鞘内注射甘氨酸转运体-2抑制剂ALX1393对急性疼痛模型大鼠的抗伤害性感受作用

背景脊髓灰质背角的甘氨酸能神经元与减轻外周炎症引起的脊髓疼痛和慢性疼痛有关。神经元异构体甘氨酸转运体-2（ClyT2）可重吸收突触前释放的甘氨酸并调节甘氨酸能神经传递。本实验目的即研究甘氨酸转运体-2抑制剂ALX1393鞘内注射对急性疼痛模型大鼠是否有抗伤害性感受作用。方法给雄性SD大鼠鞘内置管，通过甩尾实验、热板实验、爪压实验和甲醛实验评估ALX1393（4μg、20μg以及40μg）鞘内注射对大鼠的热性、机械性和化学性伤害，用旋转实验评估其运动功能影响。结果ALX1393对热性和机械性刺激的抗伤害性感受作用存在剂量依赖性关系。给药后15分钟出现最大效果，明显效果持续约60分钟。给予ALX1393后立即注射士的宁可完全拮抗其抗伤害性感受作用。在甲醛实验中，ALXl393有剂量依赖性的减轻疼痛作用，早期和晚期都有，而晚期效果更明显。与抗伤害性感受作用相反，ALX1393用到40μg对运动功能也没有影响。结论本研究证明了ALX1393对急性疼痛的抗伤害性感受作用。结果提示抑制性神经递质转运体有望成为急性疼痛的治疗靶点，Olyr2选择性抑制剂可能会成为新的治疗药物。

甘氨酸转运体1抑制剂M22对小鼠癫痫认知损害作用的研究

目的观察甘氨酸转运体1抑制剂(M22)对癫痫小鼠认知损害的作用。方法选取40只C57BL/6小鼠腹腔注射戊四氮建立慢性点燃癫痫模型,将其随机分为模型组(20只)和M22组(20只),另选取10只为对照组,腹腔注射生理盐水2周;随后M22组灌胃40 mg/(kg·d)的M22,模型组和对照组灌胃生理盐水,均2周。Morris水迷宫实验评估小鼠学习及记忆功能:逃避潜伏期、目标象限内停留时间占总时间百分比、目标象限内游泳距离占总距离百分比。处死后取脑组织,对海马区进行组织病理学观察,并检测大脑皮层神经元细胞凋亡情况及大脑皮质凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase-3)表达情况。结果M22组和模型组小鼠逃避潜伏期均显著长于对照组(P <0. 05),M22组显著短于模型组(P <0. 05); 3组逃避潜伏期均随时间的延长显著缩短(P <0. 05); M22组和模型组小鼠目标象限内停留时间占总时间百分比、目标象限内停留距离占总距离百分比、大脑皮质Bcl-2蛋白相对表达量均显著低于对照组(P <0. 05),M22组显著高于模型组(P<0. 05);海马组织病理学发现,模型组细胞排列紊乱,结构及轮廓模糊,且出现明显神经细胞空泡样改变; M22组细胞轮廓清晰,少量细胞空泡变性,无明显坏死; M22组和模型组大脑皮质神经元细胞凋亡率、Bax、Caspase-3蛋白相对表达量显著高于对照组(P <0. 05),M22组显著低于模型组(P <0. 05)。结论 M22可显著改善癫痫小鼠的认知功能损害,其机制可能是通过增强Bcl-2蛋白表达、抑制Bax、Caspase-3蛋白表达,而抑制大脑皮质神经元细胞凋亡。

吲哚衍生物类VEGFR-2酪氨酸激酶抑制剂的从头设计

以血管内皮生长因子受体-2(VEGFR-2)酪氨酸激酶的晶体结构为基础,采用从头药物设计方法,设计了一系列吲哚类化合物,并用类药性和分子对接进行了筛选,最后得到10个对接能量较低的化合物分子,对具有最低结合能的化合物与VEGFR-2酪氨酸激酶的复合物进行了10 ns的分子动力学模拟,并对其结合模式进行了分析.这些化合物结构新颖,可能作为抗肿瘤的先导化合物或候选药物.本文结果为VEGFR-2酪氨酸激酶抑制剂的进一步改造、设计及合成提供了理论基础,并有助于开发高活性和高选择性的抗肿瘤药物.

半胱氨酸蛋白酶抑制剂C与β_2-微球蛋白对检测糖尿病肾病的临床意义

目的:探讨血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cystatin C)、β2-微球蛋白(β2-MG)、血清肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、内生肌酐清除率(Ccr)对检测糖尿病肾病(DN)的意义。方法:对200例糖尿病肾病患者和100例正常人进行CysC、β2-MG、Scr、BUN、Ccr测定,血清CysC和β2-MG采用免疫投射比浊法测定,Scr采用酶速率终点法测定,BUN脲酶采用终点法。结果:200例DN患者,各期CysC、β2-MGD、Scr、BUN、Ccr与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:血清CysC、β2-MG对糖尿病肾病的早期诊断、治疗及防止肾衰具有重要意义。

钠-葡萄糖协同转运蛋白2抑制剂对慢性心力衰竭患者血清脂联素脑钠肽同型半胱氨酸影响研究

目的探讨钠-葡萄糖协同转运蛋白2抑制剂(SGLT2i)对慢性心力衰竭患者血清脂联素(APV)、脑钠肽(RNP)、同型半胱氨酸(HCY)的影响。方法随机将2021年1月至2022年12月我院收治的92例慢性心力衰竭患者分为2组,对照组46例行常规抗心力衰竭干预,研究组在此基础上联合SGLT-2抑制剂,对比2组患者治疗效果、心功能、炎症因子、血清脂联素、脑钠肽、同型半胱氨酸水平变化及不良反应发生情况。结果研究组治疗效果高于对照组(P<0.05);治疗后研究组左心室书中舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期内径(LVESD)低于对照组,左心室射血分数(LVEF)高于对照组(P<0.05);治疗后研究组炎症因子水平低于对照组(P<0.05);治疗后研究组APN高于对照组,BNP、HCY低于对照组(P<0.05),2组不良反应率差异无统计学意义(P>0.05)。结论SGLT2i可有效提升慢性心力衰竭患者的心功能指标,缓解机体炎症反应,改善患者心血管结局,安全性较高,应在临床治疗中广泛使用。

β2-微球蛋白与半胱氨酸蛋白酶抑制剂C在透析治疗中的评价价值

目的研究β2-微球蛋白(β2-MG)与半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys-C)在透析治疗中的评价价值。方法选取2018年9月至2019年9月在该院接受高通量血液透析的110例终末期肾病患者(透析组)进行前瞻性研究,选择同期体检健康者110例为对照组,分别检测透析组患者透析前后和对照组血液标本中血尿酸、β2-MG与Cys-C的水平。结果透析组透析后血尿酸、β2-MG、Cys-C水平明显低于透析前(P<0.05),但均明显高于对照组(P<0.05)。结论终末期肾病患者行血液透析后血尿酸水平下降,透析治疗有效,β2-MG和Cys-C水平相应下降,提示β2-MG和Cys-C与血尿酸水平判断透析疗效具有一致性。

血清内皮细胞特异分子-1、 脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂水平对2型糖尿病大血管病变诊断的临床价值

目的探讨血清内皮细胞特异分子-1(Endocan-1)、脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(Vaspin)水平对2型糖尿病(T2DM)大血管病变(MVC)的临床诊断意义。方法选取72例患者,根据是否合并大血管疾病,分为T2DM组36例和MVC组36例;此外,选同期36例健康者作为对照组。利用酶联免疫吸附检测技术(ELISA)测定3组血清Endocan-1、Vaspin水平。结果T2DM组和MVC组血清Endocan-1水平均高于对照组,且MVC组高于T2DM组,差异有统计学意义(P<0.05)。MCV组Vaspin水平均低于T2DM组和对照组,T2DM组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Endocan-1与T2DM合并大血管疾病呈正相关,Vaspin与T2DM合并大血管疾病呈负相关。MVC组血清Endocan-1和Vaspin的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.910%、0.720%,截断值分别为1410 pg/mL、890 pg/mL,敏感度分别为81%、85%,特异度分别为76%、73%。结论血清Endocan-1、Vaspin的水平均与T2DM大血管病变相关,其可作为T2DM大血管病变的诊断依据。

巨噬细胞阳性蛋白-3α、半胱氨酸蛋白酶抑制剂A及前梯度蛋白-2在鼻咽癌患者中的表达及预后判断

目的研究巨噬细胞炎性蛋白-3α(MIP-3α)、半胱氨酸蛋白酶抑制剂A(cystatin A)及前梯度蛋白-2(AGR-2)在鼻咽癌患者中的表达情况及用于判断预后的价值。方法选择2012年1月~2013年1月于陕西省核工业二一五医院就诊的鼻咽癌患者90例,采用免疫组织化学方法检测患者癌组织及癌旁组织MIP-3α、cystatin A及AGR-2的表达。利用Kplan-Merier曲线和Cox比例风险模型分析MIP-3α、cystatin A及AGR-2评估鼻咽癌预后的价值。结果癌组织MIP-3α阳性患者49例(54.4%),cystatin A阳性59例(65.6%),AGR-2阳性53例(58.9%),分别显著多于癌旁组织MIP-3α阳性22例(24.4%,χ2=23.320,P<0.001),cystatin A 25例(27.8%,χ2=25.804,P<0.001),AGR-228例(31.1%,χ2=14.029,P<0.001)。MIP-3α、AGR-2阳性患者的总生存率(OS)、无远处转移生存率(DMFS)差于MIP-3α阴性患者(P<0.005),cystatin A阳性患者的OS、局部无复发生存率(LRFS)、DMFS均差于cystatin A阴性患者(P<0.005)。Cox风险比例发现,MIP-3α、cystatin A及AGR-2可以作为鼻咽癌患者预后的有效预测因子。结论MIP-3α、cystatin A及AGR-2在鼻咽癌患者癌组织中高表达,与鼻咽癌患者预后相关,可以作为一种标记物判断患者预后。

HER-2阳性乳腺癌酪氨酸激酶抑制剂治疗进展

人表皮生长因子受体-2(HER-2)是一种跨膜酪氨酸激酶(TK)受体,其过表达与乳腺癌的不良预后有关。HER-2的生物学效应由激酶介导,激酶活性变化导致酪氨酸残基磷酸化,从而激活下游的促生长途径。曲妥珠单抗和TK抑制剂(TKIs)是临床有效的抗HER-2治疗手段。与单克隆抗体相比,激酶抑制剂显示出了潜在的治疗优势。TKIs作为小分子化合物,具有跨越血脑屏障的能力。因其作用方式不同,TKIs或可克服曲妥珠单抗的某些耐药机制。研究显示,TKIs和曲妥珠单抗存在协同作用。目前,可用于临床的TKIs包括拉帕替尼、来那替尼和吡咯替尼。此外,图卡替尼、阿法替尼、帕唑替尼在抑制的激酶谱、HER-2抑制的效力和毒性方面有所不同,尚处于临床研究阶段。本文对批准临床使用或在开发中的抗HER-2 TKIs进行综述。

β_2-微球蛋白与半胱氨酸蛋白酶抑制剂C在糖尿病早期肾损伤诊断中的价值研究

目的探讨血清β2微球蛋白(β2-MG)、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys-C),在糖尿病肾病(DN)早期肾损伤诊断中的应用价值。方法β2-MG、Cys-C均采用免疫增强比浊法。血清尿素氮(BUN)采用酶学速率法,血肌酐(SCr)采用酶法。测定糖尿病患者103例,健康体检者103例血清的BUN、Cr、β2-MG、Cys-C含量。结果糖尿病(DM)组血清β2-MG、Cys-C水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。而BUN和SCr与正常对照组比较仅已伴发肾病的患者明显高于对照组,其余差异均无统计学意义(P>0.05)。结论β2-MG、Cys-C检测结果是衡量糖尿病患者肾功能早期改变的理想指标。

蛋白酪氨酸激酶抑制剂对RPE细胞趋化因子表达和Ca^(2+)的影响

目的研究蛋白酪氨酸激酶(protein tyrosine kinase,PTK)抑制剂染料木黄酮(Genistein)对白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)诱导的视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞趋化因子表达和细胞内Ca2+的影响。方法应用不同剂量IL-1β对RPE细胞进行刺激,RT-PCR法观察细胞IL-8和单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)mRNA表达的变化。应用Genistein对RPE细胞培养进行干预,观察其对IL-1β诱导RPE细胞IL-8和MCP-1 mRNA表达的影响。应用Fura2/AM、荧光分光光度计检测IL-1β和Genistein对RPE细胞内Ca2+的影响。结果 RT-PCR结果显示,0.1μg.L-1、1μg.L-1、10μg.L-1IL-1β刺激组IL-8 mRNA相对表达值分别为0.446±0.133、0.727±0.054和0.523±0.106,对照组为0.272±0.088;1μg.L-1、10μg.L-1IL-1β刺激组与对照组比较,差异有统计学意义(P=0.001、0.015)。10μg.L-1IL-1β诱导的RPE细胞MCP-1 mRNA相对表达值与对照组比较,差异有显著统计学意义(P=0.002)。10mg.L-1、50mg·L-1 Genistein对IL-1β诱导的IL-8和MCP-1 mRNA表达具有明显的抑制作用,差异均有显著统计学意义(均为P<0.01)。IL-1β引起细胞内Ca2+浓度升高,Genistein对细胞内Ca2+作用与之相反。结论 Genistein对IL-1β诱导的IL-8和MCP-1 mRNA表达具有明显的抑制作用,其机制可能为抑制IL-1β诱导的细胞内Ca2+增加。

2型糖尿病肾病的检测指标尿蛋白-肌酐比值与半胱氨酸蛋白酶抑制剂C糖化血红蛋白的相关性探讨

目的分析2型糖尿病肾病的尿蛋白-肌酐比值(albumin creatinine ratio,ACR)与半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(cystatin C,CysC)、糖化血红蛋白(hemoglobin A1c,HbA1c)的相关性。方法选取2019年8月—2021年8月于上饶市广信区人民医院就诊的60例2型糖尿病肾病患者(糖尿病肾病组)、60例单纯2型糖尿病患者(糖尿病组)与60名正常体检者(健康对照组)为研究对象,采集3组的静脉血5 mL,检测3组ACR、CysC、HbA1c水平;采用Pearson相关性分析2型糖尿病肾病患者的ACR与CysC、HbA1c水平之间的相关性;同时绘制受试者工作曲线(receiver operating characteristic curve,ROC),分析ACR、CysC、HbA1c单独与联合检测2型糖尿病肾病的诊断效能。结果糖尿病肾病组的ACR、CysC、HbA1c水平均高于糖尿病组与健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);Pearson相关性分析显示,2型糖尿病肾病患者的ACR与CysC、HbA1c水平呈正相关(P<0.05);ROC曲线显示,ACR、CysC、HbA1c对2型糖尿病肾病的诊断价值较高,其曲线下面积(area under curve,AUC)分别为0.922(95%CI:0.869~0.974)、0.934(95%CI:0.890~0.979)、0.805(95%CI:0.724~0.885),而3项指标联合检测的AUC为0.968(95%CI:0.938~0.998),高于3项指标单独检测的AUC。结论ACR与CysC、HbA1c水平呈显著正相关,3项指标联合检测可提高2型糖尿病肾病的检出准确率,可为临床治疗方案的制定提供更为可靠的指导。

N-(2-吡啶甲基)-L-丝氨酸铜配合物的合成、晶体结构及抑制蛋白酪氨酸磷酸酶活性

在甲醇溶液中,还原希夫碱HL[N-(2-吡啶甲基)-L-丝氨酸]与CuCl_2·2H_2O以摩尔比1∶1反应,得到1个新的中性单核铜配合物[CuLCl(H_2O)](Ⅰ).通过X射线单晶衍射、元素分析、红外光谱、电喷雾质谱和粉末X射线衍射分析等对其进行了表征.晶体结构分析表明,在该配合物中还原希夫碱以三齿双螯合环配位到中心铜离子,同时氯离子和溶剂水分子也参与配位,形成1个具有四方锥构型的五配位铜(Ⅱ)配合物,该配合物通过分子间弱相互作用连接成二维超分子结构.生物活性测试结果表明,配合物Ⅰ能有效抑制蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)和T细胞蛋白酪氨酸磷酸酶(TCPTP),IC_(50)值分别为0.32和0.45μmol/L.

小分子酪氨酸激酶抑制剂A2B通过调控PI3K/Akt通路诱导胃癌细胞凋亡

目的:探讨小分子酪氨酸激酶抑制剂A2B诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡的分子机制。方法:体外培养人胃癌SGC-7901细胞并加入2.5~160μmol/L梯度浓度的A2B分别干预24、48和72 h,利用CCK-8法检测细胞活力的半数抑制浓度(IC50),筛选出药物最适浓度。后续实验将SGC-7901细胞随机分为对照组(正常培养组)、溶剂组(含0.08%DMSO培养液处理)、A2B 10μmol/L实验组和A2B 20μmol/L实验组,每组每项实验均重复3次。利用EdU细胞染色实验和平板集落形成实验检测各组细胞增殖能力;Annexin V-FITC/PI双染法检测各组细胞凋亡率;线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1染色法)检测各组细胞线粒体膜电位变化;Western blot检测各组细胞中表皮生长因子受体(EGFR)、人表皮生长因子受体2(HER2)、细胞间充质-表皮转化因子(c-Met)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、caspase-3、cleaved caspase-3、蛋白激酶B(PKB/Akt)和磷酸化Akt(p-Akt)蛋白的表达情况。结果:(1)A2B作用于人胃癌SGC-7901细胞24、48和72 h的IC50值分别为26.85、19.58和12.24μmol/L;(2)20μmol/L A2B能够同时下调EGFR、HER2和c-Met蛋白水平(P<0.01);(3)10和20μmol/L A2B作用于SGC-7901细胞后,EdU+细胞数和集落数均显著减少(P<0.01);(4)经A2B处理后SGC-7901细胞凋亡率增加(P<0.05),JC-1绿色荧光比例增加(P<0.01),同时Bax/Bcl-2比值和cleaved caspase-3蛋白表达水平上调(P<0.05),caspase-3蛋白表达水平下调(P<0.05);(5)A2B还下调了SGC-7901细胞中p-Akt/Akt比值(P<0.05)。结论:A2B能够靶向作用于EGFR、HER2和c-Met,并通过抑制PI3K/Akt信号通路激活,诱导人胃癌SGC-7901细胞发生凋亡。

酪氨酸激酶抑制剂在HER2阳性乳腺癌中应用的可视化分析

目的分析酪氨酸激酶抑制剂(TKIs)治疗人表皮生长因子受体2(HER2)阳性乳腺癌的研究现状、热点和发展趋势。方法在Web of Science核心合集数据库中检索TKIs治疗HER2阳性乳腺癌的相关文献,使用CiteSpace 6.1.R3软件对发文作者、国家/地区、机构、学科领域、期刊、关键词进行可视化分析。结果共纳入732篇文献,发文量呈逐年上升趋势,以美国发文最多(中心度0.10),我国发文量排第2位(中心度0.05)。发文量和被引频次最多的作者分别是澳大利亚圣文森特大学医院的Crown和美国加州大学洛杉矶分校的Slamon;发文量最多的机构是美国得克萨斯大学安德森癌症中心,最多的期刊是美国Journal of Clinical Oncology;研究热点主要集中在HER2阳性乳腺癌治疗药物、TKIs作用受体、TKIs作用机制、HER2阳性乳腺癌脑转移、TKIs临床研究5个方面;前沿领域和发展趋势主要为TKIs与其他药物或治疗手段联用以增强靶向性并降低毒副作用。结论TKIs治疗HER2阳性乳腺癌的研究受到国内外学者的重视。我国学者和研究团队未来需要加强合作交流,可从TKIs单用及联合用药治疗HER2阳性乳腺癌的疗效及安全性方面加强与其他国家的合作。

N,N-2-[2-(1,3-二氧戊环)-2-乙基]甘氨酸酯的合成

以甘氨酸酯盐酸盐为原料,经与2-(2-溴乙基)-1,3-二氧戊环反应,得到新型透皮吸收促渗剂N,N-2-[2-(1,3-二氧戊环)-2-乙基]甘氨酸甲酯和N,N-2-[2-(1,3-二氧戊环)-2-乙基]甘氨酸乙酯。通过FT-IR、HPLC-MS和1HNMR确证了相关化合物的结构。

脯氨酰羟化酶抑制剂对PC12细胞SDF-1α表达的影响

目的研究脯氨酰羟化酶抑制剂对基质细胞衍生因子-1α(stromal cell-derived factor-1 alpha,SDF-1α)表达的影响及可能的机制。方法体外培养PC12细胞,予以不同浓度氯化钴(CoCl_2)、去铁胺(DFO)、二甲基乙二酰基甘氨酸(DMOG)处理。CCK-8法检测细胞活性,RT-PCR检测药物诱导后细胞内SDF-1αmRNA的表达,Western印迹法和ELISA法分别检测低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor 1α,HIF-1α)、SDF-1α蛋白表达。结果 CCK-8法结果显示,低浓度CoCl_2能够促进PC12细胞的增殖能力,但随着浓度增高,DFO、CoCl_2、DMOG均能使细胞增殖能力降低。RT-PCR结果显示,DFO、CoCl_2、DMOG各组细胞内SDF-1αmRNA表达减少。Western印迹法结果显示,CoCl_2、DFO和DMOG组HIF-1α表达量较对照组显著增高。ELISA法结果显示,CoCl_2、DFO、DM OG组SDF-1α水平均显著下降。结论脯氨酰羟化酶抑制剂CoCl_2、DFO和DMOG均可上调HIF-1α的表达,下调SDF-1α的表达。

天然蛋白酪氨酸磷酸酶-1B抑制剂的研究进展

蛋白酪氨酸磷酸酶-1B (PTP1B)是胰岛素信号转导途径中重要的负调控因子。PTP1B通过使胰岛素受体及其底物的酪氨酸残基去磷酸化从而破坏胰岛素信号转导。近年来,作为治疗2型糖尿病的新靶点,有关PTP1B抑制剂的研究引起了广泛关注。中国有丰富的植物资源,通过对天然产物进行提取,可以获得一些有活性的PTP1B抑制剂。高效PTP1B抑制剂的发现可以为2型糖尿病的治疗提供新的途径。本文根据PTP1B抑制剂的结构类型,综述了一些具有代表性的天然PTP1B抑制剂的研究进展,包括溴酚类化合物,黄铜化合物,萜类化合物,香豆素类化合物等。表明深入研究PTP1B及其有效的抑制剂对于治疗2型糖尿病具有很好的发展前景。