobacter)、琼脂小杆菌属(Agaribacterium)、Hirschia属、Mesoflavibacter属和Aquimarina属是BgR和BgW之间相对丰度差异最显著的细菌类群(p<0.001);BgR的优势菌群为无色杆菌属,BgW的优势菌群为琼脂小杆菌属。本研究首次报道了白化琼枝的特征及表面附生菌群的变化,为进一步探究琼枝白化的原因奠定了基础。

切段部位、长度和培养温度对琼枝藻繁殖的影响

为了探究琼枝藻(Betaphycus gelatinae)组织切段培养的适宜条件,以琼枝藻为材料,研究不同切段部位(茎尖、分枝中部和主干)和切段长度(5、10、15 mm)的外植体切段在不同培养温度(21、24、27、30、33℃)下的出芽和生长。不同切段部位和切段长度的成活率和出芽率均达100%。不同切段部位出芽数由大到小依次为主干、分枝中部和茎尖;茎尖以伸长生长为主,主干和分枝中部则以上端切面膨大发芽为主;芽体形成于上端切面皮层,下端切面无芽体生成,表现出明显的极性。不同切段长度出芽数由大到小依次为15 mm组、10 mm组和5 mm组,15 mm组的个体出芽数分别为茎尖(5.90±0.67)个、分枝中部(10.16±1.14)个、主干(11.90±0.88)个;5 mm组出芽密度最高。琼枝藻切段培养适宜的生长温度为(21~27)℃,在此范围内,成活率和出芽率均为100%,且出芽数随温度的升高而增加;超过27℃,藻体切段的成活率和出芽率均下降。研究结果表明,琼枝藻最适组织切段培养部位为主干,长度为15 mm,培养温度为27℃。

琼枝麒麟菜多糖的分离纯化、结构表征及降血糖活性

为研究琼枝麒麟菜(Eucheuma gelatinae)多糖的结构及其粗多糖和纯化组分的降血糖活性,以超声波辅助酶法提取的琼枝麒麟菜粗多糖为原料,采用DEAE-52离子柱纯化、PMP衍生,用HPLC法测定各组分单糖组成。结果表明:琼枝麒麟菜粗多糖(EGP)和纯化组分(EGP-1、EGP-2、EGP-3)均为吡喃型硫酸多糖,主要由甘露糖(Man)、葡萄糖(Glc)、半乳糖(Gal)、木糖(Xly)和阿拉伯糖(Ara)5种单糖组成;与EGP相比,纯化多糖的蛋白质含量显著降低(P<0.05),EGP-2和EGP-3的糖醛酸和硫酸根含量显著提高(P<0.05);EGP和EGP-1有三螺旋结构,EGP-2和EGP-3无三螺旋结构;多糖的体外降血糖活性显示,4种多糖均能有效抑制α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的活性,且呈剂量依赖性,其中EGP-3的降血糖效果最优。研究表明,与EGP相比,3种纯化组分的相对分子质量均有所降低,且表现出更强的降血糖活性。

耐高光琼枝突变体XY-01的选育及生产性能评价

为改善琼枝(Betaphycus gelatinus)养殖时受高光胁迫导致产量及品质下降的状况,对海区内初步筛选的潜在耐高光藻株进行高光筛选及分离纯化,经继代培养获得一株性状稳定的耐高光突变株琼枝XY-01,并对其进行生产性能评价。结果表明:与野生型琼枝(WT)相比,XY-01藻体呈绿色,藻枝饱满、舒展,高光胁迫表型不明显;在水温为26℃、光量子通量密度为60μmol/(m^(2)·s)条件下,XY-01的叶绿素a、类胡萝卜素和藻蓝蛋白含量均高于WT,但藻红蛋白含量极显著低于WT(P<0.01);XY-01的最适生长光量子通量密度为250μmol/(m^(2)·s),在此条件下,XY-01与WT光系统Ⅱ(photo-systemⅡ,PSⅡ)的最大光化学转换效率分别为(0.635±0.019)、(0.484±0.055)且二者有极显著性差异(P<0.01),XY-01与WT的增重率分别为57.00%±3.50%、39.00%±4.28%(P<0.05),特定生长率分别为(1.61±0.09)、(1.18±0.06)%/d(P<0.05);海区养殖试验显示,XY-01在4月中旬—5月中旬特定生长率达(3.63±0.08)%/d,但WT仅为(2.63±0.37)%/d,XY-01与WT的卡拉胶含量无显著性差异(P>0.05)。研究表明,通过高光选育首次获得一株性状稳定的耐高光琼枝XY-01,为耐高光琼枝种质资源开发提供了科学参考。

超声波辅助盐酸水解提取琼枝麒麟菜卡拉胶工艺优化

本文以琼枝麒麟菜(Betaphycus gelatinum)为原料,以粘度、硫酸基含量、平均聚合度加权分析结果为指标,优化超声辅助温和盐酸水解提取琼枝麒麟菜卡拉胶工艺,并测定最佳工艺下提取的琼枝麒麟菜卡拉胶红外光谱、分子量分布等理化特性和抗氧化活性.结果表明,超声辅助温和盐酸水解的最佳条件为:液料比40 mL·g^(-1)、盐酸最终体积分数为0.8%、超声温度75℃、超声时间10 min、超声功率612 W.在该条件下制备的样品,粘度为(1866.84±10.34)mPa·s,平均聚合度为(3.52±0.10),硫酸基含量为(0.42±0.01)mg·g^(-1),红外光谱表明其糖苷键断裂及硫酸基团脱落,凝胶渗透色谱表明其包含3个组分(分子量分别为18.0、3.4、0.7 kDa),其2-联苯基-1-苦基腈基(2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl,DPPH)清除率和2,2′-联氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(2,2′-azino-bis(3ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS)清除率的IC50分别为6.98、5.20 g·L^(-1).超声辅助温和盐酸水解可以有效水解琼枝麒麟菜卡拉胶,为后续低分子量琼枝麒麟菜卡拉胶纯化、改性、活性评价及应用提供基础理论.

论女性对自由的追求——以沈琼枝和嘉尔曼为例

吴敬梓笔下的《儒林外史》以现实主义为底色,塑造了许多性格不同的人物,其中沈琼枝是主要的女性形象之一。梅里美是19世纪法国著名的批判现实主义作家。他笔下描绘出了众多充满异域风情的女性人物,其中嘉尔曼就是一个典型代表。分析沈琼枝和嘉尔曼这两个经典的女性形象,描述两位女性在特殊生存下追寻自由的共同实质,探寻在当时男权社会下两位女性对自由追求产生的表现和原因具有着重要意义。

琼枝麒麟菜和异枝麒麟菜硫酸多糖及其水解产物的抑菌作用

目的 :探讨琼枝麒麟菜 (Eucheumagelatinae)和异枝麒麟菜 (Eucheumastriatum)硫酸多糖的KCl分级产物 ,以及其经HCl水解的不同程度的水解产物对大肠埃希氏菌等 8种细菌的抑菌作用 ,研究抗菌活性与样品化学组成的关系 .方法 :用肉汤稀释法测定不同样品对不同菌株的最低抑菌浓度 (MIC) ;用明胶 -BaCl2 法测定硫酸基含量 ;用红外光谱初步分析琼枝和异枝麒麟菜硫酸多糖及其水解产物化学组成的差异 .结果 :未水解的琼枝和异枝麒麟菜硫酸多糖均无抑菌活性 ;琼枝和异枝麒麟菜硫酸多糖的抑菌谱范围随着水解程度增加而增大 ;异枝麒麟菜硫酸多糖部分水解的水解产物的抑菌谱范围比琼枝麒麟菜硫酸多糖部分水解的水解产物广 .结论

温度对琼枝麒麟菜生长及色素含量的影响

为进一步提高海南琼枝麒麟菜(Betaphycus gelatinum)产量,本研究主要探讨了温度对琼枝麒麟菜生长及色素含量的影响。结果表明,温度对琼枝麒麟菜生长的影响比较明显,27℃时琼枝麒麟菜生长最快,随着温度的升高或者降低,琼枝麒麟菜生长率均降低,长期低于18℃或者高于36℃会造成琼枝麒麟菜的死亡。在27℃时琼枝麒麟菜含水量最低,干物质积累最快,即光合作用率最大。不同温度下琼枝麒麟菜色素含量与生长率变化趋势基本一致,其藻胆蛋白含量远远大于叶绿素含量。

红藻琼枝麒麟菜中凝集素的提取、纯化及其性质研究

目的 从琼枝麒麟菜中分离纯化凝集素 ,并测定其生物活性。方法 采用缓冲液低温提取、4 0 %～ 90 %(NH4) 2 SO4分级盐析沉淀、SephadexG - 75凝胶过滤层析进行纯化 ;SDS -PAGE检测其纯度和测定分子量 ;考察该凝集素凝血活性的血型专一性 ,糖抑制性及高温、酸、碱处理下的稳定性。结果 琼枝麒麟菜中有凝集素 ,分子量为2 90 0 0。该凝集素对人A、B、O和AB 4种类型血细胞均显凝血活性 ,该活性对高温、酸、碱处理有较好的稳定性。结论 琼枝麒麟菜中存在凝集素 。

海洋环境因子对琼枝麒麟菜形态特征的影响

为探讨环境因子对麒麟菜形态特征的影响,结合海洋环境因子对海南岛琼枝麒麟菜的形态特征进行了聚类分析。结果表明,随着水的深度的增加,温度、盐度、透明度、溶解氧逐渐增大,pH逐渐降低,流速逐渐减小,N、P、COD逐渐减小。琼枝麒麟菜在潮间带水越深的区域养殖越好,随着水深的增加,琼枝麒麟菜的颜色逐渐变红,分枝和齿数逐渐变多,卷曲程度逐渐变小。在水文物理环境、水环境化学方面,均是低潮区下部比低潮区上部好,对比形态特征得到的也是低潮区下部琼枝麒麟菜的颜色最深,分枝和齿数最多,而且卷曲度最小。

琼枝野生群体与养殖群体的EST-SSR分析

为研究野生琼枝与养殖琼枝的遗传差异,利用EST-SSR技术分析了海南东北部地区9株野生和9株养殖琼枝的遗传差异性。结果显示,用5对EST-SSR引物对18个个体的基因组进行扩增,扩增出的片段大小为250～2 500 bp,琼枝野生群体和养殖群体的多态性比例分别为74.29%和70.00%;野生群体之间的平均遗传距离为0.46,养殖琼枝群体之间的平均遗传距离为0.22。聚类分析图显示,在相似系数0.49处,18株群体按野生与养殖分为2大类,在相似系数0.66附近,野生群体分成3类,养殖琼枝群体分为2类,在相似系数0.73附近,野生琼枝群体分成5类,而养殖群体为3类,相似系数越高,野生群体比养殖群体分类单元越多。研究表明,野生琼枝群体的遗传多样性比养殖琼枝群体高。

琼枝和异枝麒麟菜中硫酸酯基多糖不同提取方法的化学分析比较

采用"直接水提法"以及"KCl分级法"来提取琼枝和异枝麒麟菜中的多糖.分别用蒽酮-硫酸法、间苯二酚法、明胶-BaCl2分光光度法测定多糖样品的总糖质量分数、3,6-内醚半乳糖质量分数、总硫酸基质量分数;用凝胶色谱法测定各多糖样品的相对分子质量分布情况;用GC-MS测定麒麟菜硫酸酯基多糖的单糖种类及含量.结果显示采用"直接水提法"以及"KCl分级法"比传统的"碱处理法"产率高,而且硫酸基质量分数也明显增高.两种麒麟菜多糖均为硫酸酯基多糖,大部分都属于κ-卡拉胶类.各多糖样品的相对分子质量分布在105左右.麒麟菜多糖主要是由半乳糖和3,6-内醚半乳糖组成,此外还含有少量的葡萄糖、木糖、塔罗糖和艾杜糖等,不同方法提取的多糖样品其单糖种类基本一致.

琼枝麒麟菜多糖对γ射线照射小鼠脾细胞周期及细胞增殖的影响

目的探讨γ射线对小鼠脾细胞周期及增殖的影响,从细胞水平探讨琼枝麒麟菜多糖(EGP)的抗辐射作用。方法将50只小鼠随机分为正常对照组、模型组和3个不同剂量EGP实验组,灌胃10d后行一次性γ射线辐射,每只2Gy,20h后流式细胞仪检测脾细胞周期百分率及脾细胞对刀豆蛋白及脂多糖的增殖反应。结果小鼠经2Gyγ射线照射后,与正常对照组比较,G0/G1期脾细胞百分数明显增加(P<0.01),而S期和(M+G2)期脾细胞百分数明显减少(P<0.01);与模型组比较,EGP实验组能使受照小鼠脾细胞S、G2+M期的比例升高(P<0.01);脾细胞对刀豆蛋白及脂多糖的增殖反应均较模型组明显增强(P<0.05)。结论EGP对辐射损伤小鼠脾细胞具有一定的保护作用。

海水相对密度对琼枝麒麟菜的生长及其卡拉胶、色素含量的影响

探讨了海水相对密度对琼枝麒麟菜(Betaphycus gelatinum)生长及其色素含量的影响规律。结果表明,海水相对密度为1.016～1.030时,琼枝麒麟菜均可生存,海水相对密度为1.018～1.024时,琼枝麒麟菜生长良好,海水相对密度为1.022时,日生长率高达4.6%,海水相对密度为1.024时,琼枝麒麟菜卡拉胶含量最高,达到64.2%;海水相对密度分别为1.026,1.024,1.022,1.02时,叶绿素a、藻胆蛋白藻蓝素(PC)、藻红素(PE)、别藻蓝素(APC)含量分别达到最大值。

光照强度对琼枝麒麟菜生长及色素含量的影响

为了进一步提高琼枝麒麟菜的养殖产量,研究探讨了不同光照强度对琼枝麒麟菜生长及其色素含量的影响。琼枝麒麟菜对光照强度适应范围比较广,在光照强度500～11000lx均可生长。当光照强度在2000～3000lx时,琼枝麒麟菜的日生长率为1.5%,叶绿素浓度95.5μg/g,为最大。随着光照强度的增加,藻蓝蛋白(PC),别藻蓝蛋白(APC)和藻红蛋白(PE)的浓度分别下降;琼枝麒麟菜表面颜色也会逐渐发生改变,由棕红色变成黄绿色。光照强度对琼枝麒麟菜生长率和色素含量有很大的影响。

基于EST-SSR不同地理的琼枝群体遗传差异研究

为研究不同海域的琼枝群体的遗传差异,试验对海南麒麟菜保护区内4个地点的琼枝群体进行了遗传差异分析。结果表明：所用的5对EST-SSR引物能扩增获得多态性条带,检测出的观察等位基因数平均为3.4个,有效等位基因数平均为2.006个;琼枝群体的平均基因杂合度（Ave_Het）为0.4891,总体期望杂合度（Exp_Het＊）为0.5320,观察杂合度（Obs_Het）平均值为0.6233;Shannon＇s信息指数在0.6638~0.9896之间;遗传分化显示有20.39%的遗传变异存在于群体之间,79.61%的遗传变异存在于群体之内。上述结果表明麒麟菜保护区内的琼枝群体存在差异。

藻场海水氮磷含量对琼枝氮磷吸收的影响

通过测定不同海区海水的无机氮、无机磷含量和琼枝体内的氮磷含量,利用SPSS19统计软件,研究了藻场海水氮磷含量对琼枝氮磷吸收的影响。结果表明:藻场海水氮含量与琼枝氮含量呈正相关,其回归方程为:y=0.0533x-0.003,R^2=0.9225,P<0.05;藻场海水磷含量与琼枝磷含量呈显著正相关,其回归方程为:y=2.9663x+0.0229,R^2=0.8462,且P<0.05。设计不同无机氮、无机磷浓度梯度的海水培养琼枝,进一步研究琼枝对无机氮、磷的吸收率的变化,结果表明,琼枝对无机氮的吸收速率随着氮浓度的升高而增大,但无机氮浓度在大于40μmol·L^(-1)时,随着无机氮浓度的增加,琼枝对海水中的无机氮吸收率反而下降。琼枝对无机磷酸盐的吸收随着磷离子浓度的升高而增大,当浓度达到1.5μmol·L^(-1)时,增大趋势变得平缓。琼枝对海水内的无机氮离子具有选择性吸收的特点,在相同的浓度下,琼枝优先吸收NH_4-N,其次是NO_3-N和NO_2-N。通过测定海南海域琼枝体内氮磷质量分数,研究了琼枝对海水氮磷去除能力,结果表明,藻场中每1 000 t琼枝可去除15.33 t氮,73.33 t磷。

琼枝麒麟菜水泥框网片养殖技术与效益分析

总结了海南昌江海尾地区用水泥框网片养殖麒麟菜的技术,并分析了其养殖经济效益。总成本投入为5620元/亩(15亩=1 hm^2,下同),总净利润18140元/亩,盈亏平衡点产量86 kg/亩;生产经营安全率为88.1%;生产费用产出率为17.8%;成本利润率为291.5%。综合以上指标,采用水泥框网片养殖麒麟菜技术具有投入少、产量高、利润大、风险小等特点,其养殖模式值得大力推广。

论《儒林外史》中沈琼枝的形象塑造

长篇讽刺小说《儒林外史》除塑造众多男性形象外,还有各色女性形象,其中沈琼枝以其形象独特性在明清小说的女性群体中绽放着别样的光辉。沈琼枝具有敢于反抗、不慕豪奢、追求自由独立等性格特点。吴敬梓借沈琼枝形象意在批判士人醉心于科举、追求功名富贵以至于丧失独立自主精神与生存能力,变成封建科制度下的奴隶。吴敬梓之所以能成功塑造沈琼枝的形象,是与他先进的女性观、明末清初时极具启蒙性的时代思潮与文化氛围浓厚的江南地域风教有关。

琼枝多糖凝胶的结构和性质

本文研究琼枝多糖凝胶的结构和性质。大多数碱金属盐、碱土金属盐和含二个氨基以上的化合物能够改良这种带负电荷的多糖凝胶的性能。从扫描电子显微镜研究各种凝胶的结果看出,琼枝多糖象绞合的纤维束同方向地聚集;琼枝多糖-KCl凝胶象疏松绞合着的纤维束同方向聚集;琼枝多糖-乙二胺凝胶象多锁链同方向聚集;琼枝多糖-明胶凝胶却象海绵一样网状聚集。根据试验结果,作者对琼枝多糖形成凝胶的机理进行了推断。