甘草硒多糖对CCl_4诱导的小鼠急性肝损伤的影响作用

目的:探讨甘草硒多糖对CCl_4诱导的小鼠肝损伤的影响作用。方法:采用CCl_4建立小鼠急性肝损伤模型,通过测定各组小鼠血清中TP、ALB、ALT、AST、ALP、γ-GT的含量及肝组织匀浆中MDA、GPX水平,并结合病理学HE染色,表明甘草硒多糖对小鼠急性肝损伤的影响。结果:中、高剂量甘草硒多糖与模型组比较可明显降低急性肝损伤小鼠血清中的AST(p<0.05)、ALP(p<0.05)及肝组织中的MDA(p<0.05)和GSH-Px(p<0.05)水平,高剂量组还可明显降低ALT(p<0.05)含量,改善CCl_4所致的病理组织损伤。结论:甘草硒多糖对CCl_4诱导的肝损伤有一定的保护作用,其机制可能是通过清除自由基而达到防治肝细胞损害的疗效。

硒化甘草多糖、甘草多糖及其联合抗生素对无乳链球菌体外抗菌活性及机制分析

【目的】分析硒化乌拉尔甘草多糖(selenium glycyrrhiza polysaccharide,SeGUP)、乌拉尔甘草多糖(glycymhiza polyacchiade,GUP)对无乳链球菌体外抗菌活性及机制,研究其联合的抗菌效果。【方法】通过药敏纸片筛选出对无乳链球菌敏感抗生素,采用最小二倍稀释法和棋盘法测得最小抑菌浓度(minimal inhibit concentration,MIC)、最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC)和联合抑菌指数(FICI index,FICI);将无乳链球菌与120、60、30 mg/mL的SeGUP、GUP及抗生素分别等量混合后绘制细菌生长速率图;通过ELISA法检测细菌培养液中碱性磷酸酶、β-半乳糖苷酶活性、蛋白质含量及胞内DNA浓度,研究SeGUP、GUP及联合抗生素对细菌细胞膜、细胞壁及DNA的影响;采用结晶紫染色法检测SeGUP、GUP及联合抗生素对无乳链球菌生物被膜形成的影响。【结果】无乳链球菌对SeGUP 480 mg/mL、GUP 480 mg/mL均呈现中度敏感,抑菌圈直径为14.0、11.0 mm;无乳链球菌对盐酸卡那霉素、盐酸多西环素、头孢曲松钠、氟苯尼考极敏;SeGUP和GUP分别对肺炎链球菌的MIC、MBC为120、240 mg/mL和240、480 mg/mL;SeGUP与盐酸卡那霉素、盐酸多西环素、头孢曲松钠、氟苯尼考的FICI为1.5、0.75、1、0.5,SeGUP与盐酸卡那霉素之间关系为无关,与盐酸多西环素、头孢曲松钠之间为相加关系,与氟苯尼考间为协同关系,GUP与盐酸卡那霉素、盐酸多西环素、头孢曲松钠、氟苯尼考的FICI为1.5、1、1.5、0.75,GUP与盐酸卡那霉素、头孢曲松钠之间关系为无关,与盐酸多西环素、氟苯尼考间为相加关系;SeGUP、GUP明显抑制细菌的生长,其中SeGUP 120 mg/mL效果最强,SeGUP、GUP与盐酸多西环素、头孢曲松钠、氟苯尼考联合使用后增强了抑制效;SeGUP、GUP及联合抗生素使用后均能显著升高培养液中碱性磷酸酶(AKP)、β-半乳糖苷酶(β-gal)、蛋白质含量(P<0.05),显著降低胞内DNA含量(P<0.05),显著抑制无乳链球菌生物被膜的形成(P<0.05)。【结论】SeGUP能够通过损伤细菌细胞壁、细胞膜完整性,影响DNA含量对无乳链球菌产生明显的抑制作用,且其抗菌活性优于GUP。SeGUP与抗生素联合使用后能够增强抗生素的抗菌活性,并且其作用效果强于单独使用SeGUP、GUP和抗生素。

硒化甘草多糖对免疫抑制小鼠免疫功能的影响

试验旨在探究硒化甘草多糖(SeGUP)对免疫抑制小鼠免疫功能的影响。选取96只昆明小鼠,雌、雄各半,随机分为6组,每组16只小鼠,利用环磷酰胺(CY)给除空白组外小鼠构建免疫低下的模型,腹腔注射CY 80 mg/g,连续3 d。第4 d开始空白组、模型组小鼠每天腹腔注射0.3 mL生理盐水,阳性组腹腔注射200 mg/g黄芪多糖(APS)混悬液,SeGUP高、中、低剂量组小鼠腹腔注射100、200、300 mg/g SeGUP混悬液,连续7 d。结果显示,SeGUP高、中剂量组小鼠体重极显著高于SeGUP低剂量组(P<0.01)。SeGUP高、中剂量组小鼠碳粒廓清指数(K)、吞噬指数(α)极显著高于SeGUP低剂量组(P<0.01)。SeGUP高剂量组小鼠血清白细胞介素-2 (IL-2)含量极显著高于SeGUP中剂量组、阳性组(P<0.01),SeGUP中剂量组、阳性组小鼠血清IL-2含量极显著高于SeGUP低剂量组、空白组(P<0.01),SeGUP高、中剂量组小鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、免疫球蛋白M (IgM)、干扰素-γ(IFN-γ)、免疫球蛋白G (IgG)含量极显著高于SeGUP低剂量组(P<0.01)。SeGUP高、中剂量组小鼠胸腺指数极显著高于SeGUP低剂量组(P<0.01)。研究表明,SeGUP可通过下调小鼠脾脏指数,上调体重、K、α、IL-2、TNF-α、IgM、IFN-γ、IgG、胸腺指数等指标,增强免疫抑制小鼠的免疫功能,其中200、300 mg/g的SeGUP效果较好。

硒化甘草多糖联合抗生素对奇异变形杆菌体内外抑菌效果以及抑菌机制研究

试验旨在探究硒化甘草多糖(SeGUP)和甘草多糖(GUP)联合抗生素对奇异变形杆菌(PM)的体内外抑菌效果以及抑菌机制。体内外抑菌效果通过药敏试验、最小抑菌浓度(MIC)、生长曲线、体外协同作用以及SeGUP、GUP对PM感染小鼠的死亡率进行分析。抑菌机制通过PM细胞壁、细胞膜、生物膜、抗氧化酶活性的变化进行分析。结果显示,同浓度SeGUP比GUP抑菌圈大,MIC值小,对PM生长抑制更强;SeGUP与环丙沙星(CI)联合表现为协同,GUP与CI表现为相加;SeGUP能够极显著降低PM感染小鼠死亡率(P<0.01)。与对照组相比,SeGUP、GUP、CI可极显著升高培养液中碱性磷酸酶(AKP)、β-半乳糖苷酶(β-gal)的活性和蛋白含量(P<0.01),极显著降低菌体DNA含量,抑制生物膜形成,降低过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性(P<0.01)。结果表明,SeGUP体内外抑菌效果以及抑菌机制能力均优于GUP。

硒化乌拉尔甘草多糖的抗炎活性研究

为了探究硒化乌拉尔甘草多糖（Se-GPS）的抗炎活性,试验以地塞米松为阳性对照,给小白鼠灌服低剂量（100 mg/kg）、中剂量（200 mg/kg）、高剂量（300 mg/kg）Se-GPS和低剂量（100 mg/kg）、中剂量（200 mg/kg）、高剂量（300 mg/kg）GPS 0.2 m L/只,连续给药10 d,观察其对二甲苯和醋酸所致炎症的抗炎效果;用脂多糖（LPS）建立小鼠炎症模型,分别给小鼠灌服低剂量（100 mg/kg）、中剂量（200 mg/kg）、高剂量（300 mg/kg）LPS＋Se-GPS和低剂量（100 mg/kg）、中剂量（200 mg/kg）、高剂量（300 mg/kg）LPS＋GPS0.2 m L/只,连续给药10 d,测定小鼠血清肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）含量变化。结果表明：各剂量Se-GPS均能显著抑制二甲苯致小鼠耳廓肿胀,显著降低醋酸致小鼠毛细血管的通透性增加,抑制炎性细胞因子TNF-α和IL-1β的分泌,其抗炎活性略强于甘草多糖,且高剂量Se-GPS抗炎效果最好。说明Se-GPS具有明显的抗炎活性。

硒化甘草多糖对产志贺毒性大肠杆菌抑菌机制以及抗氧化作用探究

目的探究硒化甘草多糖(SeGUP)和甘草多糖(GUP)对产志贺毒性大肠杆菌(STEC)的体外抑菌机制和抗氧化效果。方法采用二倍稀释法检测SeGUP、GUP对STEC的半数抑制浓度(IC_(50)),测定各浓度的SeGUP、GUP对STEC生长曲线的影响;通过测定不同时间段培养液中AKP、β-半乳糖苷酶(β-gal)、蛋白质含量以及结晶紫染色探究SeGUP、GUP对STEC细胞壁、细胞膜、生物膜的影响。采用ELISA法检测清洁级昆明小鼠血清中SOD、CAT、MDA含量变化。结果SeGUP IC_(50)为55.58 mg·mL^(-1),GUP IC_(50)为69.85 mg·mL^(-1),150 mg·mL^(-1)SeGUP能完全抑制STEC生长,GUP在200 mg·mL^(-1)才能完全抑制STEC的增殖。SeGUP组同一时间的AKP活性、β-gal活性、蛋白质含量与GUP组比较,差异极显著,P<0.01;SeGUP组与GUP组比较能极显著降低STEC生物膜形成,P<0.01。抗氧化试验中,SeGUP组提高SOD、CAT含量以及降低MDA含量效果优于GUP组(P<0.01)。结论硒化修饰提高了GUP体外抑菌效果、破坏STEC膜结构和抗氧化能力。

硒化甘草多糖对雏鸡免疫和抗氧化功能的影响

为研究硒化甘草多糖(Se GUP)对雏鸡免疫和抗氧化功能的影响,采用腹腔注射脂多糖(LPS)建立雏鸡免疫应激模型。将试验鸡随机分为5组,分别为空白对照组、LPS组、LPS+黄芪多糖组、LPS+甘草多糖组、LPS+硒化甘草多糖组。于试验第8、10、12天腹腔注射LPS建立免疫应激模型后,试验组分别注射黄芪多糖、甘草多糖、硒化甘草多糖,连续给药7 d,分别于给药后第7、14、21、28、35天采血,测定血清中免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、补体蛋白3(C3)、补体蛋白4(C4)、可溶性CD4分子(SCD4)、可溶性CD8分子(SCD8)及血清总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA)。结果显示,与空白对照组相比,硒化甘草多糖显著降低了LPS刺激的25日龄雏鸡血清IgA含量(P<0.05),18、25、32、39日龄雏鸡血清IgG和IgM含量(P<0.05)及18、25、32、39、46日龄雏鸡血清MDA含量(P<0.05),显著提高了LPS刺激的18、25、32日龄雏鸡血清SCD4含量(P<0.05),18和25日龄雏鸡血清T-AOC含量(P<0.05),18、25、32、39、46日龄雏鸡血清SOD活性(P<0.05),18、25、32、39日龄雏鸡血清GSH-PX活性(P<0.05)。结果表明,硒化甘草多糖对雏鸡的免疫功能和抗氧化功能均有一定的调节作用。

硒化甘草多糖对雏鸡血液生理生化指标的影响

为了研究硒化甘草多糖(SeGUP)对雏鸡血液生理生化指标的影响,本试验选取300只1日龄京红1号雏鸡,随机分为4组,每组5个重复;其中I组为空白组,注射生理盐水;Ⅱ~Ⅳ组为试验组,分别肌内注射1 mL的黄芪多糖、甘草多糖和硒化甘草多糖;试验周期45 d。分别于试验第15、22、29、36天和第43天采血,检测各组雏鸡血液生理生化等各项指标。结果显示:Ⅳ组雏鸡血液中白细胞数(WBC)、淋巴细胞数(LYM)均高于其他各组;整个试验周期中各组血液中白蛋白(ALB)含量呈上升趋势,Ⅱ~Ⅳ组白蛋白的含量高于空白组,第15天和第22天试验组Ⅳ与空白组相比差异显著(P<0.05);各组间谷丙转氨酶(GLT)、肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)的含量无显著差异(P>0.05),但Ⅱ~Ⅳ组胆固醇(CHOL)和甘油三酯(TG)的含量较空白组均有不同程度的下降;Ⅳ组血液中钙(Ca)、无机磷(PHOS)含量高于其他各试验组;第15、29天和第43天时IV组雏鸡血液中Ca的含量与空白组比较差异显著(P<0.05);第15天和第36天时Ⅳ组雏鸡血液中PHOS的水平显著高于空白组(P<0.05);试验过程中Ⅱ~Ⅳ组血液中溶菌酶(LZM)的含量高于空白组,第29天时Ⅳ组溶菌酶的含量显著高于空白组(P<0.05);α-酸性糖蛋白(AAG)在整个试验过程中各组间的差异不显著(P>0.05)。结果表明,经过硒化处理过的甘草多糖可以改善雏鸡的血液指标,提高机体的抵抗力且效果优于未经处理过的甘草多糖。本试验为硒化甘草多糖在雏鸡临床上的应用提供理论依据。

硒化甘草多糖对雏鸡肠道组织形态的影响

为了研究硒化甘草多糖对雏鸡肠道组织形态的影响,试验采用单因素试验设计,将280只1日龄的健康"京红一号"雏鸡随机分为4组,分别为甘草多糖组、硒化甘草多糖组、黄芪多糖组、对照组,每组70只,分别采集15,22,29,36,43日龄雏鸡的十二指肠、空肠、回肠,制作石蜡切片,H.E.染色,光学显微镜下观察雏鸡肠道组织形态的结构变化,测量十二指肠、空肠、回肠的肠绒毛高度、隐窝深度,计算绒毛高度与隐窝深度的比值(V/C)。结果表明:15,22,29,36,43日龄时,硒化甘草多糖能显著促进雏鸡的肠道组织形态发育,十二指肠、空肠、回肠的肠绒毛伸展良好,走向平直,绒毛之间分界清晰,呈指状突起,绒毛饱满;对照组十二指肠、空肠、回肠的肠绒毛长度变短且数目稀少,肠绒毛排列紊乱,有明显的断裂。15,22,29,36,43日龄时,与对照组相比,硒化甘草多糖组雏鸡的肠绒毛高度增加、隐窝深度减小、V/C比值升高。说明硒化甘草多糖能够明显地影响雏鸡十二指肠、空肠和回肠的绒毛高度、隐窝深度,均能改善雏鸡在不同时期的肠道发育指标和肠道组织形态,促进雏鸡的肠道发育。

硒化甘草多糖对雏鸡抗炎活性的影响

为了了解硒化甘草多糖(SeGUP)对雏鸡抗炎活性的影响,试验采用脂多糖(LPS)建立雏鸡体内炎症模型,选取300只1日龄京红1号雏鸡,随机分为5组,分别为空白对照组、LPS组、LPS+黄芪多糖(APS)组、LPS+甘草多糖(GUP)组、LPS+硒化甘草多糖(SeGUP)组,除空白对照组外,各组试验鸡于8,10,12日龄腹腔注射LPS后,LPS+APS组、LPS+GUP组、LPS+SeGUP组分别肌肉注射给予浓度为1 mg/mL的APS、GUP、SeGUP,0.5 mL/只,连续7 d,分别于试验鸡18,25,32,39,46日龄每组选取10只,采用碳粒廓清法检测雏鸡巨噬细胞吞噬指数,用试剂盒检测雏鸡血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素6(IL-6)、一氧化氮(NO)和诱导型NO合酶(iNOS)含量。结果表明:与空白对照组比较,LPS组18,25,32,39,46日龄雏鸡巨噬细胞吞噬指数和血清中IL-1β、IL-2、IL-6、TNF-α、NO、iNOS含量均显著升高(P<0.05);与LPS组比较,LPS+SeGUP组18,25,32,39,46日龄雏鸡巨噬细胞吞噬指数和血清中IL-1β、IL-2、IL-6、TNF-α、NO、iNOS含量均显著降低(P<0.05)。说明SeGUP能缓解雏鸡因LPS刺激引起的炎性反应,从而发挥抗炎作用。

硒化甘草多糖对雏鸡生长性能及内脏器官发育的影响

试验旨在研究硒化甘草多糖对雏鸡生长性能及内脏器官发育的影响。选取体重接近的1日龄京红一号雏鸡280只,随机分为4组,分别为甘草多糖组(A组)、硒化甘草多糖组(B组)、黄芪多糖组(C组)和空白对照组(D组),每组70只鸡,饲养期45 d。分别在每周龄末,计算雏鸡的平均日采食量、平均日增重以及料重比。在15、22、29、36、43日龄时,每组随机选取试验鸡10只解剖,取出内脏器官并计算器官指数,测量肠道长度及重量。结果表明,与对照组相比,硒化甘草多糖组在2、3、4周龄时显著提高了雏鸡的日采食量与日增重(P<0.05);硒化甘草多糖组显著提高了29日龄雏鸡的腺胃器官指数与36日龄的肌胃与腺胃器官指数(P<0.05);硒化甘草多糖组显著提高了22日龄雏鸡的小肠重、十二指肠重、空肠重,29日龄雏鸡的小肠重、小肠长、十二指肠长以及36日龄雏鸡的小肠长(P<0.05)。由此可知,硒化甘草多糖可提高雏鸡的生长性能并促进雏鸡的内脏器官的发育。

硒化乌拉尔甘草多糖和乌拉尔甘草多糖对单核细胞增生李斯特菌抗菌活性的研究

为了比较硒化乌拉尔甘草多糖(selenizing Glycyrrhiza uralensis polysaccharide,SeGUP)和乌拉尔甘草多糖(Glycymhiza uralensis polyacchiade,GUP)对单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogene,Lm)体内、体外抗菌活性,试验采用药敏纸片方法分别测定Lm对480 mg/mL、240 mg/mL、120 mg/mL GUP和SeGUP的敏感程度;采用微量肉汤稀释法测定SeGUP和GUP对Lm的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC);设置SeGUP和GUP高剂量(240 mg/mL)组、中剂量(120 mg/mL)组、低剂量(60 mg/mL)组,各组分别与Lm混合培养24 h,每2 h取样测定OD600值,观察SeGUP、GUP对Lm生长速率的影响;检测各组4小时时的培养上清液中的碱性磷酸酶(AKP)、β-半乳糖苷酶活性及蛋白质总含量;用结晶紫染色法检测SeGUP和GUP各剂量组对Lm生物被膜形成能力的影响;分别按体重灌胃小鼠SeGUP、GUP 300 mg/kg、150 mg/kg、75 mg/kg测定其对感染Lm小鼠的保护效果。结果表明:480 mg/mL SeGUP对Lm高度敏感,抑菌圈直径为15.0 mm;480 mg/mL GUP中度敏感,抑菌圈直径为13.0 mm。SeGUP和GUP对Lm的MIC分别为120 mg/mL、240 mg/mL,MBC分别为240 mg/mL、480 mg/mL。各剂量SeGUP和GUP均能抑制Lm的生长,其中240 mg/mL SeGUP抑制效果最好;与空白对照组相比,SeGUP和GUP各剂量组的AKP、β-半乳糖苷酶活性及蛋白质总含量均显著升高(P<0.05),各剂量组均能显著抑制生物被膜形成(P<0.05);与模型组相比,300 mg/kg、150 mg/kg、75 mg/kg SeGUP组和300 mg/kg、150 mg/kg GUP组小鼠死亡率均显著降低(P<0.05),75 mg/kg GUP组小鼠死亡率差异不显著(P>0.05);各SeGUP组小鼠死亡率低于相同浓度的GUP组。说明SeGUP、GUP对Lm生长有明显的抑制作用,相同浓度时SeGUP的效果更好,并且SeGUP浓度为240mg/mL时体外抗菌效果最好,按体重灌胃剂量为300 mg/kg时对小鼠的保护力最强。

硒化甘草多糖联合抗生素体外抑菌作用及体内免疫调节作用研究

旨在研究硒化新疆乌拉尔甘草多糖(Se GUP)对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌是否有较好的体外抑菌作用,与抗菌药物联合使用是否能够增强抗菌药物的抑菌效果及其免疫相关活性研究。采用微量法检测Se GUP与抗生素的最小抑菌浓度(MIC),筛选出3种较为敏感的常用抗生素;采用棋盘法测算出Se GUP与所筛选的对细菌敏感的抗生素进行联合后的FIC指数,判定Se GUP与抗生素联合作用性质;采用ELISA法,测定不同剂量Se GUP组小鼠血清中Ig G、IL-1、IL-2含量,确定其免疫活性调节作用。体外抑菌试验结果表明,Se GUP对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌均有一定的抑制作用,其MIC值分别为100、200 mg/mL;头孢噻呋钠、卡那霉素与Se GUP联合作用后,对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌耐药菌株均表现为一定的相加作用,其MIC值分别降低到25、50、50、50 mg/mL,而与恩诺沙星进行联合后的抑菌效果并不明显,对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌耐药菌株表现为无关作用。免疫试验结果表明,不同剂量的Se GUP对小鼠血清中Ig G、IL-1和IL-2的含量均有不同程度的提高作用,其中,高、中剂量组的Se GUP的提高作用显著(P<0.05),与免疫抑制组相比差异极显著(P<0.01)。由此可知,一定剂量的Se GUP与头孢噻呋钠、卡那霉素联合后,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌具有较好的抑菌效果的同时,能减少抗生素的使用剂量,并且Se GUP能提高小鼠血清中相关细胞因子含量,增强机体免疫力。本次试验结果为充分挖掘中药中有效成分提供了更多理论依据,为寻找更多有效防治金黄色葡萄球菌、大肠杆菌病的药物组合和对抗及减缓多重耐药菌株出现提供了新思路。

硒化甘草多糖对雏鸡肠道消化酶活性的影响

为了研究晒化甘草多糖(Selenium Glycyrrhiza Polysaccharide,SeGUP)对雏鸡肠道消化酶活性的影响,笔者选用300只1日龄的京红1号雏鸡,随机分为4组(空白对照组、黄芪多糖组、甘草多糖组、硒化甘草多糖组),每组5个重复。其中Ⅰ组为空白对照组,注射生理盐水;Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组为试验组,分别肌肉注射lmL黄芪多糖、甘草多糖和砸化甘草多糖,试验期45 d。结果表明,各组雏鸡十二指肠中胰蛋白酶的含量呈上升趋势,多糖组中胰蛋白酶的含量高于空白组。第15、22、29、36天,Ⅳ组胰蛋白酶的含量显著高于甘草多糖组(PC0.05);第15、22天,多糖组中淀粉酶的含量显著高于空白对照组(P<0.05);Ⅳ组淀粉酶的含量显著高于Ⅲ组(P<0.05)。各多糖组中脂肪酶的含量较空白对照组均有不同程度的提高。第15、22、29、36天,Ⅳ组脂肪酶的含量显著高于Ⅲ组(P<0.05)。雏鸡空肠,回肠,盲肠中胰蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶含量与十二指肠消化酶含量变化趋势相似,硒化甘草多糖组消化酶的含量不同程度地高于其他组。上述结果表明,硒化甘草多糖对雏鸡肠道消化酶的活性具有促进作用,其效果优于甘草多糖。