常见革兰阳性链球菌的生化表型及药敏分析

目的了解革兰阳性链球菌生化表型及药敏情况。方法采用VITEK细菌自动分析仪及手工生化、药敏相结合的方法鉴定链球菌。结果革兰阳性链球菌生化表型菌名29种,生化反应共性12种,具有诊断特性的生化反应表型三种,杆菌肽不能作为A群链球菌的确诊试验,A群链球菌、肺炎链球菌对青霉素、万古霉素的耐药率0%,肺炎链球菌对阿奇霉素、克林霉素的耐药率超过了60%。三代头孢和三代头孢加酶抑制剂的药物,耐药率低,可以作为治疗链球菌感染的首选药物之一。结论革兰阳性链球菌生化表型的建立,可以解决细菌鉴定中出现"不能鉴定"的问题,给细菌鉴定提供一定的帮助;了解细菌耐药情况,为临床医生合理用药提供理论依据。

苯丙氨酸羟化酶突变基因型与生化表型分析

目的探讨苯丙酮尿症（phenylketonuria，PKU）患者苯丙氨酸羟化酶基因（phenylalanine hydroxylase，PAH）突变基因型与生化代谢表型的相关性。方法用聚合酶链式反应一单链构象多态性、变性高效液相色谱分析和DNA测序法对102例治疗前血清苯丙氨酸（phenylalanine，Phe）高于120μmol／L患儿基因组DNA进行PAH基因分析，观察突变基因型与生化代谢表型的相关性。结果（1）生化代谢表型为经典型PKU（Phe〉1200btmol／L）69例，中度PKU（Phe600～1200μmol／L）31例，轻度PKU（Phe400～600μmol／L）2例。（2）共检出基因突变41种，基因型75种。（3）纯合突变基因型共9例（8．8％），含R111X／R111X基因型3例，IVS4-1G〉A／IVS4—1G〉A基因型1例，R243Q／R243Q基因型3例和V399V／V399V基因型2例。9例纯合突变中除1例R243Q／R243Q基因型患者的生化代谢表型属中度PKU外，其余8例生化代谢表型均属经典型苯丙酮尿症。（4）复合突变基因型共91例（89．2％），生化代谢表型属经典型苯丙酮尿症的61例、中度PKU的29例和轻度PKU的1例。（5）复合突变基因型R11IX／R243Q和EX6—96A〉G（Y204C）／R243Q均可见于经典型苯丙酮尿症和中度PKU生化代谢表型；均属于无效突变等位基因的R111X／V399V基因型、EX6—96A〉G／Y356X和EX6—96A〉G／V399V生化代谢表型为中度PKU。含不同无效突变相同错义突变的R111X／A165D和R176X／A165D基因型分别表现为中度PKU和经典型苯丙酮尿症表型。结论本研究中多数患者的突变基因型属复合突变。因突变等位基因的自由组合，使患者的基因型和生化表型之间关系复杂化。虽然大多数突变基因型与生化表型相关，但仍有个别与规律不一致的现象。因此，在PKU的遗传咨询中，依据患者的突变基因型分析评估预后要慎重。同样的基因型，患者表现出不同的生化代谢表型的现象，提示在苯丙氨酸的代谢过程中可能存在还没有被认识的其它影响因素。

草鱼线粒体型超氧化物歧化酶的生化遗传特性(英文)

超氧化物歧化酶 (SOD)是一种对生物细胞保护至关重要、在进化上比较保守的酶。因此 ,超氧化物歧化酶作为分子钟或分子标记已被广泛应用于生物进化研究、群体遗传结构分析以及品系鉴定。但鱼类SOD的生物化学和遗传学特性都尚未进行过系统和深入的研究。为使这一重要的分子标记能更好地应用于鱼类遗传育种、种质资源保护以及进化研究 ,本实验采用聚丙烯酰胺梯度凝胶垂直电泳法 ,研究了草鱼线粒体型超氧化物歧化酶 (fm SOD)的同功酶形式 ,生化遗传表型、亚基组成以及金属类型。实验结果表明 ,草鱼fm SOD有三种不同的同功酶形式 ;按从正极到负极的排列分别命名为fm SOD 1 ,fm SOD 2 ,fm SOD 3。这三种不同的fm SOD在草鱼群体中可构成 3种不同的生化遗传学表型 :表型 1个体只含有迁移率最快的fm SOD 1同功酶 ;表型3个体只含有迁移率最慢的fm SOD 3同功酶 ;而表型 2个体中含有所有三种不同形式的同功酶。在野生草鱼群体中 ,存在所有三种表现型 ;而在基因纯合型的雌核发育草鱼群体中只检测到表型 1和表型 3。野生草鱼群体中三种表现型的个体数之比符合一对等位基因分离的 1∶2∶1孟德尔遗传分离比例。由这些实验结果得出以下结论 :(1 )草鱼fm

微粒子病家蚕消化道内肠球菌的分布

从健康家蚕、感染微粒子病家蚕,以及感染细菌性肠道病家蚕的消化道分离了200株肠球菌,并进行了数值分类学鉴定,以探讨家蚕消化道中肠球菌的生态学分布和家蚕微孢子与肠球菌的相互关系.研究结果表明:与健康蚕相比,4龄或5龄起蚕添食微孢子的微粒子病家蚕消化道内,肠球菌的数量分别增加5.5×105倍和0.74×102倍;菌种数从6个分别下降为3个和4个;生化表型数从27个分别下降为13个和14个;在菌种分布上,Ent.avium的分布频率从健康蚕的56%分别下降至20%和38%,而Ent.faecium的分布频率从健康蚕的2%分别上升至40%和16%;分离菌株共有59个生化表型.

REP-PCR技术在光滑假丝酵母菌基因分型中的应用价值

目的评估重复序列PCR(REP-PCR)技术在光滑假丝酵母菌基因分型中的作用。方法收集深部真菌感染患者体内分离的光滑假丝酵母菌34株,以API 20C AUX酵母菌鉴定板条鉴定菌种及生化表型。采用REP-PCR对34株光滑假丝酵母菌进行基因分型:提取真菌基因组DNA,以Care-2重复元件设计引物,PCR扩增产物电泳后运用NTSYS软件进行聚类分析,聚类树状图相似系数(SI)≥97%且无明显条带差异定为同一基因型,SI≥97%且仅相差一条条带定为亚型。比较REP-PCR分型与多位点序列分型(MLST)的辨别力指数(DP),分析具有不同生化表型光滑假丝酵母菌的REP-PCR基因分型情况。结果 REP-PCR基因分型结果显示:34株光滑假丝酵母菌分为17个基因型,其中A型8株,B型6株,C、D型各3株,E型2株,F～Q型各1株,未发现亚型。REP-PCR和MLST基因分型的DP(95%CI)分别为0.911(0.770～0.980)和0.369(0.220～0.560),两者比较差异有统计学意义(χ2=21.68,P<0.01)。34株光滑假丝酵母菌有两种生化表型,生化表型代码分别为2000040(32株)和6000040(2株),生化表型代码为60000402的2株经REP-PCR分型结果分别为D型和K型(SI=0.43)。结论 REP-PCR对光滑假丝酵母菌基因分型的辨别力较强且操作简便,适用于临床实验室对光滑假丝酵母菌的流行病学研究。

不同方法鉴定临床常见念珠菌性能评价

目的评估表型鉴定、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析、真菌核糖体内转录间隔区序列测序三种方法鉴定念珠菌株的性能。方法收集分离自临床标本的63株念珠菌,采用表型鉴定、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析、真菌核糖体内转录间隔区序列分析三种方法进行念珠菌鉴定,以序列分析作为参考方法,比较表型鉴定与质谱分析对于念珠菌的鉴定性能。结果(1)真菌表型鉴定与测序鉴定结果一致率93.44%(57/61)。(2)基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱与测序鉴定结果一致率96.7%(59/61)。(3)表型鉴定与质谱分析鉴定结果差异无统计学意义。结论念珠菌生化表型鉴定可作为临床念珠菌株的常规鉴定方法,满足临床需要。当临床念珠菌株生化表型鉴定结果不确定时,应直接进行真菌rDNA ITS测序,不应加做质谱鉴定。有条件的实验室应首选MALDI-TOF MS质谱分析方法鉴定念珠菌以获得最大的鉴定效率,并可作为疑难菌种鉴定确诊方法。当质谱鉴定的结果不确定时,应直接进行真菌rDNA ITS测序,不应再用表型鉴定的方法确认鉴定结果。

气单胞菌基因种分布及溶血性探讨

目的 :本实验旨在探讨气单胞菌基因种与表型生化反应关系 ,建立气单胞菌基因种鉴定方法 ,及在临床标本中分布及溶血性。方法 :采用被筛选的 9种表型生化反应 ,鉴定 45株气单胞菌基因种 :采用我妻氏培养基观察溶血情况。结果 :显示本地区气单胞菌基因种主要是HG1、HG4 、HG9、HG12 、HG13 ;未见HG2 、HG3 、HG5、HG6、HG7、HG8、HG10 、HG11。结论 :气单胞菌基因种HG1、HG4 、HG9、HG12 、HG13 在人血平板上溶血分别为 75 %、0 %、10 0 %、67%、42 %。

SV40介导的永生化人源性肝细胞表型鉴定

本研究采用免疫组织化学和分子生物学方法等对SV40介导的永生化人源性肝细胞(HepLL细胞)进行生物学功能和表型特征评价.

中国鼠疫自然疫源地分型研究Ⅳ．鼠疫耶尔森菌生物型生物学特征的探讨

鼠疫菌生物型是鼠疫菌起源进化遗传性状最稳定的生物学标准，是鼠疫起源进化普系的“活化石”，也是该菌起源进化最具代表性的模式。依据其对甘油和阿拉伯糖的酵解和还原硝酸盐的能力，鼠疫菌可分为4种生物型，即古典型（甘油酵解阳性，阿拉伯糖酵解阳性，硝酸盐还原阳性）、中世纪型（甘油酵解阳性，阿拉伯糖酵解阳性，硝酸盐还原阴性）、东方型（甘油酵解阴性，阿拉伯糖酵解阳性，硝酸盐还原阳性）和田鼠型（甘油酵解阳性，阿拉伯糖酵解阴性，硝酸盐还原阴性）。前三种生物型与人类历史3次鼠疫大流行相对应，最后一种生物型对人不致病，但能造成田鼠鼠疫并在其自然疫源地内流行。目前中国鼠疫自然疫源地有4种鼠疫菌生物型。