食蟹猴体内瓦氏瓦特松吸虫ITS序列测定及其种系发育分析

目的对分离自食蟹猴（Macaca fascicularis）的瓦氏瓦特松吸虫（Watsonius watsoni）进行初步形态学观察．测定其核糖体基因内转录间隔区（internal transcribed spacer region,ITS）序列，并分析其基于ITS2序列的系统发生关系。方法将从食蟹猴中分离的瓦氏瓦特松吸虫用盐酸卡红染色后观察其形态学特征。PCR扩增吸虫的ITSl与ITS2序列并测序：运用在线序列比对工具Clustal W2．将测序结果与ITS2数据库上部分同盘类吸虫及人兽共患吸虫致病种的序列进行多重比对分析．应用MEGA4．0软件，采用邻位相连法构建系统发生树进行分析。结果盐酸卡红染色后显示，瓦氏瓦特松吸虫各形态特征符合经典的分类学描述。PCR测序后获得ITS1、ITS2序列，提交GenBank后获得登录号分别为KC763806、GU999987，其中ITS2长度为295bp，（G＋C）含量为52．20％。基于ITS2建立的系统发生树显示，其与同归属于同盘总科腹盘科的野牛平腹盘吸虫（Homalogaster paloniae）、人拟腹盘吸虫（Gastrodiscoides hominis）构成自展值为95％的拓扑分支。结论测定了瓦氏瓦特松吸虫ITS序列．获得了基于ITS2的系统发生树。