乌苏里瓦韦总黄酮的提取工艺优化的研究实验

通过超声波辅助法提取乌苏里瓦韦总黄酮;NaNO_(2)-Al(NO_(3))_(3)-NaOH法显色以及紫外分光光度法检测总黄酮含量;单因素法考察超声温度、超声功率、超声时间和料液比;Box-Behnken法优化最佳提取工艺;Design-Expert 10.0.7软件进行数据分析。结果显示:单因素实验考查最佳超声功率为364.41 W,超声温度为58.47℃,超声时间为50 min,液料比为19.99∶1(mL/g)。最佳工艺为超声温度58℃,超声功率360 W,液料比20∶1(mL/g)。乌苏里瓦韦总黄酮的提取率为17.944%。表明该方法可以有效提取乌苏里瓦韦中的总黄酮。

瓦韦孢子壁的结构和发育的研究

利用光镜、扫描电镜和透射电镜对水龙骨科(Polypod iaceae)瓦韦(Lepisorus thunbergianus(Kaulf.)Ching)孢子壁的结构和发育进行了研究。研究结果表明瓦韦孢子两侧对称、单裂缝,表面具波纹状纹饰。孢壁从内到外由内壁、外壁和周壁三部分构成。外壁来源于绒毡层物质,由外壁内层和外壁外层构成,外壁外层表面的波纹状纹饰形成孢子表面的纹饰轮廓。周壁薄,紧贴外壁表面,由2层片状结构叠合而成。在外壁外层形成过程中,孢子表面和周围出现较多小球。本文探讨了孢壁各层的结构、来源和发育过程,为蕨类植物系统学和孢粉学研究积累资料。

乌苏里瓦韦的性状及显微鉴别

目的:为鉴别和进一步开发研究乌苏里瓦韦提供参考依据。方法:对乌苏里瓦韦采用性状、显微鉴别法进行鉴定。结果:乌苏里瓦韦叶表皮细胞不规则,垂周壁弯曲呈波状;叶上表面几乎无气孔,下表面气孔丰富;叶柄基部维管束有2～3条,从叶柄基部到叶片主脉,维管束逐渐合并成1条,木质部呈"T"字型;孢子囊壁环带属纵行环带;根状茎表皮细胞1列,细胞壁均匀加厚,韧皮部较少,可见分泌细胞;粉末中导管丰富,多为梯纹导管,也有环纹导管和螺纹导管,厚壁细胞多见。结论:以上特征可作为乌苏里瓦韦的显微鉴别要点,为其鉴定及资源开发利用提供参考。

HPLC法测定乌苏里瓦韦药材中2种活性成分

目的 建立HPLC法测定乌苏里瓦韦药材中绿原酸和叶黄素的方法.方法 测定绿原酸色谱条件为Agilent Eclipse XDB-Ⅱ C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为乙腈-0.4％磷酸溶液（13：87）,体积流量为1.0 mL/min,进样量为10 μL,柱温为25℃,检测波长为325 nm.叶黄素色谱条件为Agilent Eclipse C1s柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相为100％甲醇,柱温为室温,体积流量为1 mL/min,检测波长为474 nm.结果 绿原酸线性范围为0.4～4.0 μg,样品平均加样回收率为100.3％,方法精密度RSD （n=5）为2.03％,绿原酸含有量为2.635 mg/g;叶黄素线性范围为1.0 ～ 100.0 μg,样品平均加样回收率为99.45％,方法精密度RSD （n=5）为1.90％,叶黄素含有量为110 μg/g.结论 上述方法快捷、简便、准确、专属性好、灵敏度高.

乌苏里瓦韦抑菌作用研究

[目的]探讨乌苏里瓦韦的抑菌作用。[方法]以乌苏里瓦韦为研究对象,在单因素的基础上,选用Na+浓度、蔗糖浓度、不同的有机溶剂萃取物,采用正交试验的原理,研究乌苏里瓦韦提取液对抑菌作用的影响。[结果]乌苏里瓦韦乙醇提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、粪球菌、枯草杆菌、沙门氏杆菌均有抑制作用,但对枯草杆菌的抑制作用最强。最佳抑菌作用的条件为蔗糖浓度20%、Na+浓度为30%、乌苏里瓦韦乙醇提取液的石油醚萃取物,测定对枯草杆菌的抑菌环直径为8.932 mm。[结论]乌苏里瓦韦提取液具有抑菌作用。

乌苏里瓦韦不同提取物的抗炎作用研究

[目的]对比研究乌苏里瓦韦不同溶剂提取物的抗炎作用。[方法]以浓度70%乙醇与蒸馏水作为溶剂,采用回流提取法对乌苏里瓦韦进行提取,建立二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型评价乌苏里瓦韦各提取液的抗炎作用。[结果]乌苏里瓦韦水提液高、中剂量组和浓度70%醇提液高剂量组对二甲苯致小鼠耳肿胀均有抑制作用,且浓度70%醇提液高剂量组抑制作用最为显著(P<0.01)。[结论]乌苏里瓦韦水提液在正常用量(中剂量)下抗炎效果最明显,与相关记载的用法用量及主治相符。

响应面法优化乌苏里瓦韦热水提取绿原酸工艺

旨在对乌苏里瓦韦中绿原酸的工艺条件进行优化。采用热水提取乌苏里瓦韦中绿原酸,根据Box-Benhnken中心组合设计原理,设计了3因素3水平响应面分析试验,来确定乌苏里瓦韦中绿原酸的最佳工艺条件。结果表明乌苏里瓦韦绿原酸最佳提取工艺条件为:液料比25:1,提取时间4 min,提取温度96℃,在这种条件下绿原酸得率可达5.11%,与理论值相接近,表明响应面分析法优化乌苏里瓦韦中绿原酸热水提取工艺具有良好的效果。水提法具有能耗少、时间短和低成本等特点,为乌苏里瓦韦提取绿原酸的工业化生产提供了理论依据。

RP-HPLC法测定瓦韦药材中绿原酸的含量

目的建立瓦韦药材中绿原酸的含量测定方法。方法采用RP-HPLC法,使用C18柱,以乙腈-0.5%磷酸溶液(11∶89)为流动相;检测波长为326nm;流速为1.0ml/min。结果绿原酸在0.126～0.632μg范围内线性关系良好(r=0.9998),平均回收率为99.37%(RSD=1.27%)。结论本法简便、快速、灵敏、准确、重现性好,可用于瓦韦药材的质量控制。

乌苏里瓦韦对小鼠镇咳、祛痰作用研究

研究乌苏里瓦韦95%乙醇提取物对小鼠的镇咳、祛痰作用,并探讨是否通过抗炎机制而发挥药理作用。将ICR小鼠随机分为空白对照组、阳性药组、乌苏里瓦韦高剂量组(1.6 g/kg)、乌苏里瓦韦中剂量组(0.8 g/kg)、乌苏里瓦韦低剂量组(0.4 g/kg),分别采用氨水引咳法、气管酚红排泌法等经典模型研究乌苏里瓦韦的镇咳和祛痰作用,继而通过气管注射脂多糖造成急性炎症模型以探讨其抗炎机制。乌苏里瓦韦高、中剂量组均可显著延长小鼠的咳嗽潜伏期,减少咳嗽次数,增加气管酚红分泌量(P <0.01,P <0.05),并可明显降低小鼠IL-6、IL-1和TNF-的含量(P <0.01,P <0.05)。乌苏里瓦韦具有较好的镇咳、祛痰作用,其机制可能是通过降低IL-6和IL-1等血清炎性因子以及TNF-的含量发挥作用。该研究结果可为进一步开发利用乌苏里瓦韦提供理论数据支持。

乌苏里瓦韦抗炎活性部位筛选及抗炎机制探讨

目的筛选乌苏里瓦韦抗炎作用的活性部位,并探讨其作用机制。方法将小鼠单核巨噬细胞RAW 264.7经脂多糖(LPS)诱导培养,建立炎症模型后,经不同浓度(25、50、100μg·mL^-1)的乌苏里瓦韦不同极性部位(石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位及水部位)处理,用试剂盒检测RAW 264.7细胞中炎症因子NO与PGE2的分泌水平。结果质量浓度为50、100μg·mL^-1的乙酸乙酯萃取部位、正丁醇萃取与水萃取部位均可显著抑制LPS诱导的RAW 264.7细胞炎症因子PGE2、NO的释放水平,且具有较好的量效关系。结论乌苏里瓦韦的乙酸乙醇、正丁醇与水萃取部位均为抗炎活性部位,其抗炎机制可能与影响炎症因子释放有关。

天山瓦韦总黄酮成分的含量测定

目的:对天山瓦韦总黄酮成分进行含量测定。方法:以芦丁为标样,用分光光度法测定不同溶剂和不同时间条件下的总黄酮含量。结果:天山瓦韦中黄酮类化合物提取的最佳条件为:75%的乙醇,抽提3.5h,总黄酮含量为3.20%。

防治血尿良药——石韦及其易混品华星蕨、粤瓦韦的识别与应用

本文描述了防止血尿良药——石韦及其易混品华星蕨、粤瓦韦的主要特征及识别应用的方法。

Box-Behnken响应面分析法优化乌苏里瓦韦中绿原酸提取工艺

目的:优选乌苏里瓦韦中绿原酸的提取工艺。方法:在单因素试验基础上,选取料液比、乙醇体积分数、提取时间为自变量,绿原酸提取量为响应值,根据Box-Benhnken试验设计原理,利用响应面分析法优化乌苏里瓦韦中绿原酸的醇提工艺。结果:最佳提取工艺为加68倍量75%乙醇提取2次,每次41 min;绿原酸提取量达8.26 mg·g-1,与理论预测值8.47mg·g-1偏差较小。结论:醇提法与传统工艺比较,具有提取率高、能耗少、时间短和低成本等特点。优选的工艺稳定可行,为乌苏里瓦韦的工业化生产提供参考。

RP-HPLC测定有边瓦韦中的蜕皮甾酮

采用色谱柱Shimadzu C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水(49:51,V/V),流速为0.8mL/min,检测波长为324nm,柱温为30℃,建立测定有边瓦韦中蜕皮甾酮含量的反相高效液相色谱法。结果为蜕皮甾酮在0.11—1.65μg范围内线性关系良好(R2=0.9991),平均回收率为103.4%,RSD为1.53%。本方法简便准确、灵敏度高、重复性好,可用于有边瓦韦中蜕皮甾酮的含量测定。

乌苏里瓦韦及其再生植株的利尿作用研究

目的探讨乌苏里瓦韦利尿作用的机制,对比乌苏里瓦韦及其再生植株的利尿作用。方法运用网络药理学探讨乌苏里瓦韦的利尿作用机制;利用AutoDock Vina1.1.2软件进行活性成分和核心靶点的分子对接,采用Pymol2.5.0软件对最优结果进行可视化;通过体内试验测量小鼠口服药物后4 h内尿量,评价乌苏里瓦韦及其再生植株的利尿作用。结果从乌苏里瓦韦中的41个候选化合物中筛选得到共1791个药物靶点,将删除重复靶点后的327个药物靶点与从GeneCards数据库中以“Diuretic”为关键词检索得到的1324个疾病靶点作Venn图,共得到119个交集基因。PPI网络节点度值排名前6的核心蛋白为MAPK3、VEGFA、AKT1、IL6、ALB、TNF,通过拓扑分析得到度值排名前3的候选化合物分子黄芩素、香叶木素、山柰酚。GO功能分析与KEGG通路富集分析结果表明,乌苏里瓦韦活性成分利尿作用机制主要与response to toxic substance、membrane raft等生物过程有关,参与的主要信号通路有神经活性配体-受体相互作用、HIF-1信号通路、氮代谢等。分子对接结果显示黄芩素、香叶木素及山柰酚均可与核心靶点进行较好的自发结合。体内试验中乌苏里瓦韦组(9.5 g·kg^(−1))尿量增加了1.26倍,k^(+)增加了1.31倍,Cl^(-)增加了1.24倍。乌苏里瓦韦再生植株组(9.5 g·kg^(−1))尿量增加了1.26倍,k^(+)增加了1.29倍,Cl^(-)增加了1.26倍。结论网络药理学结果表明,乌苏里瓦韦利尿作用可能是多组分、多靶点、多途径作用的结果;通过体内药理试验验证了乌苏里瓦韦及乌苏里瓦韦再生植株具有相似的利尿作用。

ICP-MS测定乌苏里瓦韦中人体必需微量元素的含量

目的:建立一种高灵敏度、高精密度的多元素快速同时分析的方法,测定长白山药用植物乌苏里瓦韦中10种人体必需微量元素的含量,填补该药用植物微量元素研究的空白,为其质量控制及进一步研究提供科学依据。方法:取3批吉林产乌苏里瓦韦,采用HNO_3-H_2O_2体系将植物全草粉末(过200目筛)湿法消解后,电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定其微量元素,以In,Rh为内标,标准曲线法计算各元素的含量。结果:Co元素的检出限为9×10^(-4)μg·g^(-1),其余9种元素的检出限均>1×10^(-3)μg·g^(-1)。10种微量元素的线性范围均为0.05~150μg·g^(-1)。各标准曲线的相关系数均>0.999,RSD均<3.8%,加样回收率为94.8%~105.6%。测得Mn,Zn,Cr,Ni,Cu,V,Mo,Se,Co,Sn各元素质量分数分别为213.7,48.63,13.89,6.543,6.502,2.571,1.231,0.581 9,0.598 2,0.295 7μg·g^(-1)。结论:该快速测定方法灵敏度高、线性范围宽、准确度良好。乌苏里瓦韦中含有较丰富的Mn,Zn,Cr,Ni,Cu,V等人体必需微量元素,在参与多种体内过程中会对该植物的药效发挥会产生直接或间接的影响,为进一步研究乌苏里瓦韦中各元素形态,建立其质量控制标准和活性筛选提供了参考。

乌苏里瓦韦(Lepisorus ussuriensis(Regel et Maack)Ching)孢子诱导再生植株的研究

乌苏里瓦韦是一种民间常用的药用蕨类植物,本研究首次建立一种以乌苏里瓦韦孢子为外植体形成完整植株的体系,得到了乌苏里瓦韦体外扩增的方法。为了探究最佳的孢子萌发条件,设计使用6种NAA和6-BA激素组合探究孢子的最佳萌发条件,然后取孢子萌发得到的乌苏里瓦韦叶片,分别接种到不同浓度的NAA和活性炭的组合培养基中,探究乌苏里瓦韦生根的最佳条件。结果表明,乌苏里瓦韦孢子的最佳萌发条件是:1/2MS培养基为基本培养基,附加NAA 0.2 mg/L,6-BA 0.5 mg/L蔗糖30 g/L,琼脂7 g/L;生根的最佳条件为:1/2MS培养基为基本培养基,附加NAA 0.4 mg/L,蔗糖30 g/L,琼脂7 g/L,活性炭1.5 g/L。本研究首次报道了乌苏里瓦韦的体外繁殖形成完整再生植株的方法,为乌苏里瓦韦的人工繁殖,同时为乌苏里瓦韦的可持续开发利用打下坚实基础。

四川南川金佛山蕨类植物新种

金佛山是四川省的名山之一,位于该省盆地东南部的边缘,北纬29°7′,东经107°1′,距南川城约20公里,山顶海拔2,251米,为川东南 诸山的最高点。金佛山蕴藏着起源古老的植物区系,种类丰富,直到近年来才开展调查,特别是四川省中药研究所南川药物种植场的同志们进行了深入采集的结果,现知有高等植物3,000余种,其中蕨类植物500余种,正在整理中。本文发表第一批新种,其余的陆续发表。

被遗忘的部族——巴布亚的图朗比人

大洋洲西部,巴布亚新几内亚茂密的深山老林里,居住着一个被遗忘的部族——图朗比部族。他们在世界即将进入21世纪的今天,仍过着石器时代的生活。比利时探险家、电影工作者、人种学家让-皮埃尔·迪蒂耶历尽艰险找到他们。与他们建立了第一次友好的接触。下面就是迪蒂耶描述那神奇经历的日记。