特拉唑嗪:通过调节磷酸甘油酸酯激酶1防治帕金森病

特拉唑嗪(terazosin,TZ)作为哌唑嗪的衍生物,是长效选择性α1肾上腺受体阻滞剂,因其水溶性好,生物利用度高,半衰期长,在临床上广泛运用于高血压和良性前列腺增生的治疗。近期研究发现,TZ在特定剂量范围时能激活细胞内的磷酸甘油酸酯激酶1(Phosphoglycerate kinase1,Pgk1)保护神经细胞、防治帕金森病,该作用可能与其通过激活Pgk1改善细胞能量代谢、提高细胞内三磷酸腺苷浓度和激活热休克蛋白90相关。这提示特拉唑嗪类药物新的临床应用前景。本文将就TZ新发现的药理机制和潜在的临床运用前景等方面的研究进展进行回顾和总结,并探讨未来可能的研究方向。

子痫前期发生的危险因素及磷酸甘油酸酯激酶1和重度子痫前期的相关性分析

目的:子痫前期发生的危险因素及磷酸甘油酸酯激酶1(PGK1)和重度子痫前期的相关性分析。方法:选择2021年1月—2023年1月在青岛大学附属山东省妇幼保健院规律产检的72例子痫前期孕妇作为观察组,将观察组中35例重度子痫前期患者纳入重度组(孕20周后舒张压≥110 mmHg或收缩压≥160 mmHg或尿蛋白≥2.0 g/24 h,1 mmHg=0.133 kPa),将剩余37例患者纳入轻度组;另选择40例健康孕妇纳入对照组进行回顾性研究。检测三组的PGK1及糖脂代谢情况,采用多因素logistic回归分析子痫前期发生的危险因素,应用Pearson相关系数分析PGK1表达与重度子痫前期发生的相关性。结果:观察组抵抗素、总胆固醇(TC)、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、内脂素、糖化血红蛋白(HbA1c)、甘油三酯(TG)及PGK1表达水平显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);重度组抵抗素、TC、FPG、FINS、内脂素、HbA1c、TG及PGK1表达水平显著高于轻度组,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,抵抗素、TC、FPG、FINS、内脂素、HbA1c、TG及PGK1表达升高是子痫前期发生的危险因素(P<0.05)。Pearson相关系数结果显示,孕妇PGK1与重度子痫前期的发生呈正相关(r=0.654,P<0.001)。结论:孕妇发生子痫前期时糖代谢紊乱,PGK1表达异常,随着病情严重程度的增加PGK1呈增高趋势,PGK1表达与重度子痫前期的发生密切相关。

一个新的前列腺癌细胞系分泌蛋白磷酸甘油酸酯激酶的鉴定与分析

目的:建立前列腺癌细胞系C4-2B分泌蛋白双向电泳图谱,并对感兴趣的蛋白进行质谱鉴定,对其表达调控进行初步分析。方法:收集前列腺癌细胞系C4-2B的分泌蛋白,利用双向电泳结合质谱的方法对感兴趣的蛋白进行鉴定,而后利用Western blot等方法对结果进行验证和分析。结果:得到较为稳定的前列腺癌细胞系分泌蛋白C4-2B双向电泳图谱,鉴定了一个新的前列腺癌细胞系分泌蛋白磷酸甘油酸酯激酶,并发现1nmol/L人工合成雄激素R1881可上调其表达。结论:建立了简便的前列腺癌细胞系分泌蛋白双向电泳及质谱分析的研究方法,初步证明磷酸甘油酸酯激酶是前列腺癌细胞系C4-2B新的分泌蛋白,且人工合成雄激素R1881可诱导其表达上调。

1，6—亚己基二缩水甘油酸酯的不对称合成

光学活性的缩水甘油酸钾（4）是不对称合成的重要试剂，在设计和合成新的神经肌肉阻断剂过程中，用1，6－亚己基二甲磺酸酯和（4）（1：2）在18－冠醚－6和HMPA中反应，分别制得光学活性的对称1，6－亚己基缩水甘油酸酯（6b)和（6c)，不对称的1，6－亚己基缩水甘油酸酯（6a)的合成分二步进行，首先用（4a)和1，6－亚己基二磺酸酯（1：1）和TEBA和二氯甲烷中反应制得（5），（5）再和（4b)在18－冠醚－6和HMPA中反应制得（6a)。在合成过程中，若将（5)和（4b)在TEBA和二氯甲烷中反应，除得到（6a)外，还得到一个手性的氯代亚己基单缩水甘油酸酯（7）。

所谓肺硬化性血管瘤组织中两种主要细胞的雄激素受体、磷酸甘油酸酯激酶基因多态性分析

目的探讨所谓肺硬化性血管瘤(PSH)组织内的多角形细胞和表面立方细胞的克隆性组成及意义。方法选PSH患者手术切除标本19例,其中女性17例。石蜡切片HE染色,应用激光捕获显微切割技术获取PSH组织中多角形细胞和表面立方细胞,分别提取基因组DNA,用甲基化敏感的限制性内切酶HhaⅠ或HpaⅡ消化,巢式聚合酶链反应扩增X染色体连锁的雄激素受体(AR)基因及磷酸甘油酸酯激酶(PGK)基因。AR基因产物经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染显示其长度多态性;PGK基因产物经BstⅪ消化后,琼脂糖电泳显示其酶切位点的多态性。结果17例女性PSH组织,扩增成功AR基因及PGK基因的多态性分别为53%(8/15)和27%(4/15)。对适合于检测的10例标本分别进行AR、PGK位点克隆性分析,所有标本均表现为相同的一条等位基因带完全消失(克隆率=0)或不均衡的甲基化模式(克隆率<0·25)。结论PSH组织中的多角形细胞和表面立方细胞具有相同的单克隆增生模式,提示二者可能均为肿瘤的实质细胞。

刚地弓形虫磷酸甘油酸酯变位酶2基因编码蛋白主要特性与抗原表位的生物信息学分析

目的从生物信息学角度分析刚地弓形虫磷酸甘油酸酯变位酶2(TgPGAM2)基因编码蛋白的结构与抗原表位,预测该蛋白的免疫原性。方法利用蛋白分析专家系统(ExPASy)提供的ProtParam、SOSUI、TMHMM、HNN、MotifScan,NCBI上的ORF finder、SignalP、Bcepred等生物信息学在线分析程序,结合Gene Runner、DNAMAN等生物信息学软件,分析、预测TgPGAM2蛋白的理化性质、可溶性、表面可及性?可塑性,信号肽,跨膜区,翻译后修饰位点、亲(疏)水性、二级结构、抗原表位等。结果该蛋白由264个氨基酸组成,分子式为C1345H2097N363O385S11,分子质量为29.865 3 ku,等电点理论值为6.46,波长280 nm时的吸光度(A)值为1.697,半衰期为30 h,有10个表面可及性参数≥1.9的区域、3个亲水性参数得分≥1.9的区域、3个柔韧性参数得分≥2的区域、8个翻译后修饰位点、16个潜在抗原表位,为可溶性表达蛋白。结论刚地弓形虫PGAM2基因编码的Tg PGAM2为可溶性蛋白,具有免疫原性,可作为弓形虫病疫苗候选抗原。

近红外光谱法检测甘油酸酯及游离脂肪酸

用近红外光谱分析方法对植物油中的甘油单酯,甘油二酯,甘油三酯和游离脂肪酸进行检测。采集77个油脂样品近红外光谱数据,其中67个样品为定标集,10个样品为预测集。用OPUS化学分析软件建立了偏最小二乘的优化模型。结果显示甘油单酯、甘油二酯、甘油三酯和游离脂肪酸的决定系数(R2)分别为0.9691、0.8627、0.8742和0.9194;4个组分的预测标准偏差(SEP)分别为0.0104、0.183、0.201和0.0106。结果表明,近红外光谱分析方法可用于对甘油二酯和甘油三酯的检测,对于甘油单脂和游离脂肪酸的检测,还需进一步实验验证。

粘质沙雷氏菌脂肪酶的固定化及催化拆分反式3-(4’-甲氧苯基)缩水甘油酸甲酯

对粘质沙雷氏菌脂肪酶进行了固定化研究,确定硅藻土和环氧树脂EupergitC是较好的固定化载体.固定化后酶的热稳定性、pH稳定性及储存稳定性均明显提高.以EupergitC共价固定的脂肪酶,其操作稳定性比硅藻土吸附酶好,重复使用10批次后,剩余酶活力还有50%左右,戊二醛交联对EupergitC固定化酶稳定性的提高没有明显效果,而硅藻土吸附酶经戊二醛交联后稳定性有所提高,经5批次反应后剩余酶活力还有50%.使用交联后的硅藻土固定化酶(1g,200U),在两相搅拌反应器(工作体积200ml,甲苯∶水体积比=1)中对地尔硫卓手性前体(±)-反式3-(4’-甲氧苯基)缩水甘油酸甲酯((±)-MPGM)(有机相浓度为0.5mol/L)进行了催化拆分,经5批次反应后,共得纯(2R,3S)-(-)-MPGM18.6g,产品光学纯度(对映体过量)>99%,总收率为37.2%.

从D-甘露糖醇制备(R)和(S)-3,3-二甲基-2,3-O-异亚丙基甘油酸甲酯

本文提出了一种由D-甘露糖醇出发合成一对高光学纯度的异亚丙基保护的3.3-二甲基甘油酸甲酯2a和2b的有效方法.

共轭亚油酸甘油酯的合成研究概况

共轭亚油酸甘油酯具有优良的生理和营养功能,性质稳定,并有优异的亲脂性,受到人们的日益重视。共轭亚油酸甘油酯叙述了共轭亚油酸甘油酯的合成技术研究概况,主要通过酯化反应、酯交换反应制得。认为目前应用固定化脂肪酶合成共轭亚油酸甘油酯的研究较少,开发一种具有位置专一性、结构专一性的高活性的固定化脂肪酶是今后合成共轭亚油酸低级甘油酯的研究方向。

Canola油氢化时甘油三酸酯中不同位置脂肪酸的反应速度

Canola油在选择性条件和非选择性条件下进行氢化,不同氢化时间的甘油三酸酯经胰脂酶水解后经TLC分离出甘油一酸酯。分别测定甘油三酸酯和甘油一酸酯的组成及反式异构体的含量。甘油酸酯的2—位和1,3—位上的脂肪酸的氢化反应速度是相同的且为一级反应。对于Canola油而言,由于其2—位上亚油酸含量较高,因而其含量的变化亦大于1,3—位。在非选择性氢化条件下,2—位上反式异构体的生成速度略低于1,3—位。本文还报导了2—位和1,3—位的亚油酸氢化选择性的测定结果。

子宫内膜癌患者组织内PGK1、VEGF-C表达与病理特征和预后的关系

目的探讨子宫内膜癌患者组织内磷酸甘油酸酯激酶1(PGK1)、血管内皮生长因子-C(VEGF-C)表达与病理特征和预后的关系。方法回顾性选取2017年5月至2020年5月榆林市第一医院收治的106例子宫内膜癌患者作为研究对象。采用免疫组化染色法检测子宫内膜癌患者癌组织与癌旁组织内PGK1、VEGF-C表达,比较子宫内膜癌患者癌组织与癌旁组织PGK1、VEGF-C表达。比较不同病理特征子宫内膜癌患者癌组织内PGK1、VEGF-C表达;采用Kaplan-Meier生存曲线分析不同PGK1、VEGF-C表达患者的预后情况。结果子宫内膜癌患者癌组织中PGK1高表达、VEGF-C阳性患者比例显著高于癌旁组织(P<0.05)。PGK1高表达患者低分化、FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期和有淋巴结转移患者比例显著高于PGK1低表达患者(P<0.05),VEGF-C阳性患者FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期和有淋巴结转移患者比例显著高于VEGF-C阴性患者(P<0.05)。106例子宫内膜癌患者3年生存率为79.25%(84/106);Kaplan-Meier生存曲线结果显示,子宫内膜癌组织PGK1高表达患者3年生存率[67.44%(29/43)]显著低于PGK1低表达患者[87.30%(55/63)],差异有统计学意义(Log-Rankχ^(2)=7.513,P<0.01);VEGF-C阳性患者3年生存率[75.00%(60/80)]显著低于VEGF-C阴性患者[92.31%(24/26)],差异有统计学意义(Lo-Rankχ^(2)=6.527,P<0.01)。结论PGK1、VEGF-C水平与子宫内膜癌的发生和发展密切相关,PGK1高表达、VEGF-C阳性患者疾病进展更严重,预后更差。

混合溶剂中冠醚催化作用的Darzens酯缩合

本文着重研究了在混合溶剂中用冠醚作催化剂所进行的Darzens反应,并合成了四个芳族缩水甘油酸酯类化合物.结果表明:采用无水乙醇与石油醚为混合溶剂,以DB-18-C-6作催化剂,能使产率明显提高,产物经元素分析和红外光谱与核磁共振谱鉴定,均与文献报道相符合.此外,还对影响产率的可能机理进行了讨论.

核糖体蛋白S24对人颈动脉粥样硬化的影响及机制

目的研究核糖体蛋白S24(RPS24)对人颈动脉斑块血管新生的作用以及对磷酸甘油酸激酶1(PGK1)的调控。方法采用免疫印迹(Western blot)方法检测人体颈动脉稳定斑块组织(稳定组)和易损斑块组织(易损组)中的RPS24和PGK1蛋白表达水平。体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),将细胞分为对照组和RPS24小干扰RNA(siRNA)组(siRNA组),进行成小管实验,分别检测两组细胞形成小管的数量和总长度,采用Western blot法检测两组细胞培养上清液中RPS24和PGK1的蛋白表达量。结果易损组人颈动脉斑块组织中RPS24蛋白表达水平明显高于稳定组,而PGK1蛋白表达水平则明显低于稳定组,差异具有统计学意义(t=47.50、39.06,P<0.05)。siRNA组细胞形成小管的数量和总长度明显低于对照组(t=9.80、25.74,P<0.05)。siRNA组细胞培养上清液中RPS24蛋白表达量显著低于对照组,而PGK1蛋白表达量则显著高于对照组(t=36.15、28.18,P<0.05)。结论RPS24通过抑制PGK1的表达来促进颈动脉斑块的新血管生成,抑制RPS24的表达可能是治疗颈动脉易损斑块的新选择。

磷酸甘油酸变位酶5在糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用:与线粒体质量的关系

目的评价磷酸甘油酸变位酶5(PGAM5)在糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用及其与线粒体质量的关系。方法SPF级健康雄性SD大鼠,6~8周龄,体重200~220 g,采用腹腔注射1%链脲佐菌素-柠檬酸盐缓冲液60 mg/kg的方法制备大鼠1型糖尿病模型。糖尿病造模成功后继续饲养8周,取1型糖尿病大鼠72只,采用随机数字表法分为4组(n=18):糖尿病假手术组(DS组)、糖尿病心肌缺血再灌注组(DIR组)、糖尿病心肌缺血再灌注+AAV9-PGAM5 shRNA组(DIR+PGAM5 shRNA组)和糖尿病心肌缺血再灌注+AAV9-GFP组(DIR+GFP组)。糖尿病建模后8周,采用结扎左冠状动脉前降支30 min后再灌注2 h的方法制备大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。DIR+PGAM5 shRNA组和DIR+GFP组缺血前3周尾静脉缓慢注射AAV9-PGAM5 shRNA和AAV9-GFP 2×10^(12)μg/kg。AAV9-PGAM5 shRNA组再灌注2 h时记录左心室收缩压(LVSP)和左心室收缩压上升和下降最大速率(±dp/d_(tmax)),随后采集右颈动脉血样,采用ELISA法检测血清cTnI、CK-MB和LDH水平,随后处死大鼠取心脏,双重染色法确定心肌梗死面积,HE染色法观察心肌组织病理学结果,Western blot法检测PGAM5、自噬相关蛋白LC3B、p62、动力相关蛋白1(Drp1)及线粒体自噬受体蛋白FUNDC1的表达。结果与DS组比较,DIR组和DIR+GFP组LVSP和±dp/d_(tmax)降低,血清cTnI、CK-MB和LDH水平升高,心肌梗死面积增加,PGAM5、LC3B、Drp1和FUNDC1表达上调,p62表达下调(P<0.05);与DIR组比较,DIR+PGAM5 shRNA组LVSP和±dp/d_(tmax)升高,血清cTnI、CK-MB和LDH水平降低,心肌梗死面积减小,PGAM5、LC3B、Drp1和FUNDC1表达下调,p62表达上调(P<0.05),DIR+GFP组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论PGAM5参与了糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤的过程,与降低线粒体质量有关。

鱼鳞营养成分的分析及对高脂饲料大鼠血脂水平的影响

报道了我国几种淡水鱼鱼鳞基本化学组成 ,并考察了鱼鳞对高脂饲料大鼠甘油三酸酯 (TG)和总胆固醇 (TC)的影响。结果表明 ,鱼鳞粗蛋白质含量为 4 0 %～ 80 % ,糖、脂肪含量极低 ;氨基酸组成中 ,甘氨酸含量极高 ,并含有较多的天冬氨酸、谷氨酸、丙氨酸、精氨酸、脯氨酸、羟脯氨酸。矿物元素以钙、磷含量较高。鱼鳞可有效防止大鼠实验性高胆固醇血症 。

鲤脑垂体和HCG诱导雌性日本鳗鲡性腺成熟过程中血清生化成分的变化

使用鲤脑垂体和HCG对雌性日本鳗鲡人工催熟,用临床医学检验方法,测定分析了雌性日本鳗鲡卵巢发育过程中,血清总蛋白(TP)、血清甘油三脂(TG)、血清胆固醇(TC)、血糖(Glu)、血钙(Ca)和血清无机磷(P)6项生化指标的水平及变化趋势,并与对应的不同卵巢发育阶段的性腺成熟系数(GSI)进行比较分析。结果表明,84d的注射过程中,实验组的性腺逐渐成熟,GSI显著升高,第12针时达到46.32%±1.75%;而对照组性腺GSI一直在2.42%±0.18%。实验组和对照组血清TP水平相对平稳,各组变化无显著差异(P>0.05)。实验组和对照组血脂在56d前差异显著(P<0.05):实验组血清TG,TC一直维持较高水平,平均分别为(12.67±2.83)mmol/L和(15.54±3.01)mmol/L;对照组TG和TC一直下降且水平较低,平均分别为(6.33±4.14)mmol/L和(8.53±3.30)mmol/L。实验组和对照组血清Glu均在实验初的较低水平基础上持续上升。相关分析表明,实验组血清TG与GSI水平极显著负相关(r=0.732,n=6,P<0.01)。实验组血清Ca与GSI(r=0.961,n=6,P<0.01),血清P与GSI(r=0.775,n=6,P<0.01)都呈现出极显著的相关性:血清Ca和P在28d后持续上升,GSI逐渐增大。对照组中的血清Ca和P水平则一直维持在一个较低的水平。研究结果表明:雌性日本鳗鲡卵巢发育与其脂类代谢密切相关,无机离子(Ca,P)在此过程中起到重要作用。利用繁殖鱼体营养代谢特点,检测日本鳗鲡血脂或血清Ca和P水平,可成为初步判断雌性日本鳗鲡发育情况的新方法。

α晶型甘油一酸酯凝胶在焙烤食品中的应用

对甘油一酸酯进行调配，制作成具有活性α晶体类型的凝胶形式，可以在相当程度上提高这种常用乳化剂在焙烤食品中的应用效果，通过Ｘ－衍射法和红外光谱法鉴定，处于α晶型的甘油一酸酯可以在增力。焙烤食品比容、改善口感、延缓陈化等方面起到良好作用，效果要优于普通的粉末形式的甘油一酸酯，此研究可以为提高食品乳化剂的使用效果。

PGAM1和Ki67在脑胶质瘤中的表达及意义

目的探讨脑胶质瘤组织中磷酸甘油酸变位酶1(PGAM1)和Ki67蛋白的表达情况及其与临床病理特征的相关性。方法收集2014年1月—2018年12月行手术治疗并经病理确诊为脑胶质瘤的83例患者肿瘤组织标本和10例正常的脑组织标本(对照组)。对标本进行HE染色,观察脑组织的病理形态变化,通过免疫组织化学方法检测脑组织中PGAM1和Ki-67蛋白的表达情况,分析其表达与患者临床病理特征的关系。结果HE染色结果显示对照组脑组织细胞分布均匀,未见异型性细胞,脑胶质瘤组随着级别升高,细胞数量增多,细胞异型性也越明显。免疫组织化学方法检测结果显示,两组脑组织中PGAM1和Ki-67蛋白的表达差异有显著性(χ^(2)=21.029、28.105,P<0.05)。PGAM1和Ki67表达与肿瘤病理分级密切相关,高级别胶质瘤组织中PGAM1和Ki67蛋白的表达显著高于低级别胶质瘤组织(χ^(2)=14.906、20.415,P<0.05),与患者性别、年龄及肿瘤原发位置无关(P>0.05)。脑胶质瘤组织中PGAM1高表达、低表达组组间Ki67阳性指数比较差异具有显著性(Z=-3.038,P<0.05)。Kaplan-Meier分析结果显示,脑胶质瘤组织中PGAM1和Ki67表达水平越高,患者的总生存期越短(χ^(2)=4.363、11.370,P<0.05)。结论PGAM1可能参与脑胶质瘤的发生发展过程,有望作为判断脑胶质瘤预后的指标和潜在的治疗靶点。