脂肪组织甘油三酯水解酶参与脂肪分解调控

循环中游离脂肪酸增高与肥胖、胰岛素抵抗和2型糖尿病密切相关,其主要来源于脂肪细胞内甘油三酯水解。调控脂肪分解的脂肪酶主要包括激素敏感脂肪酶(hormone-sensitive lipase,HSL)和最近发现的脂肪组织甘油三酯水解酶(adipose triglyceride lipase,ATGL),后者主要分布在脂肪组织,特异水解甘油三酯为甘油二酯,其转录水平受多种因素调控。CGI-58(属于α/β水解酶家族蛋白),可以活化ATGL,基础条件下该蛋白和脂滴包被蛋白(perilipin)紧密结合于脂滴表面,蛋白激酶A激活刺激脂肪分解时,CGI-58与perilipin分离,进而活化ATGL。

肿瘤坏死因子α诱导的胰岛素抵抗对小鼠脂肪甘油三酯水解酶的影响

目的探讨肿瘤坏死因子α（TNF-α）诱导的胰岛素抵抗（IR）对糖脂代谢及脂肪甘油三酯水解酶（ATGL）的影响。方法健康雄性C57BL／6J小鼠随机分为2组，分别给予腹腔注射TNF-α6μg·kg^-1·d^-1（TNF组，20只）和等体积生理盐水（NC组，20只）共7d。采用2-脱氧-^3H葡萄糖（2-DOG）为示踪剂的扩展胰岛素钳夹技术评价小鼠胰岛素敏感性和糖代谢变化，用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）和蛋白质印迹法分别测定代谢相关基因ATGL、激素敏感性脂酶（HSL）、过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）等组织mRNA或血浆蛋白表达水平的变化。结果TNF-α处理后，小鼠空腹血糖（FBG）、血浆胰岛素和游离脂肪酸（FFA）水平均增高。在胰岛素钳夹术中，TNF组血浆胰岛素水平明显高于NC组[（341．7±17．7）vs（84．7±5．5）mU／L，P〈0．01]，胰岛素对FFA的抑制作用明显障碍[FFA，TNF组：（0．82±0．03）mmol／L，NC组：（0．43±0．07）mmol／L，P〈0．01]。TNF组葡萄糖输注率（GIR）明显低于NC组[（39．1±2．3）vs（54．2±2．2）mg·kg^-1·min^-1，P〈0．01]，骨骼肌葡萄糖摄取率（MGU）也明显低于NC组[（15．8±1．7）vs（20．9±2．5）μmol·100g^-1·min^-1，P〈0．01]。TNF组脂肪组织ATGL mRNA表达明显低于对照组（0．85±0．09vs1．37±0．12，P〈0．01），ATGL蛋白水平也明显低于对照组（0．53±0．03vs0．65±0．05，P〈0．05）。TNF组小鼠脂肪组织PPARγ mRNA表达明显低于对照组（0．83±0．07VS1．07±0．07，P〈0．05）。结论在TNF-α诱导的IR中，ATGL在脂代谢相关通路中起着调控作用。

脂肪甘油三酯水解酶的研究进展

胰岛素抵抗等代谢疾病的发生与脂代谢紊乱密切相关。细胞中的脂肪主要储存在一个以中性脂为核的细胞器——脂滴(lipid droplet,LD)中。脂肪甘油三酯水解酶(adiposetriglyceride lipase,ATGL)是在脂滴上发现的水解甘油三酯的脂肪酶。除脂肪组织外,ATGL也广泛存在于骨骼肌等多种非脂肪组织中,并发挥着重要的生理功能。越来越多的研究表明,ATGL与中性脂质贮存异常、胰岛素抵抗等代谢疾病密切相关。运动可以通过改变ATGL的表达起到调控脂代谢的作用,进而在防治胰岛素抵抗等代谢疾病中发挥作用。

利拉鲁肽通过脂肪甘油三酯水解酶通路改善肝细胞脂肪变性

目的 研究胰高血糖素样肽1（GLP-1）类似物利拉鲁肽是否通过脂肪甘油三酯水解酶（ATGL）通路改善肝细胞脂肪变性及其机制.方法 体外培养人类肝癌细胞系HepG2细胞随机分为：正常对照组（NC组）、脂肪变性肝细胞模型组（M组）、利拉鲁肽组（L组）、一磷酸腺苷活化蛋白激酶（AMPK）抑制剂（Compound C）＋利拉鲁肽组（CC组）.其中M组选择0.5 mmol/L游离脂肪酸（FFAs）24 h诱导细胞脂肪变性;L组选择100 nmol/L利拉鲁肽干预脂肪变性肝细胞模型24 h;CC组为添加10 mmol/L Compound C的脂肪变性肝细胞模型再以100 nmol/L利拉鲁肽干预.Western blotting法检测各组肝细胞中磷酸化AMPK（p-AMPK）、AMPK、磷酸化雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）、雷帕霉素靶蛋白（mTOR）及ATGL蛋白表达.组间数据比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验.结果 与NC组相比,M组细胞内p-AMPK/AMPK、ATGL水平下降,p-mTOR/mTOR水平升高（分别为0.208±0.069比0.444±0.106、0.112±0.038比0.333±0.052、0.421±0.105比0.126±0.041,t=3.620、5.900、5.060,均P〈0.05）;与M组相比,L组p-AMPK/AMPK及ATGL水平显著性升高,p-mTOR/mTOR水平显著性降低（分别为0.391±0.076比0.208±0.069、0.233±0.058比0.112±0.038、0.230±0.066比0.421±0.105,t=2.810、3.218、3.281,均P〈0.05）;CC组较L组肝细胞内p-AMPK/AMPK及ATGL水平显著性降低,p-mTOR/mTOR水平显著性升高（分别为0.234±0.061比0.391±0.076、0.144±0.030比0.233±0.058、0.366±0.058比0.230±0.066,t=2.414、2.360、2.334,均P〈0.05）.结论 利拉鲁肽可能通过激活AMPK-mTOR信号通路,增加肝细胞内ATGL蛋白表达水平,从而降低脂肪变性肝细胞内脂滴和TG含量,改善肝细胞脂肪变性.

外周血单核细胞甘油三酯水解酶的表达与代谢综合征的相关性

目的探讨代谢综合征(MS)患者外周血单核细胞(PBMC)中甘油三酯水解酶(ATGL)的表达与MS的关系。方法选取2010年5月至2011年9月于心内科住院及门诊就诊的MS患者56例(MS组),同时选取健康查体志愿者55例为正常对照组,检测并记录一般资料及血生化指标。采用实时荧光定量PCR检测患者外周血单核细胞ATGL mRNA表达;高频超声检测患者颈动脉内膜中层厚度,测量并计算颈动脉压力弹性系数和颈动脉僵硬度;参数间行Pearson线性相关及多元线性逐步回归分析确定参数之间的变化依存关系。结果与对照组相比,MS组外周血单核细胞ATGL mRNA表达显著增加[(7.04±3.66)vs(2.25±1.69),P<0.001],多元线性回归结果显示,年龄、甘油三酯(TG)和胰岛素抵抗指数是ATGL mRNA表达增加的独立危险因素;MS组颈动脉内膜中层厚度增加[(0.89±0.19)mm vs(0.56±0.12)mm,P<0.001]。多元线性回归结果显示,TG升高和ATGL mRNA表达增加是颈动脉内膜中层厚度增加的独立危险因素。结论 MS患者外周血单核细胞中ATGL mRNA的表达与MS发生发展及血管损伤密切相关。

小檗碱对3T3-L1脂肪细胞炎症因子、脂肪因子及脂肪酸代谢的影响

目的：观察小檗碱对3T3-L1脂肪细胞炎症因子、脂肪因子及脂肪酸代谢的影响，探讨小檗碱改善胰岛素抵抗的分子机制。方法3T3-L1脂肪细胞经不同浓度小檗碱（0、5、10、20和40μmol/L）处理24 h后，采用qRT-PCR技术检测相关因子mRNA表达水平，包括白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、瘦素、脂联素和内脂素以及脂肪酸合酶（FAS）、乙酰辅酶A羧化酶（ACC）、脂肪组织甘油三酯水解酶（ATGL）、脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白（AFABP）。同时用10μmol/L小檗碱分别处理脂肪细胞0、4、8、24、48 h后，以相同方法测定上述指标mRNA表达水平。结果10-40μmol/L小檗碱剂量组的脂肪细胞内IL-6、TNF-α、瘦素、FAS、ATGL、AFABP mRNA表达水平均低于0μmol/L组，内脂素mRNA高于0μmol/L组（P〈0.05），各组间脂联素mRNA表达无明显差异（P〉0.05）。8-48 h时间处理组细胞内IL-6、TNF-α、瘦素、AFABP、ATGL、FAS mRNA表达水平均低于0 h组，内脂素mRNA水平高于0 h组（P〈0.05）。脂联素mRNA表达水平仅在48 h处理组降低（P〈0.05）。各组间ACC mRNA表达无明显差异（P〉0.05）。结论小檗碱能影响3T3-L1脂肪细胞炎症因子、脂肪因子和关键脂肪酶及蛋白mRNA的表达，且呈时间、剂量依赖效应，这可能是其改善胰岛素抵抗的重要分子机制。

草鱼ATGL基因的表达及饲喂n-3 HUFAs对其的影响

实验获得了草鱼脂肪组织甘油三酯水解酶（ATGL）部分cDNA序列（GenBank登录号为HQ845211）,并进行了序列同源性分析;采用实时定量反转录聚合酶链式反应（qRT-PCR）方法,检测了ATGL基因在草鱼不同组织的表达状况;研究了投喂n-3高不饱和脂肪酸（n-3 HUFAs）对草鱼肝胰脏ATGL基因时序表达的影响。结果显示,所获得的草鱼ATGL基因部分cDNA序列长度为687 bp,与人、牛、小鼠、长腭泥虎鱼、大黄鱼等物种的同源性为65%~75%;该基因在草鱼心脏、肝胰脏、脾脏、鳃、肾脏、肌肉、腹腔脂肪组织、脑、小肠、精巢10个组织中均有表达,其中在腹腔脂肪组织中表达丰度最高,在肝胰脏和肌肉中表达丰度次之。处理组草鱼摄食n-3 HUFAs饲料后,ATGL基因的表达水平在第1周和第2周显著高于对照组,第3周后,该基因的表达水平在处理组与对照组间无显著差异。研究首次克隆得到草鱼ATGL基因部分cDNA序列,并发现该基因在草鱼脂质蓄积及代谢较旺盛的组织中表达水平较高,且其在肝胰脏中的表达受到n-3 HUFAs的影响,其规律为先被诱导升高,然后回复到正常水平。

脂酶的医学研究进展

脂酶是由 44 9个氨基酸残基组成的单链糖蛋白 ,分子量为 46 0 0 0 5 6 0 0 0D。脂酶存在于胰、小肠和多种其它组织中。胰腺组织中的脂酶浓度是血清中的 5 0 0 80 0倍。脂酶的最适合pH在 7.410 .0之间 ,等电点 pI由于酶的形式不同有5 .80 ,5 .85几种。电泳分析证实正常血清中脂酶分为两个同工酶带 ,胰腺炎时则可分为四个同工酶带。脂酶的测定可采用光电比色、比浊、免疫和荧光测定等多种测定方法 ,目前各种测定方法的灵敏度都较高 ,而特异性的变化则较大。目前脂酶已广泛应用于急性胰腺炎的诊断 ,而脂酶的升高亦据报道与癌症。

ATGL调节细胞内脂质代谢和代谢相关疾病

脂肪组织甘油三酯水解酶(adipose triglyceride lipase,ATGL)是一种催化甘油三酯第一步水解的重要脂肪酶,在机体能量代谢调节中发挥重要作用.本文介绍了ATGL的基因和蛋白质结构,并详细综述了ATGL的功能调控和与其相关联疾病的研究进展,最后通过与激素敏感脂肪酶(HSL)比较,对ATGL的特征进行总结.