甘青乌头总生物碱的分离及纯化

为分离纯化制备高纯度的甘青乌头生物碱,通过对甘青乌头总生物碱的提取及含量测定,利用HPLC法测定甘青乌头酯型生物碱含量,单因素试验考察甘青乌头总生物碱和酯型生物碱提取条件。结果表明,以苯甲酸峰面积以及总生物碱的含量为参照标准,选取适宜的总生物碱提取方法,得到85℃为最佳提取温度,1.5 h为最佳提取,90%为乙醇的质量分数。高效液相色谱法精密度、重复性和稳定性良好,且操作简便,对甘青乌头质量控制理想。

甘青乌头的生物碱

从甘青乌头 (AconitumTanguticum(Maxim)Stapf.)中分出五个生物碱 ,其中一个为新生物碱 ,命名为Tangutimine ,四个为已知生物碱 ,分别为 :Hetisinone、Talatizamine、Atisine、Hordeine。经IR ,MS ,1H和13 CNMR以及 2DNMR的测定 ,确定了它们的化学结构。其中Talatizamine。

甘青乌头总黄酮提取精制工艺研究

目的:优选甘青乌头总黄酮的提取精制工艺。方法:以总黄酮含量为检测指标,采用正交设计考察乙醇浓度、乙醇加入量、提取时间和提取次数对总黄酮提取率的影响,优选甘青乌头总黄酮的提取工艺;以总黄酮吸附量(mg/g)和解析率(%)为检测指标,考察D101、AB-8、X-5和XAD-16四种大孔吸附树脂对甘青乌头总黄酮的富集能力,优选树脂类型,并确定上样液浓度、上样流速、上样量、洗脱溶媒和洗脱流速等工艺参数。结果:甘青乌头总黄酮最佳提取精制工艺为:10倍量70%乙醇回流提取3次,每次提取1 h;优选XAD-16树脂精制甘青乌头总黄酮,最佳上样液浓度为8 mg/mL,上样量为112 mg/g干树脂,上样液pH值为5,上样流速为3 mL/min,最佳洗脱溶媒为70%乙醇,洗脱流速为5 mL/min;在最佳吸附解析条件下,甘青乌头总黄酮质量分数从4.39%提高到46.19%。结论:甘青乌头总黄酮提取精制工艺操作简单,结果可靠,可用于工业化生产。

藏药甘青乌头生物碱抗单纯疱疹病毒Ⅱ型体内外作用

目的探讨藏药甘青乌头脂溶性生物碱（ALA）和水溶性生物碱（AWA）抗单纯疱疹病毒Ⅱ型（HSV-2）的作用和机制。方法四甲基偶氮唑蓝法测定细胞毒性,细胞病变作用法和蚀斑法测定甘青乌头生物碱体外抗HSV-2活性,以半数有效浓度和治疗指数为评价指标;荧光定量聚合酶链式反应法（FQ-PCR）和蚀斑法考察ALA和AWA体外抗HSV-2作用机制。用HSV-2建立小鼠脑炎模型,对AWA体内抗HSV-2的活性进行评价。结果 ALA和AWA对Vero细胞的半数中毒浓度分别为3.57和7.87mg/mL。ALA和AWA半数有效质量浓度分别为4.99和2.81 mg/mL,治疗指数分别为0.72和2.80。ALA和AWA均能直接灭活HSV-2,能够显著抑制HSV-2的感染性。ALA对吸附到非洲绿猴肾细胞的HSV-2没有抑制作用,能微弱抑制HSV-2大分子的增殖,对HSV-2 DNA的复制没有作用。AWA能够抑制HSV-2吸附,抑制HSV-2大分子的增殖,抑制HSV-2 DNA的合成,抑制倍数达10~2。AWA对小鼠的半数中毒质量浓度为0.28mg/kg。AWA延长了小鼠的平均存活时间,对小鼠的死亡显示出10%的保护率。结论 AWA抗HSV-2的活性大于ALA,ALA主要通过直接灭活HSV-2,AWA通过抑制HSV-2复制循环的各个环节起作用。

甘青乌头抗炎镇痛活性部位的半仿生-酶法提取工艺优化

用半仿生-酶法提取甘青乌头抗炎镇痛的活性部位,考察加酶量、酶解时间、半仿生提取(SBE)温度和总时间4个因素的影响。结果表明,优选工艺为:加酶量36 U/g,酶解时间90 min,SBE温度80℃,SBE总时间180 min。

甘青乌头的生物碱成分

从甘青乌头(Aconitum tanguticum,藏药名榜嘎-Herbi Aconiti Bonga)全草中分得异叶乌头碱(heteratisine,1)、苯甲酰异叶乌头碱(benzoylheteratisine,2)、阿替辛(atisine,3)、大麦芽碱(hordenine,4)和一新生物碱,称为唐乌碱(tanwusine,5)。

毛果甘青乌头中生物碱成分的提取和鉴定

目的:分离纯化鉴定毛果甘青乌头中的生物碱成分。方法:药材室温下自然烘干后,粉粹,用酸提碱沉法提取总生物碱,然后用硅胶柱层析法分离得到单体生物碱,利用化学法和光谱法鉴定其结构。结果:分离鉴定得到了10个化合物的结构,其中有六个内酯型C19二萜生物碱、四个C20二萜生物碱。结论:得到了10个纯的单体生物碱。

中药甘青乌头药液中金属元素的组成分析

实验用湿法消解处理藏药植物甘青乌头,用传统煎煮法提取甘青乌头中的金属元素,同时进行粗药和细药的比较,采用火焰原子吸收光谱法对其中几种元素进行测定。结果表明:水煎液和残渣的量都小于原药中的量,粗药头煎液元素含量小于细药头煎液,粗药二、三煎液元素含量大于细药二、三煎液;甘青乌头中5种元素含量Fe>Cu>Zn>Cr>Pb。

雾化藏药四味甘青乌头对咽炎的疗效评估

评价藏药四味甘青乌头雾化治疗咽炎的临床疗效。方法 将22例咽炎患者分成两组,患者自2021年7月~2022年6月在我院进行治疗,对照组接受藏药四味甘青乌头口服治疗,观察组应用四味甘青乌头雾化吸入治疗,比较两组临床疗效、临床症状缓解用时、炎性因子指标改善情况、用药安全性。结果 观察组治疗总有效率明显较对照组高(P<0.05)。观察组患者声音嘶哑、咽部异物感、黏膜充血、咽喉疼痛、咽喉干痒缓解时间均较对照组短(P<0.05)。治疗前患者各项炎性因子指标水平无明显差异(P>0.05),治疗后两组比较,观察组各项指标水平均更低(P<0.05)。两组用药安全性无明显差异(P>0.05)。结论 咽炎患者应用藏药四味甘青乌头雾化吸入对于促进临床症状缓解、提升临床疗效及降低炎性因子水平有重要价值,而且还能够保证用药安全性,应用价值高于口服治疗。

藏药甘青乌头化学成分研究(Ⅲ)

对藏药甘青乌头全草的化学成分进行研究。采用多种色谱技术进行分离纯化，并通过光谱分析（1D，2D-NMR和MS）及与文献比对的方法鉴定了19个化合物，分别是5-羟甲基糠醛（1），5-乙酰氧基甲基糠醛（2），pyrrolezanthine{5-hydroxymethyl-1-[2-（4-hydroxyphenyl）ethyl]-1H-pyrrole-2-carbaldehyde}（3），lichiol B（4），邻苯二甲酸二丁酯（5），3，4-二羟基苯乙醇（6），3，4-二羟基苯乙醇-β-D-葡萄糖苷（7），红景天苷（8），对羟基苯乙醇（9），对羟基苯甲酸葡萄糖酯苷（10），对羟基苯甲酸（11），天麻苷（12），1-（3，4二甲氧基苯基）-1，2-乙二醇（13），对羟基苯甲醛（14），对羟基苯乙酮（15），3，4-二羟基苯乙醇乙酸酯（16），丁香醛（17），乙基-β-D-吡喃果糖苷（18），对羟基苯甲酸甲酯（19）。化合物 3和4 为首次从该科植物中分离得到，化合物 2，6，9~19 为首次从该属植物中分离得到，化合物 1 和 5 为首次从该植物中分离得到。

藏药甘青乌头抗单纯疱疹病毒Ⅱ型体内外作用研究

目的探讨藏药甘青乌头抗单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)的作用和机制。方法MTT法测定甘青乌头对Vero细胞的毒性,采用细胞病变法和蚀斑法测定甘青乌头体外抗病毒活性,以半数抑制浓度和治疗指数为评价指标;定量荧光PCR法和蚀斑法考察甘青乌头体外抗病毒作用机制。用HSV-2建立小鼠脑炎模型,对甘青乌头体内抗单纯疱疹病毒的抗病毒活性进行评价。结果甘青乌头对Vero细胞的半数中毒浓度(CC50)为5.57 g.L-1。细胞病变法和蚀斑法测得甘青乌头的半数有效浓度(EC50)分别为2.25,1.68 g.L-1,治疗指数TI分别为2.47,3.32。LD50值为0.85 g.kg-1。甘青乌头延长了小鼠的平均存活时间,对小鼠的死亡显示出10%的保护率。甘青乌头能直接灭活HSV-2,能够显著抑制HSV-2的感染性;对病毒吸附到细胞没有抑制作用,能抑制HSV-2大分子的增值。抑制HSV-2 DNA合成的抑制倍数达102。结论甘青乌头体外具有较强的抗HSV-2的活性,抗病毒作用是通过抑制病毒复制循环的各个环节起作用的。

藏药甘青乌头化学成分研究

对甘青乌头Aconitum tanguticum全草的化学成分进行研究。应用硅胶,ODS,Sephadex LH-20,制备HPLC等各种色谱技术进行分离纯化,采用MS,NMR等波谱技术鉴定化合物结构。甘青乌头乙醇总提取物经石油醚、乙酸乙酯萃取后的剩余水溶液经AB-8大孔吸附树脂,依次用水,30%,60%,95%乙醇洗脱,合并回收溶剂分别得到各洗脱部分。从30%,60%乙醇洗脱部分共分离得到19个化合物,分别鉴定为紫丁香苷(1),香草酸4-O-β-D-阿洛糖苷(2),阿魏酸4-O-β-D-阿洛糖苷(3),阿魏酸4-O-β-D-葡萄糖苷(4),芥子酸4-O-β-D-葡萄糖苷(5),4-羟基-肉桂醇-4-O-β-D-葡萄糖苷(6),槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖基-(1→2)-[α-L-鼠李糖基-(1→6)]-β-D-半乳糖苷-7-O-α-L-鼠李糖苷(7),山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖基-(1→2)-[α-L-鼠李糖基-(1→6)]-β-D-半乳糖苷-7-O-α-L-鼠李糖苷(8),槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖基(1→6)-β-D-半乳糖苷-7-O-α-L-鼠李糖苷(9),山柰酚-3-O-[β-D-葡萄糖基-(1→3)-(4-O-反式-对香豆酰基)]-α-L-鼠李糖基-(1→6)-β-D-半乳糖苷-7-O-α-L-鼠李糖苷(10),槲皮素-3-O-[β-D-葡萄糖基-(1→3)-(4-O-反式-对香豆酰基)]-α-L-鼠李糖基-(1→6)-β-D-半乳糖苷-7-O-α-L-鼠李糖苷(11),红景天苷(12),2-(3,4-二羟基苯基)乙醇1-O-β-D-葡萄糖苷(13),(7S,8R)-去氢二松柏醇-9'-O-β-D-葡萄糖苷(14),citrusin B(15),异叶乌头碱(16),tanaconitine(17),山栀苷甲酯(18)和淫羊藿次苷B1(19)。除化合物4,13,16和17外,其余化合物均为首次从甘青乌头中分离得到。

藏药甘青乌头化学成分的研究

目的:研究藏药甘青乌头Aconitum tanguticum的化学成分。方法:采用硅胶,SephadexLH-20凝胶,ODS,制备液相等多种色谱技术进行化合物的分离纯化,通过多种波谱分析方法鉴定化合物结构。结果:从甘青乌头大极性部位分离鉴定了7个化合物,分别为山柰酚-3-O-[α-L-鼠李糖基-(1→6)-β-D-半乳糖苷]-7-O-α-L-鼠李糖苷(1),山柰酚-3-O-[α-L-鼠李糖基-(1→6)-β-D-葡萄糖苷]-7-O-α-L-鼠李糖苷(2),山柰酚-7-O-α-L-鼠李糖苷(3),龙胆苦苷(4),吐叶醇-9-O-β-D-葡萄糖苷(5),二氢吐叶醇-9-O-β-D-葡萄糖苷(6),3,4-二羟基-苯乙醇-β-D-葡萄糖苷(7)。结论:所有化合物均为首次从该植物中分离得到。

藏族药甘青乌头化学成分研究(Ⅳ)

目的：研究藏族药甘青乌头全草的化学成分。方法：采用多种现代色谱技术进行分离纯化,并通过理化性质、波谱分析（1D,2D-NMR和MS）及与文献对比的方法进行结构鉴定。结果：分离并鉴定了17个化合物,分别为异光黄素（1）,对羟基桂皮酸（2）,苯甲酸（3）,对羟基苯乙胺（4）,对羟基苯乙醇（5）,尼泊金丁酯（6）,腺苷（7）,3-[p-hydroxyphenyl]-propionic acid amide（8）,hetisine（9）,关附辛素（10）,红景天苷（11）,环（异亮-亮）二肽（12）,苯丙氨酸（13）,3-（4-aminophenyl）prop-2-enoic acid（14）,N-oxide hordenine（15）,（2R,3R）-2,3,4-三羟基丁酸（16）和N-甲基酪胺（17）。结论：其中化合物1~4,6~8和12~17为首次从甘青乌头中分离得到。

藏药甘青乌头中1个新的双二萜生物碱

从甘青乌头全草中分得两个双二萜生物碱,经1D,2D-NMR及HR-MS数据解析确定了它们的结构,其中1个为新化合物,命名为tanguticurine A(1),另1个为已知化合物anthoroidine B(2),二者均为首次从甘青乌头中分离得到。抗病毒实验结果显示化合物1对HCV和EV71均有较好的抑制作用,半数有效浓度(EC_(50))分别为15.5和9.7μmol·L~(-1),并显示较低的细胞毒性。因此,化合物1是一个较好的抗病毒先导化合物,值得深入研究。

甘青乌头的HPLC指纹图谱研究

目的采用HPLC法研究8批甘青乌头药材的指纹图谱。方法采用Waters XbridgeTMC18色谱柱(250mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-40 mmol·L^(-1)乙酸铵缓冲液(氨水调p H10),检测波长230 nm,流速1 m L·min^(-1),柱温40℃。结果以15个共有峰为评价指标,8批样品中各共有峰的相对保留时间均<2%,相似度均>0.95。结论所用方法操作简便,精密度、稳定性和重复性均良好,可用于甘青乌头药材的质量控制。

藏族药甘青乌头脂溶性生物碱分析

目的：对藏族药甘青乌头全草的脂溶性生物碱进行研究。方法：采用多种现代色谱技术进行分离纯化,并通过理化性质、波谱分析（1D,2D-NMR和MS）,X射线单晶衍射等方法确定化合物结构。结果：从甘青乌头的脂溶性生物碱部位分离并鉴定了10个化合物,它们的结构分别为tanaconitine（1）,heteratisine（2）,11α,13α-dihydroxyhetisinone（3）,guan-fu base H（4）,β-谷甾醇（5）,苯甲酰胺（6）,邻苯二甲酸正丁基异丁基酯（7）,dihydroatisine（8）,hetisine（9）和对羟基苯乙醇（10）。结论：化合物1-4,8和9为二萜生物碱,化合物3,6-8为首次从甘青乌头中分离得到,本文首次对化合物3和4做了X射线单晶衍射数据分析。

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术的甘青乌头抗乙酰胆碱酯酶活性成分分析

目的:明确甘青乌头抗乙酰胆碱酯酶的活性成分,为寻找新的抗阿尔茨海默病(AD)药物提供参考。方法:采用改良的Ellman’s法筛选甘青乌头抗乙酰胆碱酯酶活性部位,超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS/MS)对活性部位的化学成分进行分析,色谱条件为ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm),流动相选择乙腈(A)-0.4%氨水溶液(B)梯度洗脱,流速0.4 mL·min^(-1),柱温30℃。二氯甲烷萃取部位A相比例随时间变化为0~3 min,5%A;3~7 min,5%~20%A;7~11.5 min,20%~33%A;11.5~15.5 min,33%~50%A;15.5~20.5 min,50%~80%A;20.5~23 min,80%~85%A;23~25 min,85%~95%A。正丁醇萃取部位A相比例随时间变化为0~2 min,5%A;2~8 min,5%~20%A;8~11 min,20%~33%A;11~15 min,33%~95%A。质谱条件为电喷雾离子源,正离子全扫描模式采集数据,检测范围m/z 100~1 500。结果:甘青乌头醇提物的二氯甲烷萃取部位和正丁醇萃取部位对乙酰胆碱酯酶均有一定的抑制作用,二者的半数抑制浓度分别为(64±4.4),(85.7±3.8)mg·L-1。经UPLC-Q-TOF-MS/MS分析,从二氯甲烷萃取部位共推测出21个生物碱类成分,正丁醇萃取部位共推测出11个生物碱类成分;2个部位均含有的关附壬素为首次在甘青乌头中发现。结论:二萜生物碱是甘青乌头抗乙酰胆碱酯酶活性的主要药效物质,值得深入挖掘。

秦岭产4种乌头块根的生物碱资源研究

目的测定秦岭产乌头属的松潘乌头、太白乌头、甘青乌头、铁棒锤块根中的总生物碱及酯型生物碱含量,探讨4种植物的化学成分资源状况,为该属生药资源开发研究提供依据。方法酸碱滴定法测定块根的总生物碱;改良盐酸羟胺-高氯酸铁比色法测定块根的酯型生物碱。结果4种乌头块根总生物碱及酯型生物碱含量分别为:花期:松潘乌头1.19%和0.33%,太白乌头0.68%和0.06%,甘青乌头2.24%和0.33%,铁棒锤1.31%和0.52%;果期:松潘乌头1.22%和0.17%,太白乌头1.24%和0.04%,甘青乌头2.42%和0.28%,铁棒锤1.44%和0.46%。结论4种乌头种的化学成分资源规律为总生物碱含量果期高于花期,酯型生物碱的含量花期高于果期。

3种乌头属藏药材的形态组织学研究

目的考察船盔乌头、甘青乌头、露蕊乌头的形态组织学。方法采用直接观察、光学显微镜、扫描电镜等方法,观察药材性状及根(露蕊乌头除外)、茎、叶、花粉粒、药材粉末的显微特征。结果船盔乌头根、叶的外观性状,根、叶上表皮的显微特征及花粉粒的形态特征可作为鉴别依据,甘青乌头根、叶横切面观与另外2种药材具有明显差异,露蕊乌头的花序特征与另外2种药材具明显区别。结论本研究补充完善了3种乌头属藏药材现有的生药学特征与质量标准规范,同时对该濒危品种的种群数量保护及同属间药材混淆品的区分提供了科学依据。