甘西鼠尾草总酚酸提取物对电离辐射诱导小鼠肠道炎症的保护作用及机制

目的研究甘西鼠尾草总酚酸提取物(SPE)对电离辐射诱导小鼠肠道炎症的保护作用,探讨其调节Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体信号通路抑制电离辐射的作用机制。方法选取48只雄性KM小鼠,按照随机数字表法分为正常对照组、辐射模型组、SPE低剂量组、SPE中剂量组、SPE高剂量组和阳性药白藜芦醇组(白藜芦醇组),每组8只。除正常对照组不予以辐射外,其余各组小鼠均接受5.5 Gy^(60)Coγ射线一次性照射。辐射前2 d及辐射后7 d,SPE低、中、高剂量组小鼠分别以75 mg/kg、150 mg/kg、300 mg/kg剂量给予相应的SPE溶液灌胃;正常对照组、辐射模型组小鼠分别给予0.9%氯化钠溶液灌胃,白藜芦醇组小鼠给予剂量为30 mg/kg的白藜芦醇溶液灌胃。辐射7 d后,观察各组小鼠小肠肠道组织病理损伤、外周血常规指标(白细胞、红细胞、血小板、血红蛋白)、脾脏系数及小肠肠道组织中NLRP3、NF-κB、白细胞介素-1β(IL-1β)蛋白表达的变化。结果与辐射模型组相比,白藜芦醇组小鼠肠道组织浸润性炎症损伤程度显著降低,SPE各组小鼠肠道组织炎性症状均减轻。各组白细胞、红细胞、血小板、血红蛋白水平比较差异有统计学意义(均P<0.01)。与正常对照组相比,辐射模型组、SPE低、中、高剂量组和白藜芦醇组白细胞、红细胞、血小板、血红蛋白水平均降低(均P<0.01)。与辐射模型组相比,SPE低、中、高剂量组和白藜芦醇组白细胞、红细胞、血小板、血红蛋白水平均升高(P<0.05或P<0.01)。各组小鼠的脾脏系数比较差异有统计学意义(P<0.01)。与正常对照组相比,辐射模型组、SPE低、中和高剂量组的脾脏系数均降低(P<0.01)。与辐射模型组相比,SPE高剂量组、白藜芦醇组脾脏系数均升高(0.58±0.09、0.64±0.14比0.46±0.08)(P<0.05或P<0.01)。各组NLRP3、NF-κB、IL-1β蛋白表达比较差异有统计学意义(均P<0.01)。与正常对照组相比,辐射模型组、SPE低、中、高剂量组、白藜芦醇组NLRP3、NF-κB、IL-1β蛋白表达均升高(P<0.05);与辐射模型组相比,SPE低、中、高剂量组和白藜芦醇组NLRP3、NF-κB、IL-1β蛋白表达均降低(P<0.05)。结论SPE可以通过调节NLRP3炎症小体减轻电离辐射引起的肠道炎症。SPE通过抑制TLR4蛋白,降低NLRP3炎症小体的表达,有效抑制电离辐射诱导的肠道炎症产生。

甘西鼠尾草中三个新的萜类化合物

采用反复硅胶、葡聚糖凝胶、反相硅胶及MC I凝胶柱色谱等多种色谱方法分离纯化了甘西鼠尾草的化学成分,根据理化性质和波谱数据对化合物的结构进行了鉴定.由甘西鼠尾草的根和根茎的50%乙醇提取物中得到了2个新的二萜化合物,命名为甘西鼠尾三醇A(1)和甘西鼠尾三醇B(2),同时得到了一个新的单萜苷化合物,命名为甘西鼠尾甲苷(3).

甘西鼠尾草化学成分及药理作用研究进展

本文综述了甘西鼠尾草的化学成分及药理作用研究进展,为甘西鼠尾草的进一步研究和开发利用提供参考。

甘西鼠尾草化学成分的研究

从甘西鼠尾草 ( Salvia przewalsii Maxim.)根的脂溶性部分分得 14个化合物 ,通过 UV,IR,MS,1H NMR及 13C NMR等实验分别确定为丹参酮 A( 1) ,丹参酮 ( 2 ) ,丹参酸甲酯 ( 3) ,丹参醛 ( 4 ) ,去甲丹参酮 ( 5) ,隐丹参酮 ( 6) ,β-谷甾醇 ( 7) ,正二十七烷( 8) ,二氢丹参酮 ( 9) ,丹参酮 B( 10 ) ,羟基丹参酮 ( 11) ,紫丹参乙素 ( 12 ) ,丹参新醌甲( 13) ,丹参新醌乙 ( 14)。其中丹参醛为首次从该植物中分得。

甘西鼠尾草化学成分研究

采用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱及其他分离手段从甘西鼠尾草中分离得到12个化合物,根据化合物理化性质和波谱数据分别鉴定为:丹参酮ⅡA(1)、丹参酮Ⅰ(2)、丹参内酯(3)、隐丹参酮(4)、丹参酸甲酯(5)、间羟基苯甲醛(6)、迷迭香酚(7)、异迷迭香酚(8)、紫丹参甲素(9)、紫丹参乙素(10)、二氢丹参酮Ⅰ(11)、丹参新醌甲(12)。其中化合物7、8为首次从该植物中分离得到,化合物6为首次从该属植物分离得到。

甘西鼠尾草和丹参注射液抗大鼠脑缺血及对血液流变学影响的研究

目的 :比较甘西鼠尾草和丹参注射液对脑缺血大鼠脑梗塞体积及对血液流变学的影响。方法 :用大脑中动脉阻断术(MCAO)制作大鼠脑缺血模型 ,采用计算机图像分析仪测定脑梗塞的体积 ,测定血液流变学各项指标 ,在两种药物间进行比较。结果 :两种药物 (6和 12 g/kg)均能明显减少大脑中动脉阻断所致的脑梗塞范围 ,降低大鼠低全血粘度、全血还原粘度以及红细胞压积、红细胞刚性指数、红细胞聚集指数 ,两种药物对血浆粘度、红细胞聚集指数均无明显影响。结论 :甘西鼠尾草提取物和丹参注射液可以明显缩小脑缺血大鼠脑梗塞体积 ,并能改善全血粘度等多个血液流变学指标 ,作用基本相同。

甘西鼠尾草根化学成分研究

目的：研究甘西鼠尾草根的化学成分。方法：采用硅胶、Sephadex LH-20、RP-C18等色谱方法进行分离纯化,通过核磁共振、质谱等波谱分析技术鉴定化合物结构。结果：从甘西鼠尾草根中分离鉴定了17个化合物,分别为：丹参新醌B（1）、丹参醇C（2）、异隐丹参酮（3）、1,2-二氢异二氢丹参酮Ⅰ（4）、异丹参酮ⅡA（5）、二氢丹参酮Ⅰ（6）、丹参内酯（7）、丹参醇B（8）、丹参酮Ⅰ（9）、danshenspiroketallactone（10）、铁锈醇（11）、epi-danshenspiroketallactone（12）、丹参新醌A（13）、sapriolactone（14）、12-hydroxy-6,7-secoabieta-8,11,13-trien-6,7-dial（15）、6α-hydroxysugiol（16）、hypargenin B17（）。结论：其中,化合物1~8为首次从该植物中分离得到。

甘西鼠尾草种子粘液吸水特性、红外光谱分析及提取工艺研究

本研究在对甘西鼠尾草种子粘液的吸水特性和红外光谱进行分析的基础上,利用响应面分析方法优化甘西鼠尾草种子粘液的提取工艺,并利用中心组合设计探讨提取时间、液料比、提取温度3个自变量对甘西鼠尾草种子粘液提取率的影响。结果表明,甘西鼠尾草种子粘液是一类多糖物质,吸水性强,脱水缓慢;甘西鼠尾草种子粘液优化的提取工艺条件为:提取时间3.2 h、液料比54∶1(mL∶g)、提取温度68℃,此时种子粘液提取率为4.93%,这为甘西鼠尾草种子粘液资源的开发应用提供了理论依据。

甘西鼠尾草与丹参主要成分含量的测定

目的:建立高效液相色谱法测定甘西鼠尾草中的主要成分含量,并与丹参作对比.方法:采用Dikma Dia-monsil-C18(4.6×250mm,5μm),0.026%磷酸水溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速为1mL/min,柱温30℃,检测波长280nm.结果:本含量测定方法的线性、准确度、精密度和重复性均良好.结论:本法简便可行、重复性好,可用于甘西鼠尾草中脂溶性与水溶性成分的同时测定.甘西鼠尾草中的主要水溶性成分是迷迭香酸而不是丹酚酸B,甘西鼠尾草中的迷迭香酸和丹参酮ⅡA的含量高于丹参,丹酚酸B的含量低于丹参.

甘西鼠尾草注射液与丹参注射液对大鼠皮层神经细胞缺血性损伤保护作用的比较研究

目的:比较甘西鼠尾草注射液与丹参注射液对体外培养的大鼠大脑皮层神经细胞谷氨酸(Glu)损伤的保护作用。方法:分离培养新生(1d)大鼠大脑皮层神经细胞,加入Glu模拟兴奋性损伤,MTT法测定细胞存活率,比色法测定上清中LDH含量,细胞中SOD、GSH-Px活性、MDA含量。结果:皮层细胞经Glu损伤后,上清LDH含量、细胞中MDA含量显著增加,SOD和GSH-Px活力明显下降,甘西鼠尾草注射液与丹参注射液均可改善上述情况。结论:甘西鼠尾草注射液与丹参注射液可保护由Glu引起的大鼠大脑皮层神经细胞的损伤,其机理可能与抗脂质过氧化、清除自由基有关。

甘西鼠尾草二萜醌类及有关中草药单体化合物对超氧自由基的作用

采用二甲基亚砜在碱性有氧条件下产生超氧阴离子自由基Ｏ－．２的模型方法，利用ＥＳＲ直接观察药用鼠尾草丹参二萜醌类化合物及其它中草药有关单体化合物对Ｏ－．２的增强或抑制效果。结果表明，二萜醌类化合物对Ｏ－．２有不同程度的消除作用，其中对醌类化合物对Ｏ－．２的抑制作用强于邻醌类，分子结构中的羟基对Ｏ－．２的抑制有促进作用。同时，用上述反应产生的Ｏ－．２模型体系研究并讨论了一些中草药有关单体化合物对Ｏ－．２的增强或抑制效能，并对其结构与活性的相关性进行了讨论。

甘西鼠尾草脂溶性成分提取工艺的研究

目的 :研究甘西鼠尾草脂溶性成分提取工艺的最佳条件。方法 :采用L9(34 )正交试验法 ,以甘西鼠尾草中主要抗菌活性成分隐丹参酮和丹参酮Ⅱ A 的含量之和为指标 ,用高效液相色谱法测定。结果 :乙醇浓度和乙醇用量对提取效果有非常显著性和显著性影响。结论 :最佳工艺条件为加 8倍量 95 %的乙醇浸泡 8h后开始渗漉 ,流速 1 0滴 /min。

甘西鼠尾草注射液和丹参注射液抗大鼠急性脑缺血和抗脂质过氧化作用的比较

目的 :比较甘西鼠尾草和丹参两种注射液对大鼠急性脑缺血的影响 ,并对其作用机理进行探讨。方法 :采用大脑中动脉阻断术 (MCAO)制作大鼠急性脑缺血模型 ,采用计算机图像分析仪测定脑梗死的体积 ,TBA比色法测定血清MDA含量 ,放免法测定血清SOD含量 ;电子自旋共振 (ESR)法测定药物对羟自由基的清除作用。结果 :甘西鼠尾草注射液和丹参注射液均可明显减小急性脑缺血大鼠脑梗死体积 ,降低血清MDA含量 ,升高血清SOD含量 ,体外清除羟自由基的作用甘西鼠尾草强于丹参。结论 :甘西鼠尾草和丹参两种注射液作用基本相同 ,提示甘西鼠尾草有可能成为丹参的代用品。

HPLC法同时测定不同产地甘西鼠尾草及丹参中8种主要成分的含量

目的建立同时测定甘西鼠尾草及丹参中丹参素钠、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、二氢丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA含量的HPLC法,对比不同产地甘西鼠尾草及丹参中8种成分的含量。方法采用SunFire C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱。流动相为乙腈(A)-0.8 mL·L^(-1)甲酸超纯水溶液(B),梯度洗脱(0～19 min,20%A～60%A;19～49 min,60%A～81%A;49～53 min,81%A～91%A;53～57 min,95%A)。流速:1.0 mL·min^(-1);检测波长:270 nm;柱温:26℃;进样量:2μL。结果质量浓度与峰面积线性关系良好(r>0.971 3),精密度、重复性及回收率均符合要求。在50 min内甘西鼠尾草及丹参中8种成分均可实现完全分离。结论青海不同产地甘西鼠尾草较其他产地甘西鼠尾草在脂溶性成分和水溶性成分上均有较好的优势,与丹参相比主要的差别在于丹酚酸B和迷迭香酸的含量,丹酚酸B的含量较丹参样品低,其余4种脂溶性成分均优于丹参样品。

甘西鼠尾草总酚酸提取物抗嘌呤霉素氨基核苷诱导的足细胞氧化应激损伤

目的研究甘西鼠尾草总酚酸提取物(SPE)在体内和体外对嘌呤霉素氨基核苷(PAN)肾病大鼠足细胞以及PAN诱导小鼠足细胞氧化应激损伤的作用。方法 (1)建立PAN肾病大鼠动物模型,给予SPE和他克莫司干预,分别在第5、10、15、21天留取肾组织标本,WT1染色计数足细胞数目,免疫荧光观察8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)荧光强度。(2)体外采用PAN致足细胞损伤模型,PAN作用小鼠足细胞24h,分别加入含SPE、丹酚酸B(SalB)、迷迭香酸(RA)及他克莫司的培养基培养6、12、24、48h,观察足细胞骨架相关蛋白F-actin的表达,流式细胞仪分析细胞内活性氧(ROS)荧光强度。结果 (1)肾小球WT1细胞计数结果显示,PAN组第5天时足细胞数已开始下降,第15天达(14.4±0.7)个/肾小球切面,较正常组(37.2±1.5)个/肾小球切面减少(P<0.05),SPE组与阳性对照组(他克莫司组)各时间点足细胞数量高于PAN组;第15天时,阳性对照组肾小球WT1细胞计数与SPE高剂量组较为接近(P>0.05)。第5天时PAN组大鼠肾组织8-OHdG荧光强度较正常组增强,第10天上升至高峰,而后开始减弱,第15天时仍高于正常组;给予药物干预后,大鼠肾组织的8-OHdG荧光强度降低,其中阳性对照组与SPE高剂量组8-OHdG荧光强度较为接近。(2)体外研究发现,PAN作用24h后,F-actin几乎完全解聚,少数细胞尚有残存的被切断的丝状结构,给予SPE、SalB、RA及他克莫司治疗后,PAN诱导的足细胞损伤明显减弱,细胞内重新出现极性分布的微丝。与正常组相比,PAN作用小鼠足细胞24h后ROS荧光强度增加(P<0.05)。给予药物干预后足细胞内ROS荧光强度降低,24hSPE低剂量组、SalB高剂量组和RA高剂量组与阳性对照组足细胞内ROS的荧光强度降低程度相近(P>0.05),24hSalB降低足细胞内ROS荧光强度效果优于RA,且与药物剂量呈正相关。结论本研究从体内及体外证实,SPE对PAN所致足细胞氧化应激损伤具有保护作用。

甘西鼠尾草注射液与丹参注射液对化学性缺氧小鼠能量代谢影响的比较

目的 :比较甘西鼠尾草注射液与丹参注射液对急性化学性缺氧小鼠能量代谢的影响。方法 :通过注射NaNO2 造成小鼠急性化学性缺氧 ,记录小鼠存活时间 ,用ATPase、LD检测试剂盒分别检测脑组织中Na+ K+ ATPase、Ca2 + ATPase和乳酸 (LD)含量 ,比较两药对能量代谢的影响。结果 :两药均可延长化学性缺氧小鼠存活时间 ,增强Na+ K+ ATPase。Ca2 + ATPase活力 ,降低LD含量 ,其中大剂量甘西鼠尾草注射液较大剂量丹参注射液更能增强Na+ K+ ATPase活力 ,而小剂量的甘西鼠尾草注射液在增强Ca2 + ATPase活力上较小剂量的丹参注射液作用更强 ;在降低缺氧小鼠脑组织LD含量方面 ,两药作用基本相似。结论 :丹参注射液和甘西鼠尾草注射液对缺氧小鼠的能量代谢均有改善作用。两药均可延长缺氧小鼠存活时间 ,降低脑组织LD含量 ,提高ATPase活力 。

近红外漫反射光谱法测定甘西鼠尾草药材及总酚酸提取物中迷迭香酸和丹酚酸B含量

目的:建立近红外漫反射光谱法测定甘西鼠尾草药材及总酚酸提取物中迷迭香酸和丹酚酸B的含量。方法:设立校正样品集与测试样品集,采集近红外光谱数据,运用偏最小二乘法建立数学模型,对测试样品样品集进行预测。结果:迷迭香酸:校正样品集的最佳主成分数Rank=12,内部交叉验证均方差RMSECV=0.129、决定系数R^2=99.95。丹酚酸B:校正样品集的最佳主成分数Rank=9,内部交叉验证均方差RMSECV=0.426、决定系数R^2=99.26。结论:采用近红外漫反射光谱法对甘西鼠尾草药材及总酚酸提取物进行质量控制,方法简明、方便快捷、数据准确,适用于大量、快速、方便的药材质量鉴定。

甘西鼠尾草对大鼠高原肺动脉高压的干预作用及机制

目的:探讨甘西鼠尾草(SPM)对大鼠高原肺动脉高压(HAPH)的干预作用及可能的机制。方法:将雄性SD大鼠随机分成对照组、缺氧组、SPM(0.5 g/kg、1 g/kg、2 g/kg)剂量组,每组14只,对照组饲养于西宁(海拔约2260 m),其余组均饲养于玛多县人民医院(海拔约4260 m)。SPM剂量组灌胃不同浓度的SPM(1 ml/100 g),浓度分别为0.5 g/kg、1 g/kg、2 g/kg,对照组和缺氧组灌胃等体积蒸馏水,每日一次,连续4周后,测定大鼠平均肺动脉压(mPAP)并取相同部位肺组织置液氮保存备用。采用RT-PCR法测定每组大鼠肺组织中的细胞增殖核抗原(PCNA)、细胞周期素依赖激酶(CDK4)、细胞周期蛋白D(CyclinD1)、RhoA(Ras同源基因家族成员A)、ROCK1、ROCK2的mRNA表达水平。结果:与对照组比较,缺氧组大鼠mPAP、肺组织中PCNA、CDK4、CyclinD1、RhoA、ROCK1、ROCK2的mRNA表达水平均明显升高(P<0.01)。与缺氧组比较,SPM剂量组大鼠的mPAP、肺组织中PCNA、CDK4、CyclinD1、RhoA、ROCK1、ROCK2的mRNA表达水平均明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:SPM对大鼠HAPH具有一定的预防作用,其机制可能与抑制肺动脉平滑肌细胞过度增殖和RhoA/Rho激酶(ROCK)信号通路过度激活有关。

甘西鼠尾草中丹参酮IIA的含量测定

目的 测定甘西鼠尾草中丹参酮ⅡA的含量.方法 采用HPLC法,色谱柱:ZORBAX Eclipe XDB-C18(250×4.6mm,5μm)柱, 流动相为:甲醇-水(75:25v/v), 检测波长:270nm.结果 丹参酮ⅡA在6.0～100.0μg·ml-1范围内,峰面积与进样浓度线性关系良好,回归方程Y=186.3+245.1C, r=0.9974,平均回收率为98.0%,RSD=1.67% ; 栽培品甘西鼠尾草中丹参酮ⅡA含量: 1年生 0.305% , 2年生0.539% , 3年生0.776% , 野生品0.573%.结论 所测样品中丹参酮ⅡA含量均高于<中国药典>2005年版丹参项下规定要求, 且栽培3年生甘西鼠尾草其丹参酮ⅡA含量高于野生品.