甘蓝型油菜-萝卜附加系中萝卜染色体的(dp)RAPD标记

在已掌握甘蓝型油菜-萝卜附加系染色体构成,并构建萝卜分子连锁图谱的基础上,以甘蓝型油菜?萝卜附加系为材料,利用(dp)RAPD分子标记技术,筛选附加系中外源萝卜9条染色体(A～I)的分子标记,为进一步研究萝卜染色体与连锁群对应关系奠定基础。试验筛选了576个随机引物(组合),有413个能从附加系中扩增出萝卜染色体的(dp)RAPD标记,平均有效引物(组合)占71·7%,其中RAPD反应有效引物率67·7%,dpRAPD反应有效引物率73·2%。试验共得到899个萝卜染色体(dp)RAPD标记,包括354个RAPD标记和545个dpRAPD标记,覆盖萝卜整个基因组的全部9条染色体,不同染色体的标记数目变化范围在41～160,其中最多的是染色体C,最少的是染色体I。

甘蓝与甘蓝型油菜-萝卜d染色体附加系杂交F_1代的获得与鉴定

以甘蓝型油菜-萝卜d染色体附加系为母本,甘蓝为父本对其进行种间有性杂交,通过子房培养克服杂交障碍,获得F1杂交后代.对F1植株进行形态学、细胞学、RAPD及SSR分子标记鉴定,结果表明:获得的F1植株为具有萝卜d染色体的真杂种.

甘蓝型油菜附加系与芸薹属A基因组杂交F_1的获得与鉴定

为了将携带线虫抗性的萝卜d染色体转入到芸薹属A基因组蔬菜中,以甘蓝型油菜-萝卜d染色体附加系do和菜心A3作为试材,通过两者之间的正反交,结合人工辅助授粉,获得F1杂种,并对F1杂种进行形态学、细胞学和分子标记鉴定。结果表明:附加系do与菜心A3间的正反交均可得到杂交F1种子;除反交A3×do获得的少部分种子为假杂种外其他种子均为真杂种;真杂种的形态特征偏向于附加系do,细胞中DNA相对含量介于其双亲之间,但不同杂种细胞的DNA相对含量并不完全一致,部分反交种细胞的DNA相对含量较高。

萝卜-甘蓝型油菜中萝卜基因组的RAPD与dpRAPD分析效率研究

应用RAPD与dpRAPD方法鉴定萝卜-甘蓝型油菜中萝卜基因组,筛选了140条随机引物。结果表明,平均每条引物(组合)能产生的萝卜基因组特异标记数dpRAPD高于RAPD,分别为1.69和1.33;在dpRAPD扩增产物中有77.6％谱带清晰易辨,略高于RAPD(75.4％)。两者所检测到的萝卜基因组标记大部分为各自特异的扩增产物。由于结合了荧光标记引物,dpRAPD反应产物可在Genetic Analyzer上分离检测,因此能检测到100 bp以下的小片段DNA。