液态芯片技术分析RA患者血清免疫复合物对滑膜细胞分泌细胞因子的影响

目的用液态芯片技术研究类风湿关节炎(RA)患者血清免疫复合物(IC)对关节成纤维样滑膜细胞(FLS)分泌细胞因子的影响。方法用聚乙二醇(PEG)沉淀法分别提取10份抗环瓜氨酸肽抗体(ACCP)阳性的RA患者及健康人对照血清IC,间接ELISA法测定IC中ACCP特异性IC水平。体外培养RA患者关节FLS,分别用RA患者ACCP-IC阳性IC(ACCP+-IC)、ACCP-IC阴性IC(ACCP--IC)及健康人对照血清IC(C-IC)刺激FLS,培养24 h后,用液态芯片技术检测不同来源IC刺激对FLS分泌IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8、IL-10、IL-15、IL-17、TNF-α、GM-CSF、EGF、VEGF等11种细胞因子水平的影响。结果 10份RA患者血清中提取的IC,包括ACCP+-IC 6份和ACCP--IC 4份,刺激FLS 24 h后,可诱导细胞分泌大量IL-6、IL-8和GM-CSF;其中ACCP+-IC组刺激FLS分泌GM-CSF和IL-8水平均显著高于ACCP--IC组。3组刺激物组刺激分泌IL-1β、IL-2、IL-10、IL-15、IL-17、TNF-α、EGF、VEGF等其他8种细胞因子含量均无显著性差异。结论 ACCP+-IC具备更强的促FLS分泌GM-CSF、IL-6和IL-8的活性。

类风湿性关节炎患者血清RA-CP,抗CCP抗体及RF检测对RA的实验诊断意义

目的分析不同血清类型的类风湿性关节炎(RA)患者血清中的类风湿性关节炎特异性抗原瓜氨酸化蛋白(RACP)的水平,比较RA-CP与抗环瓜氨酸多肽(CCP)抗体、类风湿因子(RF)在RA诊断中的价值。方法用酶联免疫吸附法(ELISA)检测103例RA患者、71例其他风湿病患者、105例健康体检者血清中RA-CP,抗CCP抗体和RF的水平。根据抗CCP抗体和RF测定结果将RA患者分为4种血清类型:抗CCP抗体阳性/RF阳性的RA、抗CCP抗体阳性/RF阴性的RA、抗CCP抗体阴性/RF阳性的RA、抗CCP抗体阴性/RF阴性的RA,分析各种血清类型RA患者血清中RA-CP的水平。结果RA组的血清中RA-CP浓度水平中位数为4.51(1.80~7.49)单位,高于其他疾病组的0.53(0.40~0.76)单位和健康对照组的0.52(0.35~0.69)单位。RA-CP,抗CCP抗体和RF对RA的敏感度分别为77.7%,65.0%和69.9%,RA-CP对RA的敏感度高于抗CCP抗体和RF(P<0.05);特异度分别为95.5%,97.2%和89.2%。在4种血清型的RA中RA-CP的检出率分别为100.0%(57/57),40.0%(4/10),100.0%(15/15)和19.0%(4/21)。在抗CCP抗体阴性的RA中RA-CP的检出率为52.8%(19/36)。结论血清中RA-CP对RA的诊断比抗CCP抗体和RF具有更高的敏感度,可提高类风湿性关节炎的检出率。因此RA-CP可作为RA临床诊断的新辅助指标。