对生孢梭菌CFU计数培养基的验证试验

目的:对新研制的生孢梭菌 CFU 计数培养基的 CFU 计数效果的可重复性进行验证。方法:将生孢子梭状芽孢杆菌(简称生孢梭菌)复苏、增菌培养,培养物与标准比浊管比浊至相同浊度,然后10倍系列稀释至1×10^(-6),作为工作菌液。将工作菌液采用浇注法接种生孢梭菌 CFU 计数培养基,分别置厌氧条件及有氧条件35℃培养;将工作菌液采用涂抹法接种于营养琼脂培养基和厌氧菌琼脂培养基,置厌氧条件35℃培养,用未接种的培养基做空白对照。分别于18,24,48,72 h 进行 CFU·mL^(-1)计数、观察菌落形态。用同一工作菌液重复上述实验5次,分别计算不同培养基 CFU·mL^(-1)的平均值。将以上试验重复2次。结果:生孢梭菌 CFU 计数培养基的 CFU 计数结果明显优于营养琼脂培养基和厌氧琼脂培养基(P<0.01);厌氧条件培养明显优于有氧条件培养(P<0.01)。生孢梭菌以浇注法接种于 CFU 计数培养基,置厌氧条件35℃培养18 h,CFU·mL^(-1)计数最多,可能最接近最大活菌数,且菌落形态良好。结论:新研制的生孢梭菌 CFU 计数培养基可以认为是目前最适于生孢梭菌 CFU 计数的培养基,可以推荐作为生孢梭菌 CFU 计数培养基使用。