目的观察加味芍药甘草汤(加芍甘汤)治疗人来源性子宫腺肌病裸鼠的效果并探讨其对铁死亡相关基因表达的影响。方法45只雌性SPF级BALB/C-nu鼠作为研究对象,随机选取其中10只作为对照组(A组),其余35只用于造模。对照组腹腔移植CINⅢ患者子...目的观察加味芍药甘草汤(加芍甘汤)治疗人来源性子宫腺肌病裸鼠的效果并探讨其对铁死亡相关基因表达的影响。方法45只雌性SPF级BALB/C-nu鼠作为研究对象,随机选取其中10只作为对照组(A组),其余35只用于造模。对照组腹腔移植CINⅢ患者子宫肌层组织,模型鼠腹腔移植子宫腺肌病(adenomyosis,AM)患者病灶组织。成模后随机抽取5只AM模型鼠用于鉴定,其余30只随机分入AM模型组(B组,10只)、加芍甘汤组(C组,10只)、加芍甘汤联合抑制剂组(D组,10只)。A和B组予生理盐水灌胃,C和D组均根据成人等效剂量的两倍予加芍甘汤灌胃治疗,D组在治疗同时予Ferrostatin-1腹腔注射。疗程满3周即取材,比较4组一般情况、体质量变化、瘤体大小;比较不同组别DMT1、FPN、FTL、GPX4基因表达情况以及谷胱甘肽(glutathione,GSH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、铁的含量。结果成模后,随机抽取5只AM模型鼠取移植瘤HE染色见AM典型病理变化,提示造模成功。3周疗程结束后,各组瘤体体积均有不同程度缩小。A组和C组的瘤体体积均明显小于B组,差异具有统计学意义(P<0.01)。D组瘤体大于C组(P<0.01),D与B组比较差异无统计学意义(P>0.05)。RT-qPCR结果显示,B组二价金属转运体(divalent metal transporter,DMT1)、铁转运蛋白(ferroportin,FPN or SLC40A1)、铁蛋白轻链(ferritin light chain,FTL)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GPX4)mRNA相对表达量显著高于A组和C组(P<0.01)。GPX4基因mRNA表达C组低于D组(P<0.01)。蛋白免疫印迹法(Western blot,WB)结果显示,DMT1、FPN、GPX43个基因的蛋白相对表达量B组均高于A组和C组(P<0.05),但FTL表达量在3组间差别无统计学意义(P>0.05)。D组的FPN的蛋白相对表达量高于C组(P<0.05)。在4组中,GSH的含量在B组最高,显著高于其他3组(P<0.01),其他组别两两比较差异均无统计学意义(P>0.05)。MDA的含量在C组最高,显著高于其他3组,D组和B组的含量高于A组(P<0.01),其他组别比较差异无统计学意义。铁含量B组、C组和D组显著高于A组(P<0.01),其他组别两两比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论人来源性AM裸鼠模型可重复性高。加芍甘汤可缩小AM模型鼠的瘤体大小。加芍甘汤可能通过调控细胞铁死亡机制发挥作用。展开更多
文摘目的基于免疫印迹实验深入探究芍药甘草汤对骨关节炎(osteoarthritis,OA)的药效机制。方法将40只大鼠随机分为4组,分别为假手术组(sham组)、模型组、芍药甘草汤(SGD)中剂量组(4.32 g/kg)、SGD高剂量组(8.64 g/kg)。除sham组以外的所有组大鼠使用内侧半月板失稳术(destabilization of the medial meniscus,DMM)构建骨关节炎模型,所有大鼠在手术造模后第1天开始灌胃给药,每日1次,持续8周,SGD组给予一定剂量的SGD,sham组和模型组给予等量的蒸馏水。给药8周后,对所有大鼠进行麻醉处死并取材。苏木素-伊红(HE)染色观察软骨组织形态学改变,免疫印迹法(Western blot)检测软骨组织中p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)及C-myc蛋白的表达水平。结果与sham组比较,模型组、SGD中剂量组及高剂量组大鼠关节软骨的C-myc和p38分子蛋白表达水平明显升高(P<0.01),用芍药甘草汤干预后,其蛋白表达出现下降趋势,且下降幅度与芍药甘草汤浓度呈正相关,当芍药甘草汤浓度达到8.64 g/kg时,与模型组相比差异具有统计学意义(P<0.001)。结论芍药甘草汤能抑制OA大鼠软骨中p38和C-myc蛋白的过表达。
文摘目的观察加味芍药甘草汤(加芍甘汤)治疗人来源性子宫腺肌病裸鼠的效果并探讨其对铁死亡相关基因表达的影响。方法45只雌性SPF级BALB/C-nu鼠作为研究对象,随机选取其中10只作为对照组(A组),其余35只用于造模。对照组腹腔移植CINⅢ患者子宫肌层组织,模型鼠腹腔移植子宫腺肌病(adenomyosis,AM)患者病灶组织。成模后随机抽取5只AM模型鼠用于鉴定,其余30只随机分入AM模型组(B组,10只)、加芍甘汤组(C组,10只)、加芍甘汤联合抑制剂组(D组,10只)。A和B组予生理盐水灌胃,C和D组均根据成人等效剂量的两倍予加芍甘汤灌胃治疗,D组在治疗同时予Ferrostatin-1腹腔注射。疗程满3周即取材,比较4组一般情况、体质量变化、瘤体大小;比较不同组别DMT1、FPN、FTL、GPX4基因表达情况以及谷胱甘肽(glutathione,GSH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、铁的含量。结果成模后,随机抽取5只AM模型鼠取移植瘤HE染色见AM典型病理变化,提示造模成功。3周疗程结束后,各组瘤体体积均有不同程度缩小。A组和C组的瘤体体积均明显小于B组,差异具有统计学意义(P<0.01)。D组瘤体大于C组(P<0.01),D与B组比较差异无统计学意义(P>0.05)。RT-qPCR结果显示,B组二价金属转运体(divalent metal transporter,DMT1)、铁转运蛋白(ferroportin,FPN or SLC40A1)、铁蛋白轻链(ferritin light chain,FTL)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GPX4)mRNA相对表达量显著高于A组和C组(P<0.01)。GPX4基因mRNA表达C组低于D组(P<0.01)。蛋白免疫印迹法(Western blot,WB)结果显示,DMT1、FPN、GPX43个基因的蛋白相对表达量B组均高于A组和C组(P<0.05),但FTL表达量在3组间差别无统计学意义(P>0.05)。D组的FPN的蛋白相对表达量高于C组(P<0.05)。在4组中,GSH的含量在B组最高,显著高于其他3组(P<0.01),其他组别两两比较差异均无统计学意义(P>0.05)。MDA的含量在C组最高,显著高于其他3组,D组和B组的含量高于A组(P<0.01),其他组别比较差异无统计学意义。铁含量B组、C组和D组显著高于A组(P<0.01),其他组别两两比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论人来源性AM裸鼠模型可重复性高。加芍甘汤可缩小AM模型鼠的瘤体大小。加芍甘汤可能通过调控细胞铁死亡机制发挥作用。
