甘蔗多糖A、B、C、D、E、F的分离及其降血糖作用

东方医学中流传着印度甘蔗(Saccharum officinarum L.)茎作为一味生药对渴症有疗效。已发现某些禾木科植物具有降血糖作用,考虑甘蔗也可能有同样的生理活性,所以开展对甘蔗降血糖成分的研究。分离方法:将甘蔗糖浆经纤维索管道系统水透析10天,取其非透析部分进行分步分离,以降血糖为检测指标,通过DEAE-Toyopearl 650M柱层,收集其水洗液和稀碱洗液活性部分。水洗液通过琼脂糖凝胶6B(Sepharose 6B)层析得二部分并继续经DEAE-Toyopearl 650M和Sephacryl S-200或S-500层析得到甘蔗多糖A、B、C、D。稀碱洗液相继通过Sepharose 6B、DEAE-Toyopearl 650M层析,

响应面法优化微波辅助热碱提取甘蔗叶多糖工艺研究

为了探究微波辅助热碱法提取甘蔗叶多糖的优化工艺,通过响应面试验进行分析,比较了热碱法和微波辅助热碱法提取甘蔗叶多糖的提取率。根据单因素试验结果,选取液料比、微波功率、碱液浓度三个因素进行Box-Behnken响应面优化试验,采用苯酚硫酸法测定多糖含量。结果表明酸性甘蔗叶多糖(ASLP)的最佳提取条件为液料比为30 mL·g^(-1),提取温度70℃,碱液(Na OH)浓度为0.45 mol·L^(-1),微波提取时间为6 min,微波提取功率350 W,所得ASLP的提取率为13.283±0.529%。微波辅助热碱法有效提高了甘蔗叶的利用效率,为甘蔗叶多糖提取工艺的进一步开发和应用提供参考。

甘蔗叶片多糖的提取及体外抗氧化作用

应用正交试验优选甘蔗叶片多糖的热水浸提工艺,并进行叶片多糖体外抗氧化作用研究。结果显示最优条件为浸提温度80℃,料液比1∶40,提取4次,每次浸提3 h;在11月甘蔗生长后期,甘蔗叶片有较高的多糖含量;甘蔗叶片多糖具有较强清除.OH的能力,对.OH致DNA损伤具有良好的保护作用。

均匀设计优选甘蔗叶多糖颗粒制备工艺

目的研究甘蔗叶多糖颗粒剂的制备工艺。方法单因素考察甘蔗叶粗多糖的辅料,并采用均匀设计试验,以吸湿率、成型率作为指标对辅料比例、润湿剂质量浓度及润湿剂用量等主要因素进行考察,并结合实际需要得出最佳成型工艺。结果最佳处方工艺为甘蔗叶粗多糖-甘露醇的制剂辅料配比为1∶1.5,72.54%乙醇作为润湿剂,乙醇用量为0.4 m L/g,矫味剂阿斯巴甜的加入量为2%。结论颗粒剂成型工艺可行、合理、质量稳定。

甘蔗渣多糖对免疫抑制小鼠免疫功能的影响

目的观察甘蔗渣多糖对免疫抑制小鼠免疫功能的影响。方法采用环磷酰胺(CY)造模法复制小鼠免疫抑制模型,测定甘草渣多糖对实验动物免疫器官重量指数、腹腔巨噬细胞的吞噬功能、迟发型变态反应(DTH)、溶血素(IgM)含量、溶血空斑形成、T细胞百分比和淋巴细胞转化。结果小鼠灌胃剂量为200、400mg/(kg·d)的甘蔗渣多糖能显著提高免疫器官重量,增强小鼠巨噬细胞的吞噬功能,提高DTH和促进IgM、溶血空斑形成并且增加T细胞百分比和淋巴细胞转化率。结论甘蔗渣多糖有显著提高免疫抑制小鼠免疫功能的作用。

甘蔗叶多糖对心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡的抑制作用及其机制

目的探讨甘蔗叶多糖对心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡的抑制作用及其机制。方法结扎大鼠冠状动脉左前降支建立大鼠心肌梗死模型,造模成功后将30只大鼠随机分为模型对照组(MI组)、甘蔗叶多糖处理组(SLP组),另设假手术组(Sham组),Sham组只穿线未予结扎。造模后第1天开始连续4周灌胃,SLP组灌入浓度为4mg/m L甘蔗叶多糖溶液,剂量为1 m L/100 g大鼠体质量,MI组、Sham组灌入相同剂量的生理盐水。4周后开胸取大鼠心脏,采用TUNEL检测梗死边缘区心肌组织细胞凋亡并进行HE染色,采用实时荧光定量PCR检测梗死边缘区组织BCL-2、BAX、Caspase-3 mRNA表达,采用Western blotting检测梗死边缘区组织p-AKT/AKT、p-PI3K/PI3K蛋白表达。结果 Sham组未见心肌细胞凋亡,MI组与SLP组梗死边缘区均有心肌细胞凋亡,Sham组、MI组、SLP组的凋亡率分别为0.017%±0.007%、0.307%±0.048%、0.109%±0.034%,各组间心肌细胞凋亡指数差异均有统计学意义(P均<0.05);与Sham组比较,MI组和SLP组心肌细胞凋亡指数升高,而SLP组相对MI组心肌细胞凋亡指数降低(P均<0.05);与Sham组比较,MI组中BAX、BCL-2、Caspase-3 mRNA表达升高(P均<0.05);与MI组比较,SLP组中BCL-2 mRNA表达升高,BAX、Caspase-3 mRNA表达降低(P均<0.05);与Sham组比较,MI组中pAKT/AKT、p-PI3K/PI3K蛋白表达降低(P均<0.05)。与MI组比较,SLP组中p-AKT/AKT、p-PI3K/PI3K表达升高(P均<0.05)。结论甘蔗叶多糖能抑制大鼠心肌梗死后心肌细胞凋亡,其机制可能与增加抑制凋亡基因BCL-2的表达,减少促凋亡基因BAX、Caspase3的表达,上调p-AKT/AKT、p-PI3K/PI3K蛋白的表达有关。

甘蔗叶多糖的提取分离及体外抗肿瘤作用研究

目的从甘蔗叶中提取分离甘蔗叶多糖,对其结构进行初步分析,并研究其体外抗肿瘤活性。方法采用水提醇沉法和DEAE-纤维素层析柱法得到纯化的甘蔗叶多糖,红外光谱初步分析其结构。MTT法观察其对鼻咽癌细胞株CNE2的生长抑制情况。结果甘蔗叶多糖的提取率为5.42%,经鉴定成分为多糖,其对人鼻咽癌CNE2细胞的生长有抑制作用,且呈明显的剂量依赖关系。结论纯化的甘蔗叶多糖成分均一,具有体外抗肿瘤活性。

甘蔗叶多糖对大鼠心肌梗死心电图及微血管生成的影响

目的:观察甘蔗叶多糖对大鼠心肌梗死模型心电图ST段及CD34、血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,探讨其心肌保护作用的可能机制。方法:健康SD大鼠70只,随机分为实验组(n=28)和对照组(n=42),分别给予甘蔗叶多糖溶液、生理盐水灌胃预处理和后处理,两组均结扎左前降支(left anterior descending,LAD)以建立心肌梗死模型,同步记录开胸前、结扎后1h内每间隔5min肢导联(Ⅰ、Ⅱ、aVL、aVF)和胸导联(V1、V2、V5)心电图,于实验终点行病理检测以确定心肌梗死是否形成,并测定心肌组织微血管计数(MVC)及VEGF的表达。结果:实验组、对照组形成心肌梗死并存活至实验终点的大鼠分别为21只、20只,实验组Ⅰ导联、Ⅱ导联、aVL导联及V5导联ST段抬高幅度小于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。实验组MVC及VEGF的表达高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:甘蔗叶多糖可促进VEGF的表达及微血管的生成,改善心肌梗死大鼠心电图表现,对大鼠心肌梗死具有一定保护作用。

甘蔗叶多糖稳定性影响因素的测定

为了对甘蔗叶多糖的深加工提供参考,采用硫酸-苯酚法测定了甘蔗叶多糖在不同温度、光照条件、pH值、氧化剂、还原剂、食品添加剂和金属离子条件下的稳定性。结果表明:甘蔗叶多糖耐热性较差,耐光性较好;在碱性条件、氧化还原剂、柠檬酸、VC和K+、Al 3+、Ca2+、Cu2+、Fe3+等金属离子溶液中甘蔗叶多糖的稳定性较弱,在酸性条件、苯甲酸钠、Na+溶液中甘蔗叶多糖相对稳定。

甘蔗叶多糖超声波提取工艺研究

采用超声波法,通过单因素及正交试验,在不同的提取温度、提取时间、提取次数和料液比条件下探讨甘蔗叶多糖的提取工艺。实验结果表明,在最佳提取条件:提取温度60℃、提取时间60min、提取次数2次、料液比1∶50(g∶mL)下,甘蔗叶多糖提取率为1.973%。

正交优化甘蔗渣多糖的解吸-微波提取工艺

以糖厂的甘蔗渣为原料,采用乙醇溶液对物料进行解吸,在微波作用下对多糖进行提取研究,以多糖提取率为考察指标,通过单因素实验结合正交试验法确定甘蔗渣多糖的最佳工艺条件为:微波提取时间为3 min、料液比为1∶20、解吸剂浓度(乙醇体积分数)为10%、解吸料液比1∶10。最佳条件下重复实验,甘蔗渣多糖提取率达到0.713%。说明解吸结合微波提取对甘蔗渣多糖的提取具有一定的优势。

甘蔗渣多糖的提取工艺研究

多糖是自然界中含量最丰富的生物聚合物,具有能量储存、结构支持、防御功能和抗原定性等多方面的生物功能。近年来,多糖成为天然药物研究的一个热点。本实验通过用不同提取方法提取甘蔗渣多糖,测得多糖的提取率,综合分析比较各种提取方法的实验数据,确定甘蔗渣多糖的最佳提取工艺。

甘蔗叶多糖对血瘀证下急性心肌梗死模型大鼠的治疗作用及其机制

[目的]探讨甘蔗叶多糖对血瘀证下急性心肌梗死模型大鼠的治疗作用及其机制.[方法]取Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、阳性对照组(阿司匹林肠溶片5mg·kg^-1)和甘蔗叶多糖大、中、小剂量(20.0,10.0,5.0mg·kg^-1)组,给予相应处理.采用皮下注射大剂量盐酸肾上腺素复加冰水冷浴方法建立大鼠急性血瘀模型,在急性血瘀情况下结扎左冠状动脉前降支复制急性心肌梗死模型,检测各组大鼠血液流变学指标、心肌酶水平及心肌超微结构的变化.[结果]与模型对照组比较,甘蔗叶多糖各剂量组体外血栓长度明显缩短,体外血栓湿质量和干质量显著降低,血液黏度降低,红细胞压积及血小板聚集率明显受到抑制,凝血时间延长,天冬酸氨基转移酶、肌酸激酶及乳酸脱氢酶水平降低,相比较差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01,P<0.001),心肌细胞超微结构得到改善.[结论]甘蔗叶多糖对大鼠急性血瘀证下心肌梗死具有保护作用,其可能机制认为与它增强抗氧化酶活性、抑制体外二磷酸腺苷诱导的血小板聚集及改善细胞膜结构有关系.

碱提甘蔗皮多糖提取工艺、初步结构及其对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

【目的】建立碱提甘蔗皮多糖的优化工艺,进一步探究其结构特征,并评价其对α-葡萄糖苷酶的抑制作用。【方法】采用单因素试验和响应面分析法(RSM)对碱提甘蔗皮多糖(SPAP)提取工艺进行优化,采用苯酚硫酸法测定多糖含量。SPAP经Sevag法除蛋白、AB-8除色素后进行结构表征,主要包括高效液相色谱法(HPLC)检测多糖分子量分布,气相-质谱色谱仪(GC-MS)进行单糖分析及傅里叶红外光谱仪(FT-IR)对官能团进行分析。采用4-硝基苯基-D-吡喃葡糖苷(PNPG)法测定多糖提取物对α-葡萄糖苷酶抑制作用。【结果】SPAP的最佳提取条件为提取温度37℃、氢氧化钠(NaOH)浓度5%、料液比1∶46(g·mL-1)、提取次数4次,在此条件下SPAP得率达到10.84%。经除蛋白、色素后,SPAP含量达到86.54%,主要由阿拉伯糖、木糖、葡萄糖和半乳糖4种单糖组成,分子量为3.03×103 kD,可能为吡喃型杂多糖,呈现α或β构型。此外,SPAP表现出良好的α-葡萄糖苷酶抑制作用,其抑制率达到78.31%。【结论】对碱提甘蔗皮多糖进行工艺优化,可有效利用原料、提高产出和效率;由HPLC、FT-IR、GC-MS等方面初步阐述了SPAP的结构特性,同时SPAP对α-葡萄糖苷酶表现出良好的抑制作用,具有一定的降糖潜力,研究结果为进一步研究SPAP的构效关系提供了理论依据。

甘蔗叶多糖对大鼠心肌梗死后动态心电图和心功能的影响及机制研究

目的:观察甘蔗叶多糖对大鼠心肌梗死模型24h心电图和心功能的影响及其机制。方法:将健康SD大鼠随机分为实验组、模型组和假手术组,实验组和模型组通过结扎大鼠冠状动脉左前降支(LAD)复制心肌梗死模型,假手术组只开胸不结扎。于术前24h、30min和术后连续4周,实验组灌胃给予甘蔗叶多糖溶液,模型组和假手术组给予等量生理盐水。记录术前、结扎LAD后24h内每间隔1h肢导联(Ⅰ、Ⅱ、aVL)和胸导联(V_1、V_5)心电图,分析ST段偏移情况。术后4周,用心脏彩超测定左室射血分数(LVEF)、左室舒张末期内径(LVEDD)及左心室收缩末期内径(LVESD),分光光度法检测心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量。结果:术后连续24h,实验组Ⅰ导联、Ⅱ导联及V5导联ST段抬高幅度均明显小于模型组(P<0.05)。与模型组相比,实验组大鼠LVEDD及LVESD明显下降,LVEF显著升高,同时心肌组织SOD活性升高,MDA含量降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:甘蔗叶多糖可改善大鼠心肌梗死24h内的心电图表现及其心功能,其机制可能与提高SOD活性、清除氧自由基、提高机体的抗氧化能力有关。

超声结合酶法辅助提取甘蔗渣中水溶性多糖的工艺优化

该文以甘蔗渣为原材料,采用单因素试验和正交试验对甘蔗渣中水溶性多糖的提取条件进行优化,然后对其进行紫外吸收扫描和红外光谱分析。先用果胶酶、纤维素酶、中性蛋白酶逐个进行试验,比较提取率,结果表明,纤维素酶提取率最高。以纤维素酶作为辅助酶结合超声进行优化试验,结合极差分析和方差分析得到最佳优化工艺条件:料液比1∶30(g/mL),酶解pH5.0,纤维素酶添加量为底物的4.5%,超声酶解时间60 min,超声酶解温度55℃,超声功率350 W,平均提取率为12.78%,比优化之前提取率高16.78%。紫外吸收图谱显示在波长260 nm~280 nm无特征吸收峰,即多糖中不含核酸和蛋白质,通过红外光谱检测官能团的伸缩振动峰图谱表明提取物质符合多糖的基本特征,进一步说明该提取工艺的可靠性。

甘蔗叶多糖提取工艺优化及生物活性研究

为探究甘蔗叶中多糖的提取效果,在研磨预处理的基础上,结合超声辅助提取以提高多糖的提取率,并通过红外光谱探讨球磨预处理对甘蔗叶粉末结构的影响以及甘蔗叶多糖的化学结构,体外活性实验考察其抑菌性及抗氧化活性。结果显示:球磨预处理在研磨时间70 min、研磨频率20 Hz、球料比45∶1(g/g)时提取效果最优,此时甘蔗叶多糖的提取量为8.52 mg/g;响应面优化得到超声辅助提取研磨预处理后甘蔗叶多糖的工艺条件为超声时间66 min、超声功率230 W、超声温度65℃、液料比25∶1(mL/g),此时多糖提取量为10.10 mg/g,较未超声处理提高18.54%。体外抑菌实验结果发现,甘蔗叶多糖对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有抑制作用,对金黄色葡萄球菌的抑制效果优于大肠杆菌。体外抗氧化实验结果表明,甘蔗叶多糖具有良好的清除DPPH自由基、羟基自由基的能力,但略弱于VC。红外光谱结果显示,甘蔗叶粉末经球磨预处理后基团未发生改变,提取的甘蔗叶多糖具有多糖类物质的特征吸收峰。

甘蔗叶多糖对CNE_2细胞的体外抑制作用研究

目的:研究甘蔗叶多糖对鼻咽癌CNE2细胞株的体外抑制作用,并初步探讨其作用机制。方法:采用热水浸提及DEAE-纤维素层析柱法提纯甘蔗叶多糖,以MTT法观察其体外抗肿瘤活性,透射电子显微镜观察凋亡细胞的超微结构,采用流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡率,实时荧光定量PCR检测凋亡相关促凋亡基因(Bax)、凋亡抑制基因(Bcl-2)的变化。结果:浓度为10、20、40、80、160μg/mL的甘蔗叶多糖作用后,CNE2细胞抑制率及凋亡率均明显增加(P<0.01),且呈浓度依赖性。电镜下可见160μg/mL浓度的甘蔗叶多糖可使CNE2细胞出现凋亡小体。荧光定量PCR技术测定Bax在CNE2细胞中表达上调,Bcl-2则表达下调,并呈浓度依赖关系。结论:甘蔗叶多糖能明显抑制人鼻咽癌CNE2细胞增殖,诱导细胞凋亡,可能通过提高Bax表达及降低Bcl-2的表达,从而发挥抗肿瘤作用。

甘蔗叶多糖对非肥胖性糖尿病小鼠的预防作用及其机制

目的研究甘蔗叶多糖对非肥胖性糖尿病（NOD）小鼠糖尿病的预防作用及其作用机制。方法采用4周龄♀NOD小鼠,每天ig给予甘蔗叶多糖,连续16周,观察甘蔗叶多糖对NOD小鼠糖尿病发病率的影响并探讨其预防机制。结果甘蔗叶多糖可明显改善NOD小鼠的一般状况,抑制小鼠的体重下降;与模型组比较,甘蔗叶多糖可显著降低NOD小鼠的发病率及升高小鼠的胰岛素水平,差异具统计学意义;经甘蔗叶多糖干预后,小鼠胰腺组织的病理改变明显得到抑制;与模型组比较,甘蔗叶多糖能降低小鼠血清中丙二醛、一氧化氮、谷胱甘肽过氧化物酶的含量,增加血清中超氧化物歧化酶的活力。结论甘蔗叶多糖对NOD小鼠具预防糖尿病的作用,其作用机制可能与改善小鼠体内的炎症反应和增强小鼠体内的抗氧化能力有关。

甘蔗渣多糖的纯化工艺

目的:研究甘蔗渣中多糖的最佳纯化工艺。方法:用Savage法、TCA法脱蛋白;用双氧水法、活性炭法脱色;用AB-8,DB301,D101,MG-1大孔树脂纯化甘蔗渣多糖,用苯酚-硫酸法测定多糖的含量。结果:最佳工艺为用Savage法脱蛋白、活性炭脱色、MG-1型大孔吸附树脂纯化(上样量为0.3 g,柱高35 cm、流速10 mL/15 min),经富集后甘蔗渣多糖的含量由51.11%提高到了83.57%。结论:本实验为甘蔗渣多糖的分离纯化条件提供了参考,为甘蔗渣的进一步开发研究提供了依据。