甘蓝型油菜‘沪油15'中两个CBF类转录因子的克隆与分析

以拟南芥CBF家族转录因子AP2保守域的氨基酸序列为信息探针,搜索油菜UniGene数据库,得到2个UniGene:Bna. 2193和Bna.2260,序列拼接得到2个cDNA序列(BnaCBF-1和BnaCBF-2)。通过PCR和RT-PCR方法分别从甘蓝型油菜‘沪油15'的DNA和cDNA中克隆了上述基因。序列分析显示,克隆的BnaCBF-1-Hy15与BnaCBF-1基因序列完全一样,而BnaCBF-2-Hy15与BnaCBF-2的基因序列差异很小,只有4个氨基酸位点不同,且都没有内含子。从cDNA序列、氨基酸序列的相似性、组成成分、理化性质、疏水性/亲水性、序列比对、进化树、功能域、二级结构、三级结构进行了预测。结果显示,‘沪油15'来源的BnaCBF-1-Hy15和BnaCBF-2-Hy15转录因子属于AP2/ERF家族中的DREB-A1亚族,是亲水性蛋白,在蛋白质的三级结构上与atCBF1相似。

甘蓝型双低油菜品种沪油15的选育

甘蓝型双低油菜品种沪油15系采用品种(系)间的双交方法育成,种子含油量42.43%,芥酸含量0.38%,硫甙含量19.01μmol g。上海市油菜区域试验平均产量2147.3kg hm2,比对照汇油50增产31.3%,上海市油菜生产试验平均产量2700.0kg hm2,比对照汇油50增产12.6%。沪油15适于我国长江下游冬油菜区种植。

甘蓝型低芥酸、低硫甙油菜新品种“沪油15”

采用品种 (系 )间的双交方法育成甘蓝型低芥酸、低硫代葡萄糖甙 (以下简称硫甙 )优质油菜新品种沪油 15。该品种种子含油率 4 2 .4 3 % ,菜油芥酸含量为 0 .3 8% ,菜籽粕硫甙含量为 19.0 1μmol/g ,菜籽产量比非优质对照品种汇油 50增产 2 3 .9%以上 。

高含油量甘蓝型油菜杂交新品种‘沪油杂7号'的选育

利用甘蓝型油菜高含油量隐性核不育纯合两型系20228AB、临保系M-6477、恢复系08184,经"三系"配套育成的高含油量双低油菜杂交新品种‘沪油杂7号',其籽粒含油率高达47.76%,芥酸含量为0,硫苷总量为21.75μmol/g。在2008-2009年度上海市油菜区域试验中,平均产量2 622.45 kg/hm^2,比对照‘沪油15'增产8.85%;产油量1 252.50 kg/hm^2,比对照增产17.29%。在2009-2010年度上海市油菜区域试验中,平均产量3 146.70 kg/hm^2,比对照‘沪油杂4号'增产14.48%;产油量1 346.10 kg/hm^2,比对照增产12.46%。

甘蓝型双低油菜新品种沪油15高产栽培技术探讨

通过播种期、施氮肥量和种植密度试验 ,探讨了甘蓝型双低油菜新品种沪油 15的产量变化。结果表明 ,沪油 15适宜的播种期为 9月 2 0日前后 ,在高肥 (337.5kg hm2 )条件下 ,适当稀植 (10 .5万株 hm2 ) ,沪油 15能获得高产。

甘蓝型双低隐性核不育杂交种‘沪油杂8号'的选育

‘沪油杂8号'是利用隐性上位互作核不育三系选育的甘蓝型油菜双低杂交种,具有高产、稳产和抗油菜菌核病和病毒病等特性。在上海市油菜区域试验中,2年平均产量3 094.5 kg/hm^2,较对照品种(2009年‘沪油15',2010年‘沪油杂4号')增产20.12%,产油量比对照增加31.29%。在上海市油菜生产试验中,平均产量3 108.6 kg/hm^2,比对照‘沪油杂4号'增产17.90%,产油量增加22.88%。在国家冬油菜区域试验(长江下游)中,平均产量为2 551.95 kg/hm^2,较对照‘秦油7号'增产8.10%,产油量增加5.69%。种子含油率43.39%,芥酸含量0.5%,硫苷总量26.40μmol/g。

高含油率甘蓝型双低油菜新品种‘沪油21’的选育

‘沪油21'是通过品种(系)间双交的方法育成的甘蓝型双低油菜新品种,其芥酸含量0.87%,硫苷含量18.00μmol/g,种子含油率46%,属高含油率品种。在上海市油菜区域试验中平均产量2 823.45 kg/hm^2,较对照‘沪油15'增产8.8%;产油量1 279.35 kg/hm^2,比对照‘沪油15'增产13.1%。在2009年上海市油菜生产试验中,平均产量2 276.55 kg/hm^2,比对照‘沪油15'增产3.95%;产油量1 037.70 kg/hm^2,比对照‘沪油15,增产7.49%。

甘蓝型双低油菜新品种沪油16的选育

沪油16是通过品种间杂交育成的甘蓝型双低油菜新品种,种子含油率为41.22%、芥酸含量为0.74%、硫苷含量为21.20μmol/g。沪油16在上海市油菜区域试验中,平均产量2 583.0kg/hm2,比对照双低油菜品种沪油12增产12.0%;在国家油菜区域试验中,平均产量1 956.0kg/hm2,比对照双高品种中油821增产10.1%。

甘蓝型杂交油菜黔油15号的选育

利用引进的波里马不育材料与黔油低芥一号优株进行测交和回交,育成胞质不育系7005A和保持系7005B,与恢复系7005C测配,得到强优势组合黔杂7005。贵州省区域试验平均单产164.95 kg/667m2,比对照油研七号增产18.19%;贵州省生产试验平均单产136.33 kg/667m2,较对照油研七号增产15.47%。全国(长江上游区)油菜区试两年平均单产154.48 kg/667m2,比对照中油821增产19.18%;全国(长江上游区)油菜生产试验平均单产129.96 kg/667m2,比对照中油821增产6.92%。于2002年通过贵州省农作物品种审定命名为黔油15号,2003年11月通过全国审定。适宜长江上游区以及邻近相同生态区域油菜适宜区种植。

甘蓝型双低油菜品种“沪油18”的选育

"沪油18"是采用品种间杂交,低世代抗性鉴定和定向筛选育成的高产、抗(耐)菌核病和病毒病、抗倒伏和抗冻甘蓝型双低油菜新品种。该品种种子含油率42%,芥酸含量0.33%,硫苷含量10.16μmol/g。在上海市油菜区域试验中平均产量2 338.5 kg/hm^2,比双低对照"沪油15"增产4.1%。

甘蓝型双低油菜新品种"沪油16"及其高产栽培技术

上海市农科院作物所自80年代初开始进行甘蓝型油菜品质育种研究工作,在先后育成低芥酸油菜品种'申优青'和'沪秀青',双低油菜品种'沪油12、14'和'沪油15'的基础上,又育成高产、适应性广、较抗(耐)油菜菌核病和病毒病的甘蓝型双低油菜新品种'沪油16'.

甘蓝型油菜“沪油21”对除草剂的耐药性试验

为探究适用于甘蓝型油菜"沪油21"的除草剂品种及施用浓度,进行了"沪油21"对除草剂的耐药性试验。结果表明,在严格控制除草剂浓度时,"沪油21"对各参试药剂的耐药性均较好;在超量使用除草剂时,不同种类除草剂对"沪油21"的药害程度各有不同,其中,施用50%乙草胺对"沪油21"种子的发芽有抑制作用,施用108 g/L盖草能、10.0%精喹禾灵、108 g/L高效氟吡甲禾灵对"沪油21"有轻微药害,施用50%除草灵对"沪油21"的药害严重。

甘蓝型油菜中一类AP2／ERF转录因子的克隆和生物信息学分析

AP2/ERF转录因子家族是植物中广泛存在的一类转录因子,AP2/ERF这类转录因子主要参与植物的细胞周期、生长发育以及生物和非生物胁迫相关基因的表达调控。由于拟南芥和油菜同属于芸薹属,具有相似的基因信息,利用油菜UniGene数据库,以拟南芥ERF转录因子保守序列为探针,通过电子克隆从一个UniGene C luster中分离得到三个同类的AP2/ERF转录因子,从cDNA序列、氨基酸序列的相似性、组成成分、理化性质、疏水性/亲水性分析、序列比对、进化树、功能域、二级结构、三级结构、无序化特性进行了预测和较为全面的分析。结果显示油菜来源的BnaERF1、BnaERF2和BnaERF3属于AP2/ERF转录因子的B-2亚族,是亲水性蛋白,在蛋白质的三级结构上与AtERF1相似。蛋白质无序化分析发现,油菜BnaERF1、BnaERF2和BnaERF3无序化程度小于拟南芥AtERF1。设计引物通过PCR和RT-PCR方法分别从甘蓝型双低油菜沪油15幼苗的DNA和cDNA中扩增了上述基因,初步分析BnaERF2没有内含子,BnaERF1和BnaERF3有内含子。另外,通过EST丰度分析显示,该类转录因子的表达最高峰在种子中,其次为花,在芽、茎和分生组织中没有检测出表达的存在。

甘蓝型双低隐性核不育杂交种沪油杂1号的选育

沪油杂1号(原编号SH-19)是利用隐性上位互作核雄性不育系20118A育成的甘蓝型双低杂交油菜品种。20118A的育性由2对隐性重叠基因和1对隐性上位基因控制,基因型为aabbRfRf,临保系的基因型为aabbrfrf,恢复系的基因型为AA＿＿或＿＿BB＿＿。沪油杂1号种子含油量42.43%,芥酸含量0.62%,硫甙含量24.23μmol/g。在上海市油菜区域试验中平均产量2243.3kg/hm2,比双高对照汇油50增产11.9%,比双低对照沪油15增产3.8%;在上海市油菜生产试验中平均产量2244.0kg/hm2,分别比对照汇油50增产33.6%,比对照沪油15增产15.9%。

高含油量油菜新品种‘沪油19'的选育和高产栽培技术研究

‘沪油19'是通过品种(系)间复交的方法选育的高含油量甘蓝型双低油菜品种,其芥酸含量0.1%,硫苷含量18.87μmol/g,种子含油量49.16%。在上海市油菜区域试验中,平均产量2 589.75 kg/hm^2,产油量1 273.12 kg/hm^2,较‘沪油15'增加14.78%;在上海市油菜生产试验中,平均产量3 020.85 kg/hm^2,产油量1 485.05 kg/hm^2,较‘沪油1 5'增加21.92%。

播期、密度、氮肥对直播油菜‘沪油17'产量的影响

采用二次通用旋转组合的试验方法,研究了影响直播双低油菜产量的农艺措施,并建立了双低油菜‘沪油17'直播种植的高产栽培数学模型。结果表明:‘沪油17'直播栽培获得产量>2 250 kg/hm^2的农艺方案为:10月23-24日播种,密度41.25万~49.95万株/hm^2,纯氮202.95~227.85 kg/hm^2。农艺措施增产效应顺序为:播期>施氮量>播期与施氮量。

甘蓝型油菜与紫罗兰远缘杂交亲和性初探

以 4个不同甘蓝型油菜品种湘油 15号、湘油 13号、花油 3号和云油 7号为母本 ,紫罗兰为父本进行人工远缘杂交试验 ,结果表明 ,亲和性的强弱与亲本材料有关 ,甘蓝型油菜与紫罗兰属间杂交亲和性较低 ,不同品种甘蓝型油菜与紫罗兰属间杂交亲和指数不同 ,湘油 15号和湘油 13号与紫罗兰杂交的亲和程度高于花油 3号和云油 7号与紫罗兰杂交的亲和程度 ,四者有效亲和指数分别为 0 .16、0 .2 2、0 .0 9和 0 .14。

油菜沪油15中AP2/ERF-B3亚族转录因子的克隆和生物信息学分析

AP2/ERF转录因子家族广泛存在于植物中,参与植物细胞周期、生长发育以及生物和非生物胁迫相关基因表达调控。本文利用油菜UniGene数据库,以拟南芥AP2/ERF-B3亚族转录因子保守序列为信息探针,分离得到2个油菜AP2/ERF-B3亚族的转录因子BnaERFB3-1和BnaERFB3-2。通过PCR和RT-PCR方法分别从双低甘蓝型油菜沪油15的DNA和cDNA中克隆了上述基因。序列分析显示,克隆的BnaERFB3-1-Hy15和BnaERFB3-2-Hy15转录因子与电子克隆的基因序列差异很小,均只有1个氨基酸位点不同,且都没有内含子。从氨基酸序列的相似性、组成成分、理化性质、疏水性/亲水性、序列比对、进化树、功能域、二级结构、三级结构、无序化特性等方面进行了预测和较为全面的分析。结果显示BnaERFB3-1-Hy15和BnaERFB3-2-Hy15是亲水性蛋白,在蛋白质的三级结构上与AtERF5相似,BnaERFB3-1-Hy15和BnaERFB3-2-Hy15蛋白无序化程度大于拟南芥AtERF5。通过分析EST丰度显示,BnaERFB3-1的表达集中在种子中,而BnaERFB3-2的表达则集中在根中。另外,将上述基因分别构建入酵母表达载体和植物双元表达载体,为深入研究该基因在油菜抗逆调控中的作用奠定了基础。

高产油量油菜新品种‘沪油25'的选育

以高含油率的油菜品种‘沪油16'和双低油菜品系9804为亲本,采用品种间复交的方法,育成了高产油量双低油菜新品种‘沪油25',2015年通过上海市农作物品种审定。该品种芥酸含量0.97%,硫苷含量16.12μmol/g,种子含油量49.07%。两年上海市油菜区试,平均产量2 433.60 kg/hm^2,比对照品种‘沪油21'增3.07%,产油量1 257.80 kg/hm^2,比对照增11.00%。2013—2014年上海市油菜生试中,平均产量2 134.40 kg/hm^2,比对照品种‘沪油21'增6.09%,产油量1 064.90 kg/hm^2,比对照增9.49%。‘沪油25'抗病性强,品质优良,抗倒和抗裂角性好,适合机械收获。

甘蓝型双低隐性核不育杂交种沪油杂4号的选育

沪油杂4号是利用隐性上位互作核不育育成的甘蓝型双低油菜三系杂交种,具有高产、稳产、抗油菜菌核病和病毒病的特性。上海市油菜区域试验的平均产量为2 674.5 kg/hm2,比双低对照沪油15增产6.0%,国家冬油菜长江下游区域试验的平均产量为2 590.4 kg/hm2,比对照秦油7号增产5.54%。国家冬油菜长江下游生产试验的平均产量2 520.0 kg/hm2,比对照秦油7号增产8.75%。该品种种子含油率44.63%,芥酸含量为0,硫苷总量29.61μmol/g。