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血清半乳糖缺陷型IgA1和甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶3在IgA肾病发病机制中的研究进展 被引量:2
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作者 魏凯悦 米焱 +1 位作者 王彩丽 吴雅茹 《临床肾脏病杂志》 2023年第8期681-685,共5页
IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)是世界范围内最常见的原发性肾小球疾病,是导致终末期肾病的常见原因。目前,肾活检仍然是其诊断和评估病情活动的金标准。已有研究显示半乳糖缺陷型IgA1(galactose-deficient IgA1,Gd-IgA1)的沉积在IgAN... IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)是世界范围内最常见的原发性肾小球疾病,是导致终末期肾病的常见原因。目前,肾活检仍然是其诊断和评估病情活动的金标准。已有研究显示半乳糖缺陷型IgA1(galactose-deficient IgA1,Gd-IgA1)的沉积在IgAN致病过程中发挥重要作用,GdIgA1的沉积会激活补体系统,包括替代途径、凝集素途经和经典途径,甘露糖结合凝集素是凝集素途径起始的关键因子,活化的甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶(mannose binding lectin-associated serine protease,MASPs)是凝集素途径的关键酶,MASPs存在三种不同的亚型(MASP1、MASP2、MASP3),MASP3作为一种新型的MASP蛋白酶,成为近期研究热点,国内外多项研究表明MASP3能够激活D因子,参与替代途径,造成肾小球系膜细胞的损伤。因此Gd-IgA1的沉积与MASP3地出现在IgAN当中可能存在一些联系,有待于进一步的实验研究。本文旨在系统综述GdIgA1、MASP3在IgAN的发病机制中的作用,并探讨Gd-IgA1与MASP3之间的相关性。 展开更多
关键词 肾小球肾炎 IGA 半乳缺陷型IgA1 甘露结合凝集相关蛋白酶3
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人甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶-2基因的克隆与鉴定 被引量:2
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作者 陈政良 张丽芸 +1 位作者 乔贵林 卢晓 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第4期248-250,共3页
目的 获得人甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶-2(MASP-2)编码区基因。方法采用 RT-巢式 PCR技术从 人胎肝组织总RNA扩增目的cDNA片段,克隆人pGEM-T载体,酶切图谱分析和测序鉴定。结果获得了编码合信号... 目的 获得人甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶-2(MASP-2)编码区基因。方法采用 RT-巢式 PCR技术从 人胎肝组织总RNA扩增目的cDNA片段,克隆人pGEM-T载体,酶切图谱分析和测序鉴定。结果获得了编码合信号 顺序的MASP-2肽链全长cDNA,将其与pGEM-T载体连接,转化大肠杆菌TG1,建立了MASP-2的重组克隆。酶切图 谱与微机分析结果无异;序列分析表明,与报道的人 MASP-2cDNA序列一致。结论成功克隆了人 MASP-2基因,为深 入研究补体凝集素途径的激活机制和甘露聚糖结合凝集素基因突变引起免疫缺损的发病机制奠定了基础。 展开更多
关键词 甘露结合凝集 相关蛋白酶-2 合酶链反应 基因克隆 MBL MASP-2
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人甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2N端片段的原核表达 被引量:3
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作者 蔡学敏 左大明 +2 位作者 赵娜 张丽芸 陈政良 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期235-238,共4页
目的在大肠杆菌中表达人甘露聚糖结合凝集素(MBL)相关丝氨酸蛋白酶2(MASP2)N端片段。方法应用PCR技术从含人MASP2 cDNA的质粒pGEM-MASP2中扩增MASP2-N端基因片段,将其克隆至pGEX4T-1原核表达载体,转化BL21(DE3)感受态菌诱导表达MASP2-N... 目的在大肠杆菌中表达人甘露聚糖结合凝集素(MBL)相关丝氨酸蛋白酶2(MASP2)N端片段。方法应用PCR技术从含人MASP2 cDNA的质粒pGEM-MASP2中扩增MASP2-N端基因片段,将其克隆至pGEX4T-1原核表达载体,转化BL21(DE3)感受态菌诱导表达MASP2-N端蛋白,通过GSTrap亲合层析柱纯化目的蛋白,以SDS-PAGE和Western blot进行鉴定,并以ELISA分析了目的蛋白与MBL-CLR结合的活性。结果从pGEM-MASP2中扩增得到约840 bp的基因片段,构建成重组载体经酶切出现约4900 bp和840 bp片段,测序结果与预期的完全一致。纯化蛋白经SDS-PAGE可见Mr 60000蛋白带,该蛋白可与抗GST抗体反应并能与重组人MBL-CLR蛋白结合。结论获得了表达人MASP2 N端片段的大肠杆菌菌株和重组人MASP2N端片段/GST融合蛋白,为MASP2分子的进一步研究提供了条件。 展开更多
关键词 甘露结合凝集相关蛋白酶2 N端片段 原核表达
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甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶 被引量:5
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作者 王方勇 陈政良 《生命的化学》 CAS CSCD 2002年第2期100-102,共3页
甘露聚糖结合凝集素 (MBL)是一种重要的天然免疫防御分子 ,通过激活MBL相关丝氨酸蛋白酶 (MASP)而启动补体激活凝集素途径来清除病原体。本文就MASP的基因。
关键词 蛋白酶 甘露结合凝集 补体激活
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肝细胞肝癌患者血浆中甘露聚糖结合凝集素和甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶-2的表达水平 被引量:8
5
作者 李捷 朱玲燕 +4 位作者 左大明 张丽芸 卢晓 陈政良 周嘉 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1667-1672,共6页
目的检测肝细胞肝癌患者血浆中甘露糖结合凝集素(MBL)、MBL相关丝氨酸蛋白酶-2(MASP-2)的表达水平,探讨其与肝细胞肝癌发生发展的相关性。方法用酶联免疫吸附测定方法检测64例肝细胞肝癌患者及30例健康人血浆中MBL及MASP-2的表达水平,... 目的检测肝细胞肝癌患者血浆中甘露糖结合凝集素(MBL)、MBL相关丝氨酸蛋白酶-2(MASP-2)的表达水平,探讨其与肝细胞肝癌发生发展的相关性。方法用酶联免疫吸附测定方法检测64例肝细胞肝癌患者及30例健康人血浆中MBL及MASP-2的表达水平,并用统计学方法分析患者血浆中MBL及MASP-2的浓度与各临床指标的相关性。结果肝细胞肝癌患者血浆中MBL和MASP-2的浓度均显著高于健康人群(P=0.014、0.002),MBL/MASP-2比值在健康人群与肝细胞肝癌患者中的差异无统计学意义,此外,患者血浆中MBL与MASP-2并无相关性。在肝细胞肝癌患者中,血浆MBL水平与肿瘤的血管侵犯(r=0.253,P=0.047)和总胆红素水平(r=0.283,P=0.024)呈正相关;血浆中MASP-2水平与肝细胞肝癌的TNM分期呈正相关(r=0.276,P=0.027),而与血浆白蛋白呈负相关(r=0.-0.317,P=0.015)。经ROC曲线分析,MBL和MASP-2曲线下面积分别为0.665(P=0.010)和0.694(P=0.003),对肝细胞肝癌诊断的敏感性分别为50%和89.1%。结论补体凝集素途径的关键分子MBL、MASP-2与肝细胞肝癌患者的炎症状态和疾病进展相关,参与了肝癌的发生与发展。 展开更多
关键词 原发性肝细胞肝癌 甘露结合凝集 甘露结合凝集相关蛋白酶-2 补体
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甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2 EGF片段多克隆抗体的制备及鉴定 被引量:1
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作者 张培星 李涓 +1 位作者 窦倩倩 贾晓晖 《微生物学免疫学进展》 2018年第2期15-19,共5页
目的制备甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2(MBL-associated serine protease-2,MASP-2)EGF功能区蛋白的多克隆抗体并进行鉴定,为后续研究奠定基础。方法利用带有EGF基因片段的p GEX-6P-2原核载体诱导表达GST-EGF融合蛋白,并采用商品... 目的制备甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2(MBL-associated serine protease-2,MASP-2)EGF功能区蛋白的多克隆抗体并进行鉴定,为后续研究奠定基础。方法利用带有EGF基因片段的p GEX-6P-2原核载体诱导表达GST-EGF融合蛋白,并采用商品化GST-Beads进行纯化;将纯化的融合蛋白作为抗原,与弗氏完全佐剂充分混合后,免疫5周龄BALB/c雌性健康小鼠,制备多克隆抗体;利用琼脂双扩散法检测多克隆抗体的效价,并进一步应用Western blot鉴定多克隆抗体的特异性及效价。结果成功表达并纯化EGF蛋白,以此成功制备出特异性强的GST-EGF融合蛋白的多克隆抗体,与其他蛋白无交叉反应;琼脂双扩散法检测的EGF抗体效价为1∶8;Western blot检测的EGF抗体效价大于1∶2 000。结论成功制备出具有特异性强且效价高的GST-EGF蛋白的多克隆抗体。 展开更多
关键词 甘露结合凝集相关蛋白酶2 表皮生长因子功能区 多克隆抗体 琼脂双扩散法 免疫印迹
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甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶与相关疾病最新研究进展 被引量:5
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作者 刘雪晴 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2017年第16期4159-4161,共3页
恶性肿瘤与自身免疫性疾病的发病率逐年增高,国内外学者的目光逐渐聚焦在天然免疫这一方面。补体系统则是天然免疫中的关键环节,其在疾病发生、发展过程中所起作用也越来越受到重视。补体是存在于人或动物血清中一组不耐热的且具有酶活... 恶性肿瘤与自身免疫性疾病的发病率逐年增高,国内外学者的目光逐渐聚焦在天然免疫这一方面。补体系统则是天然免疫中的关键环节,其在疾病发生、发展过程中所起作用也越来越受到重视。补体是存在于人或动物血清中一组不耐热的且具有酶活性的蛋白质,并非单一分子,是由30多种蛋白成分组成的限制性蛋白酶解系统,又称为补体系统。广泛参与机体的多种免疫效应机制。补体需要被激活才能发挥其相应的生物学作用。 展开更多
关键词 甘露结合凝集 甘露结合凝集相关蛋白酶 补体系统 基因多态性
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甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶1对肝癌细胞增殖和迁移的作用及机制研究
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作者 任琪琪 黄伟 +1 位作者 马韬 陆翠华 《中华消化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期398-405,共8页
目的探究甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶1(MASP1)对肝癌细胞生物学行为的影响及可能分子机制。方法选取2022年1月10日至10月25日在南通大学附属医院行肝癌切除手术患者的20对新鲜肝癌组织和癌旁(距癌组织3 cm)正常组织标本并分析MASP... 目的探究甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶1(MASP1)对肝癌细胞生物学行为的影响及可能分子机制。方法选取2022年1月10日至10月25日在南通大学附属医院行肝癌切除手术患者的20对新鲜肝癌组织和癌旁(距癌组织3 cm)正常组织标本并分析MASP1的表达情况。收集2012年3月1日至2017年5月20日南通大学附属医院病理科组织标本库中67例肝癌患者的癌组织及对应的癌旁(距癌组织3 cm)正常组织,分析MASP1的表达水平与肝癌患者临床资料的相关性。培养人肝癌细胞系SK-Hep1、Hep3B并构建MASP1过表达和MASP1敲减细胞株,设立SK-Hep1阴性对照、SK-Hep1 MASP1过表达组与Hep3B阴性对照和Hep3B MASP1敲减组。通过裸鼠皮下移植瘤实验分析MASP1对肝癌细胞增殖的影响。通过蛋白质印迹法检测MASP1对上皮-间质转化相关蛋白质[神经钙黏素、基质金属蛋白酶9(MMP9)、上皮钙黏素]表达的影响,以及MASP1对磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关蛋白质的表达及其磷酸化水平的影响。统计学方法采用独立样本t检验、配对t检验和卡方检验。结果20对新鲜组织标本的免疫组织化学染色结果显示,MASP1在肝癌组织中的表达低于癌旁正常组织(3.73±1.03比6.76±1.46),差异有统计学意义(t=16.97,P<0.001)。67例肝癌患者的临床资料与MASP1的表达水平相关性分析显示,MASP1的表达水平与肿瘤有无侵犯血管有关,差异有统计学意义(χ^(2)=5.20,P=0.023)。裸鼠皮下移植瘤实验显示,SK-Hep1 MASP1过表达组小鼠的皮下肿瘤比SK-Hep1阴性对照组体积更小、重量更轻[(165.42±149.08)mm^(3)比(260.42±179.78)mm^(3)、(0.13±0.12)g比(0.18±0.12)g],差异均有统计学意义(t=5.15、3.89,均P<0.05)。蛋白质印迹法显示,SK-Hep1 MASP1过表达组神经钙黏素和MMP9表达低于SK-Hep1阴性对照组,上皮钙黏素表达高于SK-Hep1阴性对照组(0.73±0.01比1.02±0.02、0.40±0.01比0.69±0.01、0.91±0.02比0.78±0.02),差异均有统计学意义(t=24.23、36.87、9.27,均P<0.001)。Hep3B MASP1敲减组神经钙黏素和MMP9表达高于Hep3B阴性对照组,上皮钙黏素表达低于Hep3B阴性对照组(1.04±0.01比0.31±0.01、0.54±0.02比0.04±0.01、0.56±0.01比0.93±0.01),差异均有统计学意义(t=163.20、53.16、60.74,均P<0.001)。SK-Hep1 MASP1过表达组的磷酸化PI3K、磷酸化Akt、磷酸化mTOR的表达低于SK-Hep1阴性对照组(0.59±0.01比1.02±0.01、0.64±0.01比1.12±0.02、0.10±0.01比1.05±0.02),Hep3B MASP1敲减组的磷酸化PI3K、磷酸化Akt、磷酸化mTOR的表达高于Hep3B阴性对照组(0.96±0.01比0.55±0.01、0.99±0.01比0.38±0.01、0.93±0.02比0.06±0.01),差异均有统计学意义(t=40.87、40.91、87.30、44.17、107.50、67.28,均P<0.001)。结论MASP1在肝癌组织中低表达,并且与肝癌患者的不良预后及肿瘤血管侵袭的发生显著相关,其可能通过调控PI3K/Akt/mTOR信号通路影响肝癌细胞的增殖和迁移能力,提示MASP1有望成为治疗肝癌的关键基因。 展开更多
关键词 肝细胞癌 甘露结合凝集相关蛋白酶1 细胞增殖 迁移
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甘露糖结合凝集素在小鼠葡聚糖硫酸钠结肠炎发病中的机制研究 被引量:7
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作者 吴瑛 汪芳裕 +1 位作者 魏娟 朱东海 《医学研究生学报》 CAS 2010年第2期141-144,共4页
目的甘露糖结合凝集素(Mannan-binding lectin,MBL)可与甘露糖相关丝氨酸蛋白酶(MBL-associated serineproteases,MASP)结合激活补体系统级联反应。文中检测葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)诱导小鼠急性肠炎的血清MBL与MASP... 目的甘露糖结合凝集素(Mannan-binding lectin,MBL)可与甘露糖相关丝氨酸蛋白酶(MBL-associated serineproteases,MASP)结合激活补体系统级联反应。文中检测葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)诱导小鼠急性肠炎的血清MBL与MASP表达水平,以及在糖皮质激素治疗后两者的表达情况。方法将40只8周龄Balb/c小鼠随机分为正常组、模型组、治疗组和对照组,每组10只小鼠。自由饮用5%DSS溶液7 d,造成急性溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)模型。小鼠腹腔麻醉后取主动脉血,并立即分离血清,用ELISA方法检测其MBL与MASP的浓度。结果DSS诱导肠炎中MBL与MASP的表达明显高于正常组。用糖皮质激素治疗后MBL的水平明显下降,但MASP的水平变化无统计学意义。结论在5%DSS溶液诱导的小鼠急性溃疡性结肠炎模型中,MBL与MASP相关信号通路的活化可能参与了UC的发病与进展。糖皮质激素抑制了MBL的产生,可能与其对UC的治疗有关,而与MASP无关。 展开更多
关键词 甘露结合凝集 甘露相关蛋白酶 溃疡性结肠炎 泼尼松龙
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甘露糖结合凝集素与炎性肠病相关性的研究进展 被引量:3
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作者 吴瑛 汪芳裕 《医学研究生学报》 CAS 2009年第2期217-220,共4页
甘露糖结合凝集素(MBL)属于凝集素家族,是机体先天性免疫的重要成分,有激活补体系统、调理吞噬等作用,并与许多免疫相关性疾病有关。炎性肠病包括溃疡性结肠炎和克罗恩病,目前普遍认为其发病机制与自身免疫损害密切相关。近年研究表明,... 甘露糖结合凝集素(MBL)属于凝集素家族,是机体先天性免疫的重要成分,有激活补体系统、调理吞噬等作用,并与许多免疫相关性疾病有关。炎性肠病包括溃疡性结肠炎和克罗恩病,目前普遍认为其发病机制与自身免疫损害密切相关。近年研究表明,MBL基因的多态性导致了其血清水平的个体差异,且与炎性肠病的发病率、临床症状、病程等具有相关性。文中综述了MBL及其与炎性肠病间相关性的研究进展。 展开更多
关键词 甘露结合凝集 炎性肠病 甘露相关蛋白酶 基因多态性
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甘露聚糖结合凝集素的丝氨酸蛋白酶结合位点初步研究 被引量:1
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作者 蔡学敏 赵娜 +2 位作者 左大明 张丽芸 陈政良 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期202-207,共6页
采用ELISA技术,建立人甘露聚糖结合凝集素(MBL)与MBL相关丝氨酸蛋白酶(MASP)结合的检测体系。设计合成一系列MBL胶原样区(CLR)的相应短肽进行抑制实验,发现MASP结合于MBL分子CLR中一个含16个氨基酸残基的区域,即成熟MBL肽链的第45~60... 采用ELISA技术,建立人甘露聚糖结合凝集素(MBL)与MBL相关丝氨酸蛋白酶(MASP)结合的检测体系。设计合成一系列MBL胶原样区(CLR)的相应短肽进行抑制实验,发现MASP结合于MBL分子CLR中一个含16个氨基酸残基的区域,即成熟MBL肽链的第45~60位氨基酸残基,该区域位于Gly-X-Y三联体重复序列中Gly-Gln断裂的C端。还发现分别含1个突变残基的3种突变型(32Cys、34Asp和37Glu)MBL蛋白与MASP的结合具有类似野生型MBL蛋白的特征,但其结合能力明显降低,表明这3个突变残基位于MBL的MASP结合位点之外。 展开更多
关键词 甘露结合凝集 蛋白酶 结合位点 合成肽
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甘露糖结合凝集素在严重呼吸综合征病毒感染中的作用
12
作者 周双成(摘) 瞿涤(校) 《国外医学(微生物学分册)》 2005年第6期40-40,共1页
甘露糖结合凝集索(mannose-binding lectin,MBL)是天然免疫中重要的模式识别分子,能在机体产生特异性免疫前,作为体液免疫因子发挥抗病毒作用。MBL可以通过多重糖识别功能域与微生物表面的多糖重复序列结合,经MBL相关的丝氨酸蛋... 甘露糖结合凝集索(mannose-binding lectin,MBL)是天然免疫中重要的模式识别分子,能在机体产生特异性免疫前,作为体液免疫因子发挥抗病毒作用。MBL可以通过多重糖识别功能域与微生物表面的多糖重复序列结合,经MBL相关的丝氨酸蛋白酶途径,激活补体系统,并增强吞噬作用。为了探讨MBL在严重呼吸道综合征(SARS)冠状病毒感染中的作用,本文作者分析了SARS患者血清MBL水平和MBL基因型与SARS易感的相关性, 展开更多
关键词 甘露结合凝集 冠状病毒感染 呼吸综合征 MBL基因 SARS患者 体液免疫因子 蛋白酶 呼吸道综合征 特异性免疫 抗病毒作用
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广西扶绥县壮族人群MASP1基因单核苷酸多态性与肝癌遗传易感性的关系
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作者 郭辉 魏斐斐 +1 位作者 蒋群湘 谢裕安 《广西医学》 CAS 2019年第9期1065-1068,1072,共5页
目的探讨广西扶绥县壮族人群甘露聚糖结合凝集素关联丝氨酸蛋白酶(MASP)1基因rs3774268和rs17040位点单核苷酸多态性(SNP)与肝癌易感性的关系。方法在广西扶绥县壮族人群中,选择肝癌家系79例和正常对照家系(正常对照组)40例为研究对象,... 目的探讨广西扶绥县壮族人群甘露聚糖结合凝集素关联丝氨酸蛋白酶(MASP)1基因rs3774268和rs17040位点单核苷酸多态性(SNP)与肝癌易感性的关系。方法在广西扶绥县壮族人群中,选择肝癌家系79例和正常对照家系(正常对照组)40例为研究对象,肝癌家系包括肝癌患者(肝癌组)20例及其直系亲属(非肝癌组)59例。采用飞行时间质谱技术检测MASP1基因rs3774268、rs17040位点的基因型和等位基因频率。采用Logistic回归模型分析MASP1基因rs3774268、rs17040位点SNP与肝癌发病风险的关系。结果MASP1基因rs3774268位点携带AA基因型6例,GG基因型79例,GA基因型34例。MASP1基因rs17040位点携带CC基因型101例,CT基因型17例,非肝癌组中有1例未能检测出rs17040位点的基因型。肝癌组与非肝癌组rs3774268和rs17040位点各基因型和等位基因频率比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。肝癌组与正常对照组rs3774268位点的基因型频率、rs17040位点各基因型和等位基因频率比较,差异均无统计学意义(均P>0.05);而肝癌组rs3774268位点的A等位基因频率高于正常对照组(P<0.05)。Logistic回归分析显示rs3774268位点的A等位基因与肝癌的发生相关(P<0.05)。结论MASP1基因rs3774268位点的SNP与广西扶绥县壮族人群肝癌高发家系遗传易感性存在关联,而rs17040位点的SNP与之可能无关。 展开更多
关键词 肝细胞癌 甘露聚糖结合凝集素关联丝氨酸蛋白酶1基因 单核苷多态性 遗传易感性 相关性 壮族 广西
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MASP-2、MACC1联合miR-17对结肠癌腹腔镜全结肠系膜切除术患者的预后评估价值
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作者 马剑锋 黑涛 +1 位作者 赵正国 刘景华 《河南医学研究》 CAS 2023年第19期3517-3521,共5页
目的探讨甘露糖结合凝集素相关的丝氨酸蛋白酶2(MASP-2)、结肠癌转移相关基因1(MACC1)联合微小RNA-17(miR-17)对结肠癌腹腔镜全结肠系膜切除术(CME)患者的预后评估价值。方法选取2018年3月至2020年3月郑州市第七人民医院收治的80例结肠... 目的探讨甘露糖结合凝集素相关的丝氨酸蛋白酶2(MASP-2)、结肠癌转移相关基因1(MACC1)联合微小RNA-17(miR-17)对结肠癌腹腔镜全结肠系膜切除术(CME)患者的预后评估价值。方法选取2018年3月至2020年3月郑州市第七人民医院收治的80例结肠癌患者,均接受CME治疗。随访3 a,根据预后情况分组,对比不同预后患者血清MASP-2、MACC1、miR-17水平。分析影响预后的因素及MASP-2、MACC1、miR-17预测结肠癌CME患者的预后评估价值。结果结肠癌患者术后血清MACC1、miR-17水平低于术前,MASP-2水平高于术前(P<0.05)。随访3 a,80例结肠癌CME患者中19例被纳入预后不良组,60例被纳入预后良好组。预后不良组临床分期Ⅲ期占比及血清MACC1、miR-17水平均高于预后良好组,MASP-2水平低于预后良好组(P<0.05)。血清MACC1、miR-17是影响结肠癌CME预后的独立危险因素,MASP-2为保护因素(P<0.05)。血清MASP-2、MACC1、miR-17均可预测结肠癌CME患者的预后,三者联合预测价值最高(P<0.05)。结论结肠癌CME后患者血清MACC1、miR-17水平降低,MASP-2水平升高,上述指标均可作为结肠癌CME预后的预测指标,且三者联合的预后评估价值最高。 展开更多
关键词 结肠癌 全结肠系膜切除术 甘露结合凝集相关的蛋白酶2 结肠癌转移相关基因1 微小RNA-17 预后
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MASP-2基因多态性与2型糖尿病肺部感染的关联
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作者 贺艳 朱雪梅 +4 位作者 罗娜 栾苏妮 黄文静 朱厚莉 李丹 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期708-712,共5页
目的分析甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2(MASP-2)基因多态性与2型糖尿病(T2DM)肺部感染的关联。方法收集2018年5月-2021年5月武汉市第一医院收治的274例T2DM患者临床资料,根据是否并发肺部感染分为并发肺部感染组80例和无肺部感染组... 目的分析甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2(MASP-2)基因多态性与2型糖尿病(T2DM)肺部感染的关联。方法收集2018年5月-2021年5月武汉市第一医院收治的274例T2DM患者临床资料,根据是否并发肺部感染分为并发肺部感染组80例和无肺部感染组194例,分析T2DM肺部感染患者病原菌分布情况,检测两组MASP-2基因rs2273346、rs6695096和rs72550870位点多态性,分析其与T2DM并发肺部感染的关系,并检测两组肺泡巨噬细胞人类白细胞抗原(HLA)-Ⅱ类抗原的表达。结果80例T2DM肺部感染患者共检出病原菌101株,其中革兰阴性菌占54.46%(55/101);肺部感染组MASP-2基因rs72550870位点AA基因型和A等位基因分布频率高于无肺部感染组(P<0.05),两组MASP-2基因rs2273346、rs6695096位点基因型和等位基因分布频率比较,无统计学差异;Logistic回归分析结果显示,rs72550870位点AA基因型是影响T2DM并发肺部感染的危险因素(P<0.05);肺部感染组携带MASP-2基因rs72550870位点AA基因型者HLA-DR、HLA-DQ抗原表达阳性占比均低于无肺部感染组(P<0.05)。结论T2DM肺部感染患者病原菌以革兰阴性菌为主,MASP-2 rs72550870位点AA基因型可能增加T2DM并发肺部感染风险,其作用机制可能与降低肺泡巨噬细胞HLA-Ⅱ类抗原表达有关。 展开更多
关键词 2型尿病 肺部感染 甘露结合凝集相关蛋白酶2 基因多态性 人类白细胞抗原 肺泡巨噬细胞
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人MASP1 N端片段原核表达载体的构建及其表达 被引量:4
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作者 蔡学敏 赵娜 +2 位作者 左大明 张丽芸 陈政良 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期546-549,共4页
目的:在大肠杆菌中表达人甘露聚糖结合凝集素(MBL)相关丝氨酸蛋白酶1(MASP1)N端片段。方法:采用PCR技术从含人MASP1cDNA的质粒pGEM-MASP1中扩增MASP1-N端基因片段,将其插入原核表达载体pGEX4T-1,转化BL21(DE3)感受态菌诱导表达MASP1-N... 目的:在大肠杆菌中表达人甘露聚糖结合凝集素(MBL)相关丝氨酸蛋白酶1(MASP1)N端片段。方法:采用PCR技术从含人MASP1cDNA的质粒pGEM-MASP1中扩增MASP1-N端基因片段,将其插入原核表达载体pGEX4T-1,转化BL21(DE3)感受态菌诱导表达MASP1-N端蛋白,通过GSTrap亲合层析柱纯化目的蛋白,以SDS-PAGE和Western blot进行鉴定,并以ELISA分析了目的蛋白与重组MBL-CLR、重组MBL的结合活性。结果:从pGEM-MASP1中扩增得到约860bp的基因片段,构建成重组载体经酶切出现约4900bp和860bp片段,测序结果与预期的完全一致。纯化蛋白经SDS-PAGE可见Mr60000蛋白带,该蛋白可与抗GST抗体反应并能与重组人MBL-CLR、重组人MBL蛋白结合。结论:获得了表达人MASP1N端片段的大肠杆菌菌株和重组人MASP1N端片段/GST融合蛋白,为MASP1分子的进一步研究提供了条件。 展开更多
关键词 甘露结合凝集相关蛋白酶1 N端片段 原核表达
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人MASP1和MASP2 C端片段的原核表达 被引量:2
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作者 蔡学敏 赵娜 +2 位作者 张丽芸 左大明 陈政良 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期577-580,共4页
目的在大肠杆菌中表达人甘露聚糖结合凝集素(MBL)相关丝氨酸蛋白酶1、2(MASP1、MASP2)C端片段。方法采用PCR技术从分别含人MASP1、MASP2cDNA的质粒pGEM-MASP1、pGEM-MASP2中扩增MASP1、MASP2C端基因片段,将其插入原核表达载体pET17b,转... 目的在大肠杆菌中表达人甘露聚糖结合凝集素(MBL)相关丝氨酸蛋白酶1、2(MASP1、MASP2)C端片段。方法采用PCR技术从分别含人MASP1、MASP2cDNA的质粒pGEM-MASP1、pGEM-MASP2中扩增MASP1、MASP2C端基因片段,将其插入原核表达载体pET17b,转化感受态大肠杆菌BL21(DE3),诱导表达MASP1、MASP2C端蛋白,通过Ni2+-NTA亲和层析柱纯化目的蛋白,以SDS-PAGE、Western blot和ELISA进行鉴定。结果分别从pGEM-MASP1和pGEM-MASP2中扩增到约1300bp的基因片段,构建成重组表达载体,经酶切出现约3300bp和1300bp片段,测序结果与预期的完全一致。纯化蛋白经SDS-PAGE可见Mr40000蛋白带,该蛋白可与抗His抗体反应。结论获得了重组人MASP1和MASP2C端片段蛋白及其表达菌株,为MASP分子的进一步研究提供了条件。 展开更多
关键词 甘露结合凝集相关蛋白酶1、2 C端片段 原核表达
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类风湿性关节炎患者血清MBL MASP-2和DKK-1水平变化与患者预后相关性 被引量:5
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作者 臧雪莲 鞠延玲 赵旭 《河北医学》 CAS 2021年第7期1070-1075,共6页
目的:研究类风湿性关节炎(RA)患者血清甘露糖结合凝集素(MBL)、MBL相关的丝氨酸蛋白酶-2(MASP-2)和Dickkopf-1蛋白(DKK-1)水平变化及其与患者预后相关性。方法:选取2017年8月至2020年8月我院194例RA患者和102例健康体检者分别为研究组... 目的:研究类风湿性关节炎(RA)患者血清甘露糖结合凝集素(MBL)、MBL相关的丝氨酸蛋白酶-2(MASP-2)和Dickkopf-1蛋白(DKK-1)水平变化及其与患者预后相关性。方法:选取2017年8月至2020年8月我院194例RA患者和102例健康体检者分别为研究组和对照组,检测入院时血清MBL、MASP-2和DKK-1水平,同时根据28个关节疾病活动评分(DAS28)将患者分为轻度组83例、中度组62例和重度组49例,按指南对RA患者给予达标治疗并根据疗效将患者分为达标组129例和未达标组65例,比较各组血清MBL、MASP-2和DKK-1水平,同时分析其对DAS28评分的影响和对疗效的预测价值。结果:研究组血清MBL和MASP-2水平低于对照组,血清DKK-1水平高于对照组;轻度组、中度组和重度组血清MBL和MASP-2逐渐降低,血清DKK-1水平和DAS28评分逐渐升高;达标组血清MBL和MASP-2水平高于未达标组,血清DKK-1水平低于未达标组,差异有统计学意义(P<0.05)。多元线性回归分析显示,血清MBL和MASP-2水平为影响DAS28评分的重要因素(P<0.05)。血清MBL和MASP-2水平与RA治疗效果存在密切联系,RA治疗未达标的logistics回归模型为Y=12.573-0.722×血清MBL-0.090×血清MASP-2+0.792×血清DKK-1。血清MBL、MASP-2、DKK-1及三者联合检测预测RA疗效的AUC分别为0.896、0.825、0.693和0.958,敏感度分别为72.09%、67.44%、80.62%和89.15%,特异度分别为90.77%、81.54%、52.31%和90.77%。结论:RA患者血清MBL和MASP-2水平明显降低,血清DKK-1水平明显升高,且与病情变化密切相关,可为评估疗效和预后提供参考。 展开更多
关键词 类风湿性关节炎 甘露结合凝集 MBL相关的蛋白酶-2 Dickkopf-1蛋白
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应用SNPstream技术检测MASP2基因的多态性 被引量:4
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作者 王艳 李玉霞 +1 位作者 曹诚 刘传暄 《生物技术通讯》 CAS 2008年第4期522-525,共4页
目的:应用一种高通量单核苷酸多态性(SNP)检测方法——SNPstream技术检测甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶-2(MASP2)基因的多态性。方法:收集北京汉族人群SARS病例96例和正常对照96例,用SNPstream技术检测样本的MASP2基因多态性,并用... 目的:应用一种高通量单核苷酸多态性(SNP)检测方法——SNPstream技术检测甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶-2(MASP2)基因的多态性。方法:收集北京汉族人群SARS病例96例和正常对照96例,用SNPstream技术检测样本的MASP2基因多态性,并用PCR产物直接测序技术对其中一个位点rs2273346进行分型,以验证SNPstream技术的准确性。结果:192例样本的MASP2基因rs2273346位点SNPstream技术分型结果与测序结果完全相符,2种方法的基因型分型结果具有很好的一致性。结论:SNPstream技术是高通量SNP检测的良好工具,准确性高,所需样本量低,在大规模人群SNP筛检中具有良好的发展前景。 展开更多
关键词 单核苷多态性 SNPstream技术 甘露结合凝集相关蛋白酶
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高分辨率熔解曲线分析技术检测MASP-2基因点突变方法的建立及评价 被引量:1
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作者 贾晓晖 阎敏娜 +2 位作者 贾天军 程永婷 张斌 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第14期44-47,共4页
目的建立高分辨率熔解曲线(HRM)分析技术检测人甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶-2(MASP-2)基因g.21370(G>T)位点单核苷酸多态性(SNP)的方法并进行评价。方法通过测序获得MASP-2基因g.21370(G>T)位点3种不同基因型对照品,并用其... 目的建立高分辨率熔解曲线(HRM)分析技术检测人甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶-2(MASP-2)基因g.21370(G>T)位点单核苷酸多态性(SNP)的方法并进行评价。方法通过测序获得MASP-2基因g.21370(G>T)位点3种不同基因型对照品,并用其建立HRM技术检测MASP-2基因点突变方法。利用60份待测DNA样品对建立的HRM方法的准确性、重复性及稳定性进行评价。结果建立的MASP-2基因HRM分析方法扩增反应正常,G/G、G/T、T/T 3种基因型区分明显,扩增产物Melt曲线良好,无非特异性产物出现;与基因序列测定结果对比显示准确性良好;对野生型和突变型标本3次重复检测结果显示,Tm值变异系数为0.017和0.023;χ~2检验结果表明,本研究选取的随机体检人群MASP-2基因g.21370(G>T)位点基因型频率分布符合Hardy-Weinberg遗传平衡。结论建立的MASP-2基因g.21370(G>T)位点HRM检测方法准确性高、重复性及稳定性良好,为下一步临床分析MASP-2基因SNP提供一定的技术支持。 展开更多
关键词 高分辨率熔解曲线 甘露结合凝集相关蛋白酶-2 基因 单核苷多态性
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