丹参中甘西鼠尾新酮A通过干扰LPS与TLR4/MD2的结合发挥抗炎作用

研究丹参中是否存在能与Toll样受体4/髓样分化蛋白2(Toll like receptor 4/myeloid differentiation protein 2,TLR4/MD2)结合发挥抗炎活性的化合物。本文以TLR4/MD2为靶蛋白虚拟筛选了丹参已报道的化学成分,并检测了筛选出的甘西鼠尾新酮A(neoprzewaquinone A,Neo A)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)与细胞膜上受体结合的影响、与蛋白的亲和力作用、对LPS介导细胞中TLR4与MD2二聚化的影响、对LPS所致细胞核转录因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)p65蛋白磷酸化及细胞炎性因子分泌的影响。研究结果表明,丹参中Neo A与TLR4/MD2虚拟结合能最高,为−12.8 kcal·mol^(-1);Neo A可极显著抑制LPS与细胞膜上的受体结合(P<0.01),且Neo A能与rhTLR4/MD2、rhTLR4、r hMD2结合,亲和力分别为267、534、228 nmol·L^(-1);Neo A与TLR4/MD2的氨基酸残基TYR131、PHE121等位点可能存在烷基及π-烷基疏水作用;Neo A能极显著抑制LPS介导细胞中TLR4与MD2的二聚化(P<0.01),显著抑制NF-κBp65蛋白的磷酸化水平(P<0.05);Neo A能显著或极显著抑制LPS所致细胞一氧化氮(nitric oxide,NO)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的分泌(P<0.05,P<0.01)。综上,Neo A可通过与TLR4/MD2结合干扰LPS与TLR4/MD2结合发挥抗炎作用,可能是一种TLR4/MD2抑制剂,可用于TLR4/MD2为靶点的炎症相关疾病治疗。

甘西鼠尾根化学成分研究

目的 研究甘西鼠尾 (SalviaprzewalskiiMaxim)的化学成分。方法 应用硅胶柱色谱法对甘西鼠尾根中化学成分进行分离 ,根据理化常数测定和光谱 (IR ,FAB MS ,EI MS ,1 HNMR ,1 3 CNMR ,1 H 1 HCOSY ,1 H 1 3 CCOSY ,HMBC ,NOESY)分析鉴定化合物的结构。结果 获得并鉴定了 8个化合物结构 :丹参酮II A(I) ,隐丹参酮 (II) ,紫丹参甲素(III) ,柳杉酚 (IV) ,熊果酸 (V) ,2α ,3α 二羟基乌苏 1 2 烯 2 8 酸 (VI) ,齐墩果酸 (VII) ,甘西鼠尾新酮A(VIII)。结论VIII为新化合物 ,II ,IV ,V 。

基于分子对接和表面等离子体共振技术筛选IL-15Rα小分子抑制剂

本研究旨在基于分子对接和表面等离子体共振(surface plasmon resonance,SPR)技术,挖掘与白细胞介素15受体α(interleukin-15 receptorα,IL-15Rα)特异性结合并影响其活性的中药活性分子。用AutoDock分子对接软件进行3000多种化合物(来自于48种中药)与IL-15Rα的分子模拟对接,筛选出特异性结合的化合物,用基于SPR技术的Biacore T200生物分子互作分析系统对筛选出的目标化合物的结合特异性进行确认,最后用细胞生物学实验验证目标化合物对IL-15Rα的生物学效应。结果显示,甘西鼠尾新酮A(neoprzewaquinone A,Neo)是3000多种化合物中与IL-15Rα特异性结合亲和力最高的中药活性分子,解离常数(dissociation constant,K_(D))值为(0.62±0.20)µmol/L。细胞实验结果显示,Neo能显著抑制IL-15诱导的Mo7e细胞的增殖效应,其半数抑制浓度(IC_(50))为1.075µmol/L,约为先锋霉素V(Cefazolin,1L-15特异性拮抗剂)IC_(50)的1/120。以上结果表明,Neo是IL-15Rα的特异性抑制剂,可能是一种新的潜在活性药物,可用于以IL-15Rα为靶点的疾病治疗。