微流控芯片技术在生殖研究中的进展

生殖是生物体最基本特征之一,是物种得以延续和进化的保证。近年来,微流控芯片系统得到了迅猛发展,技术也逐渐成熟,具有良好的应用前景。在生殖研究中,微流控技术具有以下优势:微管道的形状和尺寸可以灵活设计,从而更好地模拟生理环境;微流控芯片对样品的消耗量低;微流控技术具有很高的集成性。微流控技术已被应用到精子活力评价与筛选、精子的化学趋向性筛选、卵丘细胞去除、透明带移除、卵细胞定位与筛选、受精过程、早期胚胎培养以及生殖器官模拟等各个方面。该文着重介绍近几年基于微流控技术生殖研究的最新进展,并对其应用前景进行展望。

基于“肾主生殖”理论探讨少弱精子症的生物学基础

在“肾主生殖”理论指导下,古今医家辨治男性不育症以补肾为主,在传承的基础上有所创新和发展。笔者对少弱精子症的认识强调以肾为体,精室为用,提出“肾精亏虚-精室失用”为少弱精子症的核心病机。肾精亏虚是导致少弱精子症的根本原因,精室失用是导致少弱精子症发生和进展的主要因素。生殖微环境紊乱是导致少弱精子症的重要原因之一。从肾论治少弱精子症的生物学基础研究表明,补肾法对生殖微环境具有调节作用。从生殖微环境角度入手,系统揭示“肾精亏虚-精室失用”在少弱精子症发生和病机演变过程中的相应内在分子机制变化,可为临床运用“肾主生殖”理论干预少弱精子症的生物学基础研究提供依据。

CG5844基因沉默、过表达果蝇S2胚胎细胞中的剪接体组分表达观察

目的 观察沉默、过表达CG5844基因的果蝇S2胚胎细胞中的剪接体组分(U2A)表达变化。方法 ①沉默CG5844基因表达的果蝇S2胚胎细胞CG5844基因及U2A表达观察 取S2细胞分为观察A、对照A组,分别转染siCG5844-1(CG5844 siRNA,可沉默CG5844基因表达)、空白质粒。转染48 h时采用qRT-PCR法检测细胞CG5844基因,免疫荧光法检测细胞U2A。②CG5844过表达的果蝇S2胚胎细胞CG5844基因及U2A表达观察 取S2细胞分为观察B、对照B组,分别转染pUAS-attB-CG5844(可过表达CG5844基因)、载体pUAS-attB。转染48 h时采用qRT-PCR法检测 细胞CG5844基因,免疫荧光法检测细胞U2A。结果 观察A、对照A组CG5844基因相对表达量分别为0.29±0.04、1.00± 0,二者比较, P <0.05;观察A、对照A组U2A相对表达量分别为11.34± 0.58 、1.65±0.23,二者比较, P <0.05。观察B、对照B组CG5844基因相对表达量分别为18.87±2.44、1±0,二者比较, P <0.05;观察B、对照B组U2A相对表达量分别为1.30±0.07、2.17±0.06 ,二者比较, P <0.05。结论 沉默CG5844基因的S2细胞中的U2A表达升高,过表达CG5844基因的S2细胞U2A的表达降低。CG5844可能通过调控U2A的表达,影响剪接体的功能,从而调控果蝇生殖干细胞的发生。