甘肃金鳟遗传资源评价及其与日本金鳟和道氏虹鳟遗传分化研究

为分析甘肃金鳟遗传资源状况,研究利用18个微卫星DNA标记,对甘肃金鳟、日本金鳟和道氏虹鳟3群体各50尾个体进行了遗传分析,以评价甘肃金鳟遗传资源状况并研究其与日本金鳟和道氏虹鳟遗传分化情况。结果表明甘肃金鳟具有较丰富的遗传变异,15个微卫星DNA座位共获得了51个等位基因,有效等位基因数(Ne)为1.13,多态信息含量(PIC)为0.440,平均观察杂合度(Ho)和期望杂合度(He)分别为0.430和0.498。在Hardy-Weinberg平衡条件下,进行了P检验,发现3个群体均有位点发生了显著偏离;对3个群体进行了Fst值计算,表明群体间存在着一定程度的遗传分化,但遗传变异绝大部分存在于品种内。综合分析,认为甘肃金鳟遗传性状基本稳定,遗传变异度较高,遗传多样性相对丰富,具有较大的遗传潜力,与道氏虹鳟和日本金鳟群体间分化明显,人工选育对群体的遗传变异产生了一定的影响。研究结果对甘肃金鳟的保种、选育及其合理的推广应用具有一定的指导作用。

甘肃金鳟、日本金鳟和道氏虹鳟的随机扩增多态DNA分析

利用筛选出的14个10 bp随机引物,对甘肃金鳟、日本金鳟和道氏虹鳟3个养殖群体进行了随机扩增DNA分析.结果显示:甘肃金鳟、日本金鳟和道氏虹鳟3个群体的多态座位比例(P)分别为75%、43.08%和52.9%,群体内遗传相似系数(S)分别为0.734 30、.887 5和0.857 0;Shannon表型多样性指数(H0)分别为0.8977,0.165 4和0.499 4,Shannon多样性值(H)分别为0.110 9、0.673 0和0.135 0.分析表明:甘肃金鳟养殖群体的遗传多样性比较丰富,而日本金鳟和道氏虹鳟养殖群体的遗传多样性较为贫乏.

甘肃金鳟AFLP体系建立及应用

甘肃金鳟是中国自主培育的虹鳟新品种,为进行其种质资源研究和遗传管理,以其尾鳍为试验材料,提取基因组DNA,对影响甘肃金鳟扩增片断长度多态性(AFLP)反应体系进行优化,包括模板DNA浓度、基因组酶切时间、选择性扩增中Mg2+、预扩增产物稀释倍数及选扩性引物M+3/E+3配比等进行比较分析,建立了适于甘肃金鳟的AFLP反应体系。即:100ng基因组DNA,3U EcoR I37℃酶切3h,再Mse I65℃酶切5h;然后用1U的T4连接酶连接12h,选扩25μL PCR反应体系中Mg2+2.0mmol/L,预扩产物稀释30倍,选扩引物M+3/E+3配比为8∶1,所得产物经电泳和银染后可获得清晰条带,效果良好;最后,筛选出了适宜甘肃金鳟品种分析的13对选择性引物。

饥饿再投喂对‘甘肃金鳟’幼体生长和肌肉组分的影响

选用225尾体质量为54g左右的‘甘肃金鳟’幼体为研究对象,设置饥饿7、14、21、28d组和正常投喂对照组5个组,每组3个重复,每个重复15尾,各处理饥饿后均恢复饱食投喂至56d试验结束,分别于试验开始、饥饿结束和试验结束时测定‘甘肃金鳟’幼体体质量、摄食率、食物转化率和特定生长率等生长性能指标和肌肉脂肪、粗蛋白、水分等组分,研究了饥饿和再投喂对‘甘肃金鳟’幼体生长性能和肌肉组分含量的影响.结果表明:随着饥饿时间的延长,各处理组体质量损失率和脂肪含量不断下降,饥饿28d组脂肪损失率达到最高为28.6%,与对照组相比差异极显著(P<0.01);水分含量显著升高(P<0.05),粗蛋白和灰分含量基本不变(P>0.05);在恢复投喂结束后,饥饿7d和14d组‘甘肃金鳟’体质量与对照组水平相当(P>0.05),其他各饥饿处理组体质量未达到对照组水平,与对照组比较差异显著(P<0.05);但各处理组的摄食率、食物转化率和特定生长率均显著高于对照组水平(P<0.05).

甘肃金鳟RAPD反应体系构建及优化

以甘肃金鳟尾鳍为试验材料,提取基因组DNA。对影响甘肃金鳟RAPD扩增的重要参数进行了优化试验,包括模板DNA浓度、dNTP浓度、引物浓度、Taq酶、变性时间、退火温度等,建立了甘肃金鳟RAPD反应的最适体系。即在25μl反应体系中:模板DNA用量为4.0 ng/μl;Mg2+浓度为2.5mmol/L;dNTP浓度为0.5 mmol/L;引物浓度为0.5μmol/L;Taq酶用量为1 U;扩增程序:94℃预变性4 min,94℃变性45 s,36℃退火50 s,72℃延伸1 min,共35个循环,最后延伸10 min。

甘肃金鳟生长激素基因多态性与生长性状的相关分析

生长激素(GH)基因能够影响动物的生长,是一个与生长性状有关的基因。以315尾甘肃金鳟(Oncorhynchus mykiss)为研究材料,分析了GH基因外显子区域多态性,并对基因型与生长性状进行了关联性分析。PCRSSCP分析结果显示B等位基因在外显子2区域第903 bp处发生G/C突变,存在3种基因型AA、AB和BB。D等位基因在外显子5区域第3 049 bp处发生T/G的突变,在3 094 bp处发生C/A的突变,其中第3 049 bp处发生的T/G的突变导致第157位氨基酸由组氨酸变为谷氨酰胺,为有义突变,共检测到3种基因型CC、CD和DD个体。最小二乘法分析表明,BB基因型的全长值和体长值都显著高于AA和AB基因型(P<0.05)。T3049G和C3094A突变点对全长、体长和体重均有显著性影响(P<0.05),其中CC基因型的全长值、体长值和体重值都高于DD和CD基因型。在标记辅助育种中,这些分子标记可以为甘肃金鳟遗传改良提供基础的数据和参考。

甘肃金鳟无公害养殖技术研究

以甘肃金鳟作为研究对象,通过对无公害金鳟养殖产地环境控制措施、金鳟无公害养殖过程中配合饲料中投入品的研究、金鳟养殖病害无公害防治技术研究以及无公害金鳟养殖过程中的日常管理,粗浅的摸索出适合甘肃金鳟的无公害养殖技术,对推进甘肃鲑鳟鱼无公害养殖技术的研究工作将起到抛砖引玉的作用。

甘肃金鳟肌肉脂肪酸组成及营养价值分析

甘肃金鳟是甘肃省渔业技术推广总站以虹鳟（Oncorhynchus mykiss Walbaum）的红色突变体为材料,历经15年选育成的虹鳟新品种[1],甘肃金鳟与虹鳟属于同一物种,