高效液相色谱法筛选甘草甜味素中抗氧化成分

为明确甘草甜味素中的抗氧化成分,将高效液相色谱(HPLC)与DPPH快速筛选自由基清除剂的方法与电喷雾串联质谱方法结合,建立甘草甜素中抗氧化活性成分在线筛选与鉴别的方法。HPLC色谱柱分离后,利用二极管阵列检测器得到各活性组分的紫外光谱图,流出液与DPPH在柱后反应管中混合反应,实现在线筛选自由基清除剂的作用。从甘草甜素中筛选出8个具有明显抗氧化活性的化合物,通过电喷雾质谱分析和紫外光谱图,实现了对各化合物的初步识别。8种抗氧化化合物分别为刺芒柄花素、南酸枣苷、甘草苷元-4'-芹糖葡萄糖苷、甘草苷元、甘草苷、刺毛甘草查耳酮、光果甘草酮和甘草查耳酮C。

甘草甜味素的化学成分研究

目的:研究提取甘草中甘草酸后剩余的副产品甘草甜味素中的化学成分,旨在探明甘草甜味素中的化学成分,拓宽其应用范围,为评价化学成分的生物活性提供科学依据。方法:采用溶剂提取、中压制备色谱和循环制备液相色谱等手段对甘草甜味素中的化学成分进行分离纯化,通过核磁共振对化合物结构进行鉴定。结果:从甘草甜味素中分离鉴定出10个化合物,分别为对羟基苯甲酸(p-hydroxybenic acid,Ⅰ)、甘草素-7,4'-二葡萄糖苷(Liquiritigenin-7,4-diglucoside,Ⅱ)、甘草素-4'-O-芹糖基-(1→2)葡萄糖苷(Liquiritigenin-apiosyl(1→2) glucoside),Ⅲ)、异甘草素葡萄糖芹菜苷(Licuraside,Ⅳ)、异甘草苷(Isoliquiritin,Ⅴ)、甘草素(Liquiritigenin,Ⅵ)、异甘草素(Isoliquiritigenin,Ⅶ)、芒柄花素(Formononetin,Ⅷ)、甘草苷(Liquiritin,Ⅸ)、刺甘草查尔酮(Echinatin,Ⅹ)。结论:该方法能分离得到10种成分,能拓宽副产品的应用范围。

甘草甜味素中酪氨酸酶抑制剂的筛选

目的:从生产甘草酸的副产品甘草甜味素中寻找酪氨酸酶抑制剂。方法:采用高效液相色谱与酶抑制分析相结合,利用电喷雾MS-MS串联质谱方法及紫外光谱对活性成分进行结构确认,建立了甘草甜味素中酪氨酸酶抑制活性成分快速筛选与鉴别方法。HPLC色谱柱分离后,利用二极管阵列检测器得到各活性组分的紫外光谱图,流出液与在96孔板中与酪氨酸酶、L-多巴作用,利用酶标仪检测酶剩余活力,从而实现筛选的目的。结果:利用此方法从甘草甜味素中筛选出4个具有明显酪氨酸酶抑制活性的化合物,通过ESI-MS/MS分析和紫外光谱图,结合相关文献,实现了各化合物的快速鉴别。结论:4个化合物均为已知化合物,分别为甘草苷、18α-羟基甘草次酸甲酯、甘草查耳酮C和18α-甘草次酸。