超声辅助提取甘青虎耳草总黄酮工艺及其抑菌作用

目的:研究甘青虎耳草(Saxifraga tangutica Engl.)总黄酮的提取工艺及其抑菌作用。方法:用正交试验超声波辅助乙醇提取总黄酮;用琼脂扩散法和肉汤倍比稀释法研究不同质量浓度总黄酮提取物对6种供试菌的抑菌作用。结果:方差分析得各因素影响的顺序为提取次数>乙醇体积分数>超声时间>料液比,最佳工艺为提取50℃、超声功率100W、乙醇体积分数80%、料液比1:25(g/mL)、超声时间35min、提取4次,在此条件下提取率达81.73mg/g;抑菌试验显示总黄酮提取物对细菌均有抑制作用,对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、大肠杆菌的最小杀菌质量浓度分别为0.156、0.313、0.625mg/mL;对酵母菌的抑制作用较弱;对霉菌没有抑制作用。结论:本实验结果可为甘青虎耳草总黄酮提取工艺的确定及在抑菌方面的应用提供实验依据。

藏药甘青虎耳草总黄酮的抗衰老作用

目的研究甘青虎耳草总黄酮对D-半乳糖致衰小鼠的抗衰老作用。方法通过测得致衰老小鼠的肝、脑、心、肾、血清组织的超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量。结果甘青虎耳草总黄酮能显著提高衰老小鼠体重、增强各组织SOD、GSH-Px活性;明显降低MDA含量;低剂量显效,中剂量次之。结论甘青虎耳草总黄酮能抑制活性氧导致的脂质过氧化反应,提高抗氧化酶活力。

藏药甘青虎耳草质量标准研究

目的:建立藏药甘青虎耳草质量标准。方法:以甘青虎耳草药材为对照组,建立本品的显微鉴别和薄层色谱鉴别方法。结论:该方法简便、可行、操作性强。

响应面法优化甘青虎耳草总黄酮的提取及抗肿瘤活性研究

目的:采取响应面法对甘青虎耳草总黄酮的提取工艺进行优化并探讨其抗肿瘤作用。方法:在各单因素实验的基础上,通过Box-Behnken设计,建立甘青虎耳草总黄酮的数学模型,经响应面方法优化甘青虎耳草总黄酮提取工艺;同时通过不同剂量甘青虎耳草总黄酮对荷瘤小鼠进行实验,使用抗肿瘤药物环磷酰胺作为对照药物,研究其抗肿瘤活性。结果:甘青虎耳草总黄酮的最佳提取工艺:超声时间、超声功率、液料比分别为120 min、240 W及40∶1(g/g),理论收率为43.2 mg/g,依据此实验条件进行验证性实验,得到收率为42.6 mg/g,与预测值有很好的相符性,其肿瘤的实验表明,甘青虎耳草总黄酮有较好的抗肿瘤活性。结论:响应面优化甘青虎耳草总黄酮的提取工艺,方法简单可行;实验表明甘青虎耳草总黄酮有较好的抑瘤活性,为抗肿瘤药物的完善,提供一定的参考价值,同时为甘青虎耳草资源的综合利用提供参考依据。

甘青虎耳草乙酸乙酯提取物对小鼠肝癌细胞及原位移植瘤的抑制作用

目的探讨甘青虎耳草乙酸乙酯提取物(Et OAc extract from Saxifraga taugutica,EST)对小鼠肝癌细胞及原位移植瘤的抑制作用。方法体外实验用不同浓度EST处理H22细胞48 h后,AO/EB双荧光染色,激光共聚焦显微镜观察细胞形态变化;用核酸电泳和流式细胞术检测H22细胞的凋亡情况。建立小鼠肝癌原位移植瘤模型进行体内实验,对比EST低、中、高剂量组对荷瘤小鼠抑瘤率、T淋巴细胞增殖能力以及肝病理变化的影响。结果 EST处理后H22细胞出现凋亡形态学变化,且与浓度正相关;核酸电泳呈凋亡特征性梯状带;流式细胞分析,500μg/m L处理组凋亡率达31%;体内试验显示,EST低、中、高剂量的抑瘤率分别为33.0%、46.7%、64.3%;显著提高小鼠的胸腺指数、T淋巴细胞增殖能力(P <0.05);组织学观察证明EST各剂量组癌细胞有不同程度的生长抑制,形态固缩、向周围组织浸润减少。结论 EST可增强小鼠免疫功能和诱导肿瘤细胞凋亡,具明显的抗肿瘤作用,与剂量正相关。

藏药甘青虎耳草总黄酮对小鼠抗炎作用的研究

目的:观察甘青虎耳草总黄酮的抗炎作用并对其机制进行初步研究。方法:采用二甲苯致小鼠耳肿胀、冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高、棉球致小鼠肉芽肿模型,观察甘青虎耳草总黄酮对小鼠的抗炎作用。结果:甘青虎耳草总黄酮能显著抑制二甲苯所致小鼠耳肿胀,甘青虎耳草总黄酮低剂量组、中剂量组和高剂量组对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的抑制率分别为21.76%,65.29%和75.295%;明显抑制冰醋酸引起的小鼠腹腔毛细血管通透性增强,并且能有效抑制小鼠肉芽肿的作用。结论:甘青虎耳草总黄酮具有明显的抗炎作用。

藏药甘青虎耳草化学成分研究

目的:对藏药甘青虎耳草全草化学成分进行系统分离鉴定。方法:利用普通硅胶柱色谱和聚酰胺柱色谱等方法进行分离、纯化,利用超导核磁共振(NMR)、质谱(MS)等现代波谱技术确定其结构。结果:从甘青虎耳草的乙醇(95%)提取物中分离得到6个化合物,经波谱方法鉴定,其结构被确定为:槲皮素(Ⅰ),槲皮素-3-O-β-D-半乳糖糖苷(Ⅱ),槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅲ),槲皮素-3-O-β-D-半乳糖-7-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅳ),β-谷甾醇(Ⅴ),胡萝卜苷(Ⅵ)。结论:这6种成分均为首次从该种植物中分离得到。

甘青虎耳草黄酮对H22肝癌小鼠抗肿瘤作用的研究

为探究甘青虎耳草黄酮抑制小鼠H22肝癌原位移植瘤的作用。给小鼠肝接种H22细胞建立肝癌原位移植瘤模型,并随机分组:模型组、环磷酰胺组、甘青虎耳草黄酮剂量组(低、中、高剂量组)和对照组。治疗期间,观察各组小鼠生命体征和生存时间;停药次日,测定抑瘤率、小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、血清白蛋白(ALB)、白蛋白/球蛋白比值(A/G)、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰转移酶(GGT)和岩藻糖苷酶(AFU)水平以及肝组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量。结果显示,各剂量组ALT和AST低于模型组(P<0.05),ALB及A/G比值高于模型组(P<0.05),剂量组ALP、GGT、AFU活性明显低于模型组(P<0.05),其中,甘青虎耳草黄酮各剂量组MDA含量显著低于模型组(P<0.05),SOD、GSH-Px活性显著高于模型组。上述结果表明,甘青虎耳草黄酮能够显著抑制原位移植瘤生长,具有显著抑制肝癌的作用。