HPLC-ELSD法测定甘草中3种甘草皂苷的含量

目的建立测定甘草药材中甘草皂苷G2、甘草酸铵、乌拉尔甘草皂苷B含量的方法。方法采用HPLC-ELSD法,Hypersil C18柱(5μm,4.6mm×150mm),以甲醇-乙酸铵水溶液(0.2mol/L)-冰乙酸(体积比65∶34∶1)为流动相,流速1.0mL/min,ELSD漂移管温度110℃,载气(N2)流速2.8L/min。结果甘草皂苷G2、甘草酸铵、乌拉尔甘草皂苷B的线性范围分别为6.02～120.4,13.22～264.4,6.32～126.4μg/mL(r值分别为0.9996,0.9997,0.9998),平均回收率(n=6)为100.6%,100.8%和99.87%。结论本法简便,重现性好,可用于甘草中甘草皂苷G2、甘草酸铵、乌拉尔甘草皂苷B含量的测定。

RP-HPLC法测定强力宁注射液及甘草提取物中三种甘草皂苷的含量

目的 :测定强力宁注射液及甘草提取物中三种甘草皂苷的含量。方法 :采用 RP-HPLC法测定强力宁注射液及甘草提取物中甘草皂苷 G2 、甘草酸铵和乌拉尔甘草皂苷 B的含量。色谱条件为 :Shimadzu Shim-packC1 8,( 1 5 0 mm× 4 .6 mm)为色谱柱 ,甲醇 -乙酸铵水溶液 ( 0 .2 mol/L) -冰乙酸 ( 70∶ 30∶ 1 )为流动相 ,流速 :1 .0ml/min,检测波长为 2 5 0 nm,灵敏度 :0 .0 0 1 0 AUFS。结果 :该方法简便 ,易行 ,线性关系良好。甘草皂苷 G2 ,甘草酸铵和乌拉尔甘草皂苷 B的平均回收率分别为 1 0 1 .9% ,1 0 1 .4 %和 1 0 2 .0 %。结论

HPLC-DAD同时分析甘草中7种有效成分

目的采用HPLC—DAD中梯度洗脱和检测波长时间序列采样的方法，建立甘草（Glycyrrhiza uralensis Fisch．）中4种黄酮成分（甘草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素）和3种甘草皂苷成分（甘草酸、甘草皂苷G2、乌拉尔甘草皂苷B）的同时分析方法。方法采用C18（4．6mm×250mm，5um）色谱柱。流动相：乙腈-（0．5％醋酸铵＋1％冰醋酸），梯度洗脱0～12min从6：94到22：78，12～25min从22：78到25：75，25—45min从25：75到40：60，45～50min从40：60到6：94，保持5min；检测波长：时间序列采样。结果7种成分的线性关系良好，平均加样回收率在98％～103％之间。结论该方法准确、灵敏度高，可用于甘草药材质量的评价。

DESI-MSI技术在经典名方芍药甘草汤质量控制中应用研究

目的使用超高效液相色谱-二极管阵列检测器检测法(UHPLC-DAD)和解吸电喷雾电离-离子化质谱成像技术(desorption electrospray ionization-mass spectrometry imaging,DESI-MSI)对15批芍药甘草汤(Shaoyao-Gancao-Decoction,SGD)物质基准和对应实物进行分析,考察DESI-MSI在经典名方SGD质量控制中的优势。方法以SGD为研究模型,采用传统UHPLC-DAD法建立物质基准指纹图谱,并对SGD指标成分(芍药苷、甘草苷、甘草酸)含量、出膏率进行考察。同时,以芍药甘草汤对应实物冻干粉为研究载体,将其复溶后点样于定性滤纸,并固定于载玻片制成样品,以甲醇-甲酸(1000∶1)为喷雾溶剂,体积流量3μL/min;扫描范围m/z 100~1200;空间分辨率300μm;喷雾气(N2)压力0.5 MPa;离子源温度120℃,采用正负离子全扫描样本。结果DESI-MSI法能检测到SGD指标成分芍药苷、甘草苷、甘草酸以及共有峰成分芍药内酯苷等。同时,DESI-MSI法还能检测到来自甘草、白芍的甘草皂苷G2、甘草皂苷J2、没食子酸、柠檬酸、对羟基苯甲酸等11种成分,并对其相对含量进行直观呈现,定性分析能力远强于UHPLC-DAD法。结论基于DESI-MSI技术无需进行复杂的样品前处理,可以在无对照品情况下进行复杂样品的定性、相对含量分析,灵敏度高,分析能力强,可以作为经典名方物质基准、对应实物及配方颗粒样品的质控研究方法。

HPLC法分离18α-、18β-甘草酸并用于甘草酸类产品的质量控制

目的:建立能有效分离18α-、18β-甘草酸的高效液相色谱方法并用于甘草酸二铵原料及制剂产品中异构体组成及相关杂质的控制。方法:采用C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以0.1mol·L-1高氯酸铵溶液(用氨水调节pH至8.0)-甲醇(48∶52)为流动相,检测波长250nm,柱温50℃,流速0.8mL·min-1。结果:18β-甘草酸与18α-甘草酸分离度不小于1.2,方法耐用性好;测得国内1个厂家3批甘草酸二铵原料及2个厂家各3批甘草酸二铵注射液中甘草酸二铵均为18α-、18β-2种构型的混合物,以18α-构型为主,18β-构型含量分别为27.4%～28.5%,27.2%～29.3%,20.4%～20.7%;样品中均存在EP5.0甘草酸单铵药品标准中收载的杂质A,发现杂质A也存在18α-、18β-2种构型,在上述色谱条件下得到有效分离。结论:甘草酸二铵产品为18α-、18β-两种构型的混合物,而国内现有药品标准方法不能分离18α-、18β-甘草酸,可采用本文中方法对其构型组成及相关杂质加以合理控制。

不同炮制程度中药饮片蜜炙甘草的次生代谢化学成分组学研究

基于代谢组学方法研究不同炮制程度中药饮片蜜炙甘草的次生代谢化合物差异性标志物。采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间高分辨质谱(UPLC-Q-TOF/MS)联用技术,结合多元统计分析方法,以山西、河北张家口、内蒙古产地甘草生药及其不同炮制程度的蜜炙饮片为实验材料,对其次生代谢产物进行化学成分差异性分析,筛查其差异性的特征化合物。通过建立的UNIFI理论数据库结合对照品的实物库鉴定了中药甘草生药中57个化学成分,其中正离子采集模式鉴定了37个化合物,负离子采集模式鉴定了56个化合物。主成分分析(PCA)结果表明,甘草饮片中次生代谢化合物随蜜炙程度的不同差异较为明显。采用正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)方法筛查了炮制适度组和生药组之间的差异化合物,偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)方法筛查炮制不及、炮制适度和炮制太过组之间的差异化合物,结果均显示甘草酸、甘草皂苷G2和甘草皂苷E2含量存在差异,经炮制后其含量增加,且在炮制适度时最高(P<0.05)。本研究表明,甘草酸、甘草皂苷G2和甘草皂苷E2可能可以作为不同炮制程度饮片的差异化合物,指导中药饮片蜜炙甘草的炮制程度的过程控制。