雷公藤多苷致雌性小鼠肾虚生殖功能低下动物模型的研究

目的探讨雷公藤多苷(GTW)致育龄期雌性小鼠生殖功能低下的药理作用机理,建立GTW致雌性小鼠生殖功能低下的动物模型。方法采用7～8周龄雌性性成熟昆明种小鼠,随机分为GTWA(60mg·kg-1·d-1)、B(40mg·kg-1·d-1)、C(30mg·kg-1·d-1)、D(20mg·kg-1·d-1)、E(15mg·kg-1·d-1)5组及正常对照组。观察给药后小鼠动情周期,分别在部分小鼠周期延长,周期均延长、不规则,周期完全紊乱、甚至消失等3个时段分批处死小鼠,考察GTW在不同时段对小鼠生殖功能的影响。采用放免法检测血清E2、P水平,计算卵巢、子宫指数,卵巢、子宫作组织形态学观察,计数各级卵泡、黄体数,测量子宫内膜、肌层厚度。结果给药10周时,A、B、C组子宫指数明显降低,子宫内膜、肌层变薄,卵巢成熟卵泡数及黄体数减少;A、B组E2水平降低,各组P水平及卵巢指数无明显变化。结论GTW连续给药10周,可损伤雌性小鼠生殖功能,造成肾虚生殖功能低下状态。建议GTW40mg·kg-1·d-1给药10周建立雌性小鼠肾虚生殖功能低下模型。

雷公藤多甙致雌性小鼠生殖功能低下模型证候初探

临床报道及药理研究表明，雷公藤能造成育龄期女性生殖功能低下，我们拟用其这一特性建立一新的生殖功能低下动物模型。通过前期药物量效关系研究．我们已初步探索出了雷公藤多甙有效的造模用药剂量及造模时间。本文用临床已知的中药、西药对该模型进行治疗，以探讨该模型的可治疗性，并初探雷公藤多甙致雌性小鼠生殖功能低下模型的证候特点。

雷公藤多甙致大鼠生殖功能低下模型初探

目的:通过测定大鼠动情周期、卵巢和子宫指数、性激素水平及透射电镜下观察卵巢超微结构的改变,探索生殖功能低下大鼠模型的制备方法,进而为临床治疗此类疾病提供可靠的实验依据。方法:采用12周龄SD雌性大鼠20只,随机分为正常组和模型组,模型组借鉴前期研究中小鼠的造模剂量和时间,采用雷公藤多甙40mg/(kg·d)灌胃,连续10周,正常组不给药。分别观察2组大鼠动情周期、性激素、子宫和卵巢指数,并观察卵巢超微结构的改变。结果:与正常组相比,模型组大鼠动情周期紊乱,表现为动情周期缺失、不完整或延长,血清E2/P水平明显下降,子宫及卵巢质量下降且卵巢组织结构受损。结论:胃饲雷公藤多甙40mg/(kg·d)10周能损伤大鼠生殖功能,造成雌性大鼠生殖功能低下。

389例男性生殖功能低下患者细胞遗传学分析

目的探讨男性生殖功能低下与染色体异常的关系。方法对389例生殖功能低下男性患者进行外周血淋巴细胞G显带染色体核型分析。结果 389例患者共检出染色体异常74例,其中性染色体数目异常62例;性染色体结构异常3例,46,XX男性3例,染色体易位5例,携带来源不明的标记染色体1例。结论性染色体异常是导致男性生殖功能低下的重要原因之一。

不同负荷运动后的恢复训练对肥胖雄性小鼠生殖功能的影响

肥胖是男性生殖功能低下的危险因素,运动是改善肥胖所致男性生殖功能低下的重要手段,但不同负荷运动及其运动后的恢复训练对肥胖男性生殖功能低下的影响却值得探究。方法:80只雄性C57BL/6J小鼠随机被分为标准饲料对照组(NC)、肥胖对照组(OC)、肥胖中等负荷运动组(OME)、肥胖大负荷运动组(OHE)、标准饲料恢复组(NR)、肥胖恢复组(OR)、肥胖中等负荷运动恢复训练组(OMER)、肥胖大负荷运动恢复训练组(OHER)。OME组和OMER组进行8周,2 h/d,6 d/周的游泳运动。OHE组和OHER组每天进行2次OME组或OMER组的游泳运动。OMER组和OHER组8周运动干预结束后,再进行恢复性游泳训练,1 h/天,6 d/周,4周后结束。末次运动24 h后测量体长、体重、腹腔脂肪重量、生殖腺重量(睾丸、附睾、精囊腺),测定血清黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、睾酮(T)浓度,显微镜下测定精子浓度和精子活力。结果:肥胖会造成雄性小鼠生殖功能的下降。中等负荷运动和大负荷运动均能显著降低小鼠肥胖程度,且大负荷运动减肥效果更好,但只有中等负荷运动能显著逆转肥胖所致雄性小鼠生殖腺系数、血清性激素水平和精液质量参数的下降。恢复性训练能进一步恢复中等负荷运动后肥胖雄性小鼠的生殖功能,但不能改善大负荷运动后肥胖雄性小鼠生殖功能的低下。结论:中等负荷运动及中等负荷运动后再进行恢复性训练均能显著改善肥胖所致雄性小鼠生殖功能的低下,而大负荷运动和大负荷运动后再进行恢复性训练均不能有效改善肥胖所致雄性小鼠生殖功能的低下。

卵巢早衰检测方式的研究进展

卵巢早衰（premature ovarian failure,POF）通常是指卵巢衰竭所导致女性40岁之前出现闭经的现象.2008年,Weltck等提出用更加科学准确的命名原发性卵巢功能不全（primary ovarian insufficiency,POI）来取代卵巢早衰,使其涵盖的范围更大,包括了卵泡活动的生殖功能低下和卵泡完全衰竭.

男性生精功能损伤中睾丸免疫微环境的改变和机理

免疫微环境异常在多种疾病的发生、发展中扮演重要角色,但其在生殖功能异常中的生物学意义尚待深入研究。为此,我们通过生物信息学方法分析了睾丸免疫相关基因(immune-related genes,IRGs)和免疫细胞在不同生精功能状态下的表达谱,比较其差异,以期阐明生精功能低下的免疫状态改变与潜在机制。Johnsen评分用于评估生精功能损伤程度。结果表明,生精功能损伤的Johnsen 5分组和2分组较正常组(Johnsen 10分)分别有132个和293个差异表达IRGs,基因本体论(gene ontology,GO)分析显示这些IRGs富集于抗原处理与递呈、NK细胞介导的细胞毒性和TCR信号通路等。核心基因(Hub gene)分析表明,STAT3、CCL2与IL13可能在Johnsen 5分组与2分组的免疫紊乱中发挥了关键作用。进一步评估睾丸组织中免疫细胞谱,发现初始B细胞、CD4+静息记忆T细胞在生精功能严重受损的Johnsen 2分组下调。M2巨噬细胞在Johnsen 5分组与2分组均明显增加,静息肥大细胞比例则随受损程度增加而上调。上述结果揭示生精功能低下睾丸免疫豁免功能状态失衡,处于免疫应激状态。结合转录调控与染色体区带定位富集分析,推测生精功能损伤与染色体区域6p21.3有关。本研究为生精功能低下的机制研究与治疗提供了新的理论依据。

蛋白泛素化调控异常可能是男性生精功能受损的核心途径

为了深入了解男性生精功能低下的分子机制,本研究运用生物信息学方法分析男性生精功能低下患者睾丸的转录组,以探索其潜在的发病机制。从GEO数据库选择数据集GSE4797,利用GEO2R在线软件识别差异表达基因(differential expressed genes,DEGs)。使用DAVID进行基因本体(gene ontology,GO)与KEGG通路富集分析,用STRING构建蛋白与蛋白相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络。通过Cytoscape软件MCODE和CytoHubba插件分析DEGs核心模块与Hub基因,并运用TRRUST构建转录因子-靶基因调控网络。结果表明,1637个基因在生精功能低下患者中差异表达,其中636个上调,1001个下调。差异基因集中在蛋白泛素化、免疫反应、细胞周期等生物学程序。进一步做CytoHubba分析显示,前10个Hub基因包括SKP1、FBXO6、FBXO32、FBXO31等,均为蛋白泛素修饰相关基因。此前文献报道泛素化修饰在调控免疫、周期等生物学过程中发挥重要作用,结合本研究的分析结果,我们首次提出:泛素化调控异常是男性生精功能低下的核心通路;泛素化酶可能作为治疗男性不育或生精功能低下的靶点。