产甘油假丝酵母甘油分解代谢CgGCY1、CgGCY2和CgDAK基因的克隆、敲除及其功能

产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes)能够利用甘油大量生长菌体而无有机酸、醇等代谢物积累,是潜在的优良宿主细胞.为了解C.glycerinogenes甘油分解代谢途径,成功克隆得到二羟基丙酮(DHA)途径的编码基因Cg GCY1、Cg GCY2和Cg DAK.利用"Ura-Blaster"敲除盒分别构建的缺失突变菌Cggcy1?/gcy2?和Cgdak?均不能在甘油培养基中生长.q RT-PCR及酶活测定结果显示,与葡萄糖培养相比,甘油培养下细胞通过强化糖异生、HMP途径积累生物量,下调EMP途径和副产物合成关键酶表达以弱化有机酸、醇的合成,同时上调TCA循环以补偿EMP途径下调带来的能量和还原力不足,使得生物量提高24.5%而不积累有机酸、醇等代谢物.以甘油为共底物进行木糖发酵,木糖醇产量和转化率达到39.4 g/L和89%,与葡萄糖为共底物相比分别提高了79%和32.8%.本研究表明C.glycerinogenes甘油分解代谢仅依赖于DHA途径,以甘油为共底物更有利于木糖醇的合成和转化;结果可为代谢改造C.glycerinogenes以甘油为共底物合成高附加值化合物打下基础.

思维导图在中医药《生物化学》教学中的应用

《生物化学》的教学中包含较多枯燥抽象的代谢反应。如何在有限的课时内让本身基础薄弱的中医药学生取得更好的学习效果,是所有中医药院校的《生物化学》教师面临的实际问题。本文提出将符合人类大脑思维方式、可使大脑思维过程可视化的工具(思维导图)运用于中医药《生物化学》教学活动中,并以甘油三酯分解代谢的教学为例,基于思维导图来进行教学设计研究,并引导学生以思维导图为学习工具,增强其归纳总结信息的能力,从而提高中医药《生物化学》课堂教与学的效果,为中医药院校的《生物化学》教师提供如何在教学过程中引导学生运用思维导图的教学实施策略。