固相萃取-气相色谱-质谱法测定利多卡因代谢物单乙基甘氨酰二甲苯胺的血药浓度

建立了固相萃取-气相色谱-质谱（GC-MS）测定利多卡因代谢物单乙基甘氨酰二甲苯胺（MEGX）血药浓度的方法。血清中的MEGX采用固相萃取小柱萃取、GC-MS测定。色谱条件为：HP-5MS毛细管柱（15m×0.25mm×0.1μm）,初始柱温100℃,保持1min后以40℃/min速率升温至200℃,保持0.5min;进样口温度250℃;分流进样,分流比1∶1,进样量2μL;载气为氦气,流量为1.0mL/min。质谱条件为：离子源温度230℃,电子轰击电离,电子能量70eV,选择离子检测（m/z58（MEGX）、m/z86（普鲁卡因,内标））。结果表明,MEGX在血清中的浓度在1.562～25ng/mL范围内的线性关系良好,相关系数0.9981,最低检测限为0.5ng/mL,不同浓度MEGX的萃取回收率在80.1%～85.7%之间。实验证明该方法快速、准确,选择性好,灵敏度高,适合用于血清中微量MEGX的测定。

单乙基甘氨酰二甲苯胺用于检测肝脏储备功能

利多卡因代谢试验———单乙基甘氨酰二甲苯胺 (monoethylglycinexylidide,MEGX)的检测 ,是近年来开展的一种用于检测肝脏储备功能的较好方法 ,因其准确快捷的特点 ,在国外已被应用于临床肝脏外科及肝移植领域。本文综述国内外文献 ,介绍利多卡因的代谢过程、试验方法。

单已基甘氨酰二甲苯胺评估肝脏储备功能的实验研究

目的通过检测大鼠肝损害不同阶段的血清单乙基甘氨酰二甲苯胺（MEGX），血清支链氨基酸／芳香氨基酸（BCAA／AAA）比值，探究能够敏感反映肝脏组织病理变化的肝储备功能指标。方法将雄性Wistar大鼠40只分为实验组和对照组，实验组大鼠皮下注射60％四氯化碳橄榄油溶液，对照组则注射生理盐水橄榄油混合液，制备不同时期大鼠肝损害模型，分别在肝损害不同阶段检测血清MEGX，血清BCAA／AAA，常规肝功能，病理组织学检查。结果随着肝细胞损害程度的加重，大鼠血清MEGX浓度逐级隆低，与肝组织病理学变化较相符；BCAA／AAA亦可反映肝损害的程度，但不及MEGX敏感；而常规肝功能试验与肝组织学变化不相符。结论测定血清MEGX水平比检测血清BCAA／AAA能够更敏感的反映肝组织病理变化，是评估肝储备功能的较好指标。

肝硬化患者与正常人利多卡因及其代谢物MEGX的药代动力学比较

目的对肝硬化患者与正常人利多卡因及MEGX的药代动力学进行比较。方法测定了 8名健康志愿者和 4名肝硬化患者给药前及静脉注射利多卡因 (1mg/kg)后不同时间的利多卡因及其主要代谢物MEGX的血清浓度 ,并对利多卡因和MEGX动力学模型进行分析。结果发现肝硬化病人与正常人的MEGX动力学参数有显著差异。结论测定 6 0min时的MEGX血药浓度比测定利多卡因更有临床意义。

LC-LIT-MS法同时检测硬膜外麻醉致死犬体内利多卡因及其代谢物MEGX和GX的研究

目的建立同时检测硬膜外麻醉致死犬血液和肝脏中利多卡因及其代谢物单乙基甘氨酰二甲苯胺(MEGX)和甘氨二甲基苯酰胺(GX)的液相色谱-离子肼质谱(LC-LIT-MS)方法。方法犬3只经硬膜外穿刺,按利多卡因硬膜外麻醉用药最大量的5倍注射(63.35 mg/kg),待呼吸、心跳等生命体征完全消失后解剖并且收集检材,样品采用液液萃取法前处理,采用离子肼质谱联用进行定性检测。高效液相色谱内标法建立工作曲线,空白添加法进行方法回收率考察。结果经硬膜外注射利多卡因后,犬出现嗜睡、流涎和抽搐等症状,犬于注射20 min后死亡。解剖见导管进入硬膜外腔隙,提示造模成功。液相色谱-离子肼质谱可以同时检测心血和肝脏中利多卡因、MEGX和GX。心血和肝脏中利多卡因的线性范围分别为0.1-100 ng/ml和0.1-100 ng/mg,最低检出限为0.004 ng,信噪比(S/N)=3;MEGX的线性范围分别为2-250 ng/ml和2-250 ng/mg,最低检出限为1 ng(S/N=3);GX的线性范围分别为2-250 ng/ml和2-250 ng/mg,最低检出限为1 ng(S/N=3)。回收率良好,方法稳定性好。结论本实验建立了同时检测生物检材中利多卡因及其代谢物的LC-LIT-MS检测方法,可用于对利多卡因及其代谢物的法医毒物动力学研究和利多卡因中毒案件的法医学鉴定。

高效液相色谱法同时检测生物样品中利多卡因和MEGX

目的建立生物样品中同时测定利多卡因及其代谢产物单乙基甘氨酰二甲苯胺(MEGX)的高效液相色谱分析方法。方法待测生物样品血液或组织脏器中加入内标物普鲁卡因,酸化,碱化后,用乙醚提取两次,挥干,定容,用保留时间定性,内标法、工作曲线法进行定量。结果心血和肝脏中利多卡因液相色谱检测的回归方程分别为Y=0.217X+0.019和Y=0.214X+0.113,相关系数分别为0.996和0.988,线性检测范围均为(0.2～100)μg/mL(μg/g)、最低检出浓度分别为0.05μg/mL;心血和肝脏中MEGX液相色谱检测的回归方程分别为Y=0.514X+0.033和Y=0.440X+0.292,相关系数分别为0.995和0.993,线性检测范围均为(0.2～20)μg/mL、最低检出浓度分别为0.05μg/mL。心血利多卡因及MEGX含量分别为(14.50±1.64)μg/mL和(1.64±0.22)μg/mL,肝脏利多卡因及MEGX含量分别为(14.90±1.19)μg/mg和(2.53±0.36)μg/mg。结论建立了生物样品中同时测定利多卡因及MEGX的HPLC分析方法,所建方法简便、灵敏、重现性好,可用于利多卡因中毒的快速诊断和利多卡因麻醉意外的法医学鉴定。

LC-MS/MS法检测人血液中的利多卡因及其代谢物

目的建立人血液样品中利多卡因及其代谢物单乙基甘氨酰二甲苯胺(MEGX)和甘氨酰二甲苯胺(GX)的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析方法。方法人血液样品经乙腈沉淀蛋白后,Zorbax RRHD Plus C18柱(2.1mm×50mm,1.8μm)分离,以0.1%甲酸和乙腈为流动相进行洗脱。质谱采用电喷雾正离子化(ESI+),多反应监测扫描模式。结果血液中利多卡因、MEGX和GX在相应范围内线性良好,相关系数(r>0.9950)。在血液中检出限分别为0.1 ng/mL、0.5 ng/mL和0.2 ng/mL,方法回收率为92.7%~103.9%,准确度为92.9%~113.1%,日内、日间精密度的相对标准偏差均不超过13.0%。在1例肌肉注射利多卡因死者心血中利多卡因、MEGX和GX的质量浓度分别为1.520μg/mL、0.019μg/mL和0.266μg/mL。结论本方法灵敏度高、选择性好,适用于血液中利多卡因及其代谢物的检测,可为利多卡因临床治疗过程中的药物浓度监测和法医学鉴定提供技术支撑。

利多卡因代谢试验在肝损害大鼠肝储备功能评估中的应用

目的通过检测大鼠肝损害不同阶段的利多卡因代谢试验,探讨血清中利多卡因代谢产物单乙基甘氨酰二甲苯胺水平与肝损害时肝组织病理学变化的相关性。方法健康雄性Wistar大鼠40只,分为实验组和对照组,实验组大鼠皮下注射60％四氯化碳橄榄油溶液(60ml四氯化碳+40 ml橄榄油)3．0ml／kg,每4d 1次,以5％乙醇溶液代替饮用水。注射四氯化碳次数按变性坏死期6次,纤维增生期11次,肝硬化形成期16次制备不同时期大鼠肝损害模型。分别在肝损害不同阶段进行利多卡因代谢试验,常规肝功能检查,组织病理学检查。对照组则注射等渗盐水橄榄油混合液(60 ml等渗盐水+40 ml橄榄油)3．0 ml／kg,每4d 1次,饮用自来水。结果随着肝细胞损害程度的加重,利多卡因代谢试验中大鼠血清单乙基甘氨酰二甲苯胺浓度逐级降低,与肝组织病理学变化相符。而常规肝功能试验与肝组织病理学变化不相符。结论血清单乙基甘氨酰二甲苯胺水平与肝组织病理学变化较相符,能够较敏感的反映肝脏组织病理变化。

利多卡因及MEGX在蛛网膜下腔麻醉致死犬体内死后再分布

目的研究利多卡因及其代谢产物单乙基甘氨酰二甲苯胺(MEGX)在蛛网膜下腔麻醉致死犬体内的死后再分布规律。方法犬6只随机分为A、B两组,分别经蛛网膜下腔注射0.5倍(6.34mg/kg)和5倍(63.35mg/kg)硬膜外麻醉极量的盐酸利多卡因,于死后0h、12h、24h、36h、72h取心血、外周血、肝、脑等,采用高效液相色谱法(HPLC)检测其中利多卡因及MEGX的含量。结果 A组犬死后72h,心血、外周血和脑中利多卡因含量与死亡当时的比值(Ct/C0)分别为4.74,14.87,7.67,均呈上升趋势(P<0.05),MEGX含量与死亡当时含量差异无统计学意义(P>0.05);B组犬死后72h,心血中利多卡因含量Ct/C0值为0.36,呈下降趋势(P<0.05),脑中为3.48(P<0.05)呈升高的趋势,肝中MEGX含量与死亡当时相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论蛛网膜下腔不同剂量麻醉致死犬体内利多卡因均会发生死后再分布,MEGX未发生死后再分布。

UPLC-MS/MS法同时测定单侧足踝手术患者血浆中利多卡因及其活性代谢物的浓度

目的:建立简便快速、灵敏准确的超高效液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定人体血浆利多卡因及其两种活性代谢物的浓度。方法:血浆样品经溶剂诱导相变萃取前处理后,以罗哌卡因为内标,经Thermo hypersil GOLD C18(100 mm×2.1 mm,1.9μm)色谱柱,以A(0.01%甲酸水溶液)-B(乙腈)为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾电离源(ESI),在正离子(positive)模式下进行选择离子反应监测(SRM)。结果:利多卡因在5~4 000 ng·mL-1范围内线性关系良好,单乙基甘氨酰二甲苯胺、甘氨二甲基苯酰胺在1~800 ng·mL-1范围内线性关系良好。该方法日内、日间RSD均小于10%,且提取回收率稳定,并测得股神经联合坐骨神经阻滞后,10名足踝手术患者体内利多卡因及两种活性代谢物的Cmax分别为(1 672.86±227.45)、(265.66±32.71)、(42.19±22.35)ng·mL-1。结论:该方法简便高效、灵敏准确,可用于利多卡因及其两种活性代谢物血药浓度的监测。